罗朋
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：安徽省立医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-223-3P对肺鳞癌细胞顺铂敏感性的影响被引量：4
- 2020年
- 目的研究miR-223-3p对肺鳞癌细胞顺铂(CDDP)敏感性的影响。方法通过分别升高或降低(miR-223-3p mimics、NC-mimics、miR-223-3p inhibitor、NC-inhibitor)肺鳞癌NCI-H520和SK-MES-1细胞内miR-223-3p的含量后,qRTPCR检测细胞内miR-223-3p基因表达水平;CCK-8法检测细胞半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测细胞加入CDDP药物刺激后凋亡率的改变(分别设计四组不同的处理:miR-223-3p mimics+CDDP、NC-mimics、miR-223-3p inhibitor+CDDP、NC-inhibitor);Transwell实验检测SK-MES-1细胞迁移能力的变化;Western blot法检测SK-MES-1细胞中Bax、ZEB1和E-cadherin的变化。结果CCK-8实验结果表明,miR-223-3p mimics组的IC50低于对照组的IC50,miR-223-3p inhibitor组的IC50高于对照组的IC50;流式细胞术凋亡检测结果显示,miR-223-3p mimics+CDDP(80μmol/L)组细胞凋亡率增加,而miR-223-3p inhibitor+CDDP(80μmol/L)组细胞凋亡率减少;Western blot证实,同时分别升高或降低肺鳞癌细胞内的miR-223-3p含量后,ZEB1蛋白相应的降低和升高,且Bax、E-cadherin蛋白相应的升高和降低。结论miR-223-3p作为抑癌基因影响肺鳞癌细胞对CDDP的敏感性,可作为治疗肺鳞癌CDDP耐药的重要分子靶标。
- 冯坤丽罗朋王保龙
- 关键词：肺鳞癌顺铂耐药
- 人肺鳞癌组织在裸鼠体内的移植成瘤性与其Ki-67表达水平的关系被引量：5
- 2014年
- 目的 ：构建人肺鳞癌组织的裸鼠移植模型,并探讨组织移植成瘤性与Ki-67表达水平的关系。方法 ：选取安徽省立医院胸外科2013年8月—2014年1月经手术切除获得的21例人肺鳞癌组织,1 h内移植于裸鼠皮下,观察成瘤情况,并回顾性比较移植成瘤组和未成瘤组对应患者的肿瘤特性。采用免疫组织化学法检测移植瘤和患者肿瘤组织中p63、细胞角蛋白5/6（cytokeratin 5/6,CK5/6）、甲状腺转录因子-1（thyoid transcription factor-1,TTF-1）和Ki-67的表达情况,并以组织化学评分（H-score）法进一步对Ki-67表达进行半定量分析。采用扩增阻滞突变系统（amplii cation refractory mutation system,ARMS）-PCR方法检测裸鼠移植瘤和患者肿瘤组织中表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）基因第18-21外显子突变情况。结果 ：21例人肺鳞癌组织行裸鼠体内移植后有12例成瘤。裸鼠体内移植的成瘤性和患者肿瘤分化程度（Z=-2.821,P=0.005）及大小（Z=-2.809,P=0.005）有关。裸鼠移植瘤组织中p63、CK5/6、TTF-1和Ki-67表达情况以及EGFR基因突变情况均与来源患者的肺鳞癌组织相一致。裸鼠体内移植成瘤的相应患者肿瘤组织中Ki-67的H-score分值为2.76±0.54,显著高于未成瘤的患者肿瘤组织评分1.37±0.77,差异有统计学意义（t=4.855,P=0.001）。结论：成功构建了人肺鳞癌组织的裸鼠移植瘤模型,移植成瘤性与肿瘤组织中Ki-67表达水平有关,且移植瘤保留了患者肿瘤的基本生物学特性,提示该裸鼠移植瘤模型可为肺鳞癌的研究提供良好平台。
- 罗朋章菊李明邓芳周杭城展丙香程龙强王保龙
- 关键词：KI-67抗原
- Toll样受体信号通路在调控树突状细胞成熟中的作用研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨TLR信号通路在调控树突状细胞(DC)熟过程中的作用。方法用密度梯度离心法从人外周富集血中分离单个核细胞(PBMC),以GM-CSF和IL-4体外诱导成未成熟DC(imDC),用电穿孔法把A549的总RNA转染入imDC,分别用传统细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2)和改良细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2、polyⅠ∶C、CpG ODN)刺激DC的成熟。实验分为4组,对照组:GM-CSF、IL-4;传统组:传统细胞因子鸡尾酒;改良1组:IL-1β、IL-6、TNF-α、polyⅠ∶C、CpG ODN);改良2组:IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2、polyⅠ∶C、CpG ODN。用RTPCR法检测RNA的转染效率,流式细胞术检测DC和DC致敏T细胞的表面标志,ELISA法检测IL-12的分泌水平,MTT法检测T细胞的增殖。结果 1)RT-PCR检测:电穿孔法能使A549的总RNA成功转入DC,并使DC表达组织多肽特异性抗原(TPS)、癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)等肿瘤抗原。2)流式检测:CD83各组表达率分别为(15.17±1.61)%、(64.33±7.58)%、(60.26±4.18)%和(82.89±3.06)%,CD1a表达率分别为(25.74±6.06)%、(69.37±8.16)%、(61.66±5.82)%和(86.07±5.63)%(P<0.05),各组CD8+T细胞比例分别为(36.43±3.15)%、(61.91±2.33)%、(54.81±2.55)%和(66.78±2.74)%(P<0.05)。3)各组IL-12的分泌水平分别为(55.86±14.07)、(1 243.49±57.57)、(744±49.51)和(2 385±128.98)pg/mL(P<0.05)。4)各组刺激指数分别为11.85±2.61、54.14±3.81、47.57±3.14和64.43±5.88,阳性对照组为135.29±5.06(P<0.05)。结论TLR配体polyⅠ∶C和CpG ODN可以促进DC的分化成熟。
- 周志风王保龙魏静蔡秋妍潘健陈家萍应美爱沈佐君李庆黄琼罗朋
- 关键词：电转染CPGODN
- 基于PDTX模型研究原发性肺癌顺铂耐药与ERCC1 IGFBP5表达水平的关系被引量：2
- 2015年
- 目的:构建PDTX(patient-derived tumor xenografts)肺癌模型,探索ERCC1、IGFBP5的表达水平与原发性肺癌顺铂耐药的关系。方法:取新鲜切除的84例肺癌组织移植于裸鼠(BALB/c)的皮下,构建PDTX模型,分析一代成瘤率与临床病理参数关系。三代移植瘤接受顺铂化疗,采用免疫组织化学方法检测敏感组和耐药组ERCC1、IGFBP5的表达情况。结果:移植瘤一代成瘤率32.14%(27/84),二代成瘤率88.89%(24/27),三代成瘤率95.83%(23/24),能否一代成瘤与肿瘤的大小、分化、分级、病理类型相关;此模型移植瘤在传代中能够保持亲代肿瘤的结构特征。ERCC1在耐药组表达高于敏感组,而IGFBP5在耐药组表达低于敏感组。结论:构建了肺癌组织块移植瘤模型,其能够保持亲代癌种的结构特征,是研究肺癌发生和探索肿瘤耐药机制的理想模型。原发性肺癌顺铂耐药性与ERCC1、IGFBP5的表达水平相关。
- 展丙香程龙强罗朋章菊王保龙
- 关键词：肺癌ERCC1顺铂耐药
- 长链非编码RNA在肺癌中的研究进展被引量：4
- 2013年
- 长链非编码RNA（LncRNA）是一类转录本长度超过200nt的RNA，不编码蛋白，大多数位于细胞核，以RNA的形式在多层面上（表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等）调控基因的表达水平。其广泛参与机体的生理和病理过程，在恶性肿瘤的发生和发展中起着重要作用。
- 罗朋王保龙
- 关键词：长链非编码RNA肺癌基因调节
- 以树突状细胞为基础的肿瘤基因治疗的研究进展被引量：3
- 2013年
- 树突状细胞（DC）是目前发现的功能最强大、唯一能够直接激活初始T细胞的抗原提呈细胞（APC），是连接固有免疫和适应性免疫应答的桥梁。因此，DC已经成为免疫治疗一个有吸引力的操作靶点。近年来，基因修饰DC疫苗的出现增强了其抗肿瘤作用，因而对基因修饰的DC为基础疫苗的抗肿瘤作用的研究很有意义。
- 罗朋王保龙
- 关键词：基因修饰疫苗树突状细胞肿瘤
