以脱脂后的胡麻籽粕为原料,加以超声波辅助碱溶酸沉法对胡麻籽粕中的蛋白质进行提取。运用考马斯亮蓝法对提取液中蛋白质含量进行测定,以蛋白质提取率为指标,对超声波功率、时间、料液比、碱提p H值及温度等单因素进行试验,根据单因素试验结果探讨这五种因素对蛋白质提取率的影响。根据spss18.0对试验数据进行处理,选取对蛋白质提取率影响较大的因素进行正交试验,运用正交试验对单因素提取结果进行优化,并对优化结果进行验证。结果表明,胡麻籽粕中蛋白质的最佳提取工艺为:超声波功率550W、时间2h、料液比1∶30、碱提p H 10、温度50℃,经验证试验后得到蛋白质提取率为63.0%。文中还对酸沉工艺进行了研究,结果表明,在p H为4时,蛋白质含量最高,故确定胡麻籽粕蛋白质等电点为4。
以胡麻籽粕蛋白粉为原料,分别采用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶及中性蛋白酶对胡麻籽粕蛋白进行酶解,以水解度为指标对酶制剂进行筛选。通过单因素及正交试验,以抗氧化性为指标,获取最佳酶解工艺。结果表明,碱性蛋白酶对胡麻籽粕蛋白的酶解效果较好,胡麻籽粕蛋白的最佳酶解工艺为:底物浓度1.5%,p H 8.5,酶底比3%,超声波功率300 W,酶解温度40℃、酶解时间3 h,在此条件下,胡麻籽粕多肽对O2-·和OH-·清除能力分别为42%和30%。
以鹰嘴豆蛋白粉为原料制备鹰嘴豆蛋白抗氧化活性肽,采用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶分别对鹰嘴豆蛋白进行酶解,测定了不同酶作用下的鹰嘴豆多肽抗氧化活性,确定木瓜蛋白酶是酶解鹰嘴豆蛋白的最适蛋白酶。研究了温度、p H、底物浓度、酶添加量等酶解条件对产物抗氧化活性的影响。结果表明,不同的酶解条件对鹰嘴豆多肽的抗氧化活性具有显著影响,最优酶解条件为:温度60℃,p H 6.0,底物浓度3.0%,酶的添加量3.0%,在此条件下酶解180 min,制得的鹰嘴豆多肽具有较高的抗氧化活性,其多肽含量高达71.31%。
