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大肠杆菌γ-ggt原核表达载体pGEX-4T-1/γ-ggt的构建及其蛋白表达被引量：3: 2007年; 构建大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶原核表达载体pGEX-4T-1/γ-ggt及表达与鉴定目的蛋白,为进一步利用该酶催化合成茶氨酸等目的产物奠定了基础。以大肠杆菌DH5α总DNA为模板,用PCR法在γ-ggt编码序列上下游引入酶切位点并扩增出γ-谷氨酰转肽酶基因;将γ-ggt编码序列克隆入原核表达载体pGEX-4T-1的相应酶切位点;用PCR鉴定重组质粒pGEX-4T-1/γ-ggt,并对插入基因片断测序;重组质粒pGEX-4T-1/γ-ggt转化大肠杆菌BL21(DE3),经乳糖诱导后用SDS-PAGE分析表达产物,并经Westernblot鉴定。获得大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶基因,并成功构建到原核表达载体pGEX-4T-1上,转化有pGEX-4T-1/γ-ggt工程菌BL21(DE3)经1 g/L乳糖诱导1 h后即开始表达目的蛋白,在诱导6 h后表达蛋白量达到最高,随着时间的延长,目的蛋白没有被降解,此蛋白主要以包涵体形式存在,Western blot鉴定了此目的蛋白。成功构建了大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶原核表达载体pGEX-4T-1/γ-ggt,并进行了目的蛋白的鉴定。; 胥俊峰单建华赵宁伟殷志敏; 关键词：Γ-谷氨酰转肽酶

重组大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶的PET载体的选择及乳糖诱导作用的初步研究被引量：5: 2008年; 采用PCR技术以E.coliK-12基因组DNA为模板扩增出γ-谷氨酰转肽酶基因,克隆至原核表达载体pET28(a)和pET32(a)中,经测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3),借助SDS-PAGE分析方法,对于用乳糖诱导,由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的表达规律进行了优化研究。在对诱导条件进行优化控制的前提下,分析比较了乳糖诱导pET28(a)/γ-ggt和pET32(a)/γ-ggt两种重组质粒表达大肠杆菌γ-谷氨酰转肽酶蛋白的可溶性及酶活。实验结果表明,对于T7lac启动子控制的重组目的产物,乳糖作为诱导剂也可以起到很好的诱导表达效果,低温培养下,乳糖诱导pET32(a)/γ-ggt重组质粒表达γ-谷氨酰转肽酶具有更高的蛋白可溶性和酶活。; 胥俊峰贾晓鹤张正平殷志敏; 关键词：Γ-谷氨酰转肽酶克隆乳糖

重组E.coliγ-ggt和gs原核表达载体的构建、蛋白诱导表达与应用和Hsp70、Hsp90及TAK1相关真核表达载体的构建及鉴定: 谷胱甘肽(Glutathione)广泛存在于各种生物体中，主要用于维持胞内正常的氧化还原状态，是生物体内的自由基清除剂，具有抗氧化、解毒、保护细胞等重要的生理作用，在临床医药、食品工业、保健品等方面有着非常广泛的用途。近...; 胥俊峰; 关键词：茶氨酸 Γ-谷氨酰转肽酶原核表达载体真核表达载体; 文献传递

国产717阴离子树脂对酶法合成L-谷氨酰胺的分离与纯化被引量：2: 2008年; 目的:从酶法反应液中分离和纯化谷氨酰胺,并为工业化生产谷氨酰胺提供一定的依据;方法:根据谷氨酸和谷氨酰胺电离常数的差异,采用国产717强碱性阴离子Cl-型拄,经预处理,离交分离,浓缩结晶,75%乙醇洗涤并干燥;结果:反应液中谷氨酰胺总提取收率为60.3%,纯度为97%;结论:此方法能有效地降低纯化的成本,并维持较高得率和纯率。; 赵宁伟胥俊峰贾晓鹤殷志敏; 关键词：谷氨酰胺离子交换纯化

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胥俊峰