芦宝静
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- B组轮状病毒WH-1株nsp2基因的原核表达与抗体制备
- 2006年
- 根据B组轮状病毒(GBRV)WH-1株nsp2基因的全序列,设计引物,用PCR的方法扩增得到nsp2基因的编码区.将其片段克隆到原核表达载体pGEX-KG上,经IPTG诱导,在E.coliDH5α菌株中得到高效表达.表达的GST融合蛋白大小为61×103,经SDS-PAGE分离纯化,免疫小白鼠制备了多克隆抗体.抗体经1∶3 000倍稀释后用于Western Blot分析,获得特异性显色信号.所表达的蛋白和制备的抗体可用于蛋白结构和功能的进一步研究.
- 尹素改芦宝静王汉中杨继红
- 关键词：NSP2基因蛋白表达抗体制备
- SARS-CoV结构蛋白的功能、免疫学特性以及类病毒颗粒粘膜免疫原性研究
- 2003年4月，SARS冠状病毒(SARS-CoV)被证实是引起严重急性呼吸道综合症(Severe acute respiratory syndrome，SARS)的致病因子。该病毒主要通过呼吸道及粘膜接触感染，由于其具...
- 芦宝静
- 关键词：SARS冠状病毒粘膜免疫中和抗体
- B组轮状病毒WH-2株vp7基因的原核表达与抗体的制备
- 2007年
- 目的:在大肠杆菌中表达人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白并制备其兔抗血清。方法:根据B组轮状病毒(GBRV)WH-2株vp7基因的全序列设计引物,用PCR的方法扩增得到vp7基因的编码区。将其克隆到原核GST融合表达载体pGEX-KG内,转化大肠杆菌E.coliDH5α,IPTG诱导表达人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白,经SDS-PAGE分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白抗血清。结果:经鉴定确认,vp7基因以正确的方式插入到载体中,此重组表达载体经IPTG诱导后,可表达相对分子量为53.4 kDa的GST-VP7融合蛋白。制备的抗血清经同样诱导表达的表达载体pGEX-KG表达产物吸收后1:500倍稀释后用Western Blot分析,与53.4 kDa的GST-VP7融合蛋白获得特异性显色信号。结论:人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白成功在大肠杆菌中GST融合表达,所表达的蛋白和制备的抗体不但为研究结构与功能提供了物质基础,也为GBRV所引起的疾病预防、诊断和治疗等流行病学研究和临床诊断奠定了基础,具有重要实际应用价值。
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- 关键词：VP7基因克隆抗体制备
