陈佳瑜
- 作品数：11 被引量：35H指数：4
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- 人白介素-12转基因马铃薯表达体系中hIL-12的表达
- 2007年
- 目的研究本实验室初步建立的人白介素12(hIL-12)转基因马铃薯表达体系中hIL-12的表达。方法ELISA法检测转基因马铃薯中hIL-12的表达情况。结果2株转基因马铃薯茎叶中有hIL-12的表达,与对照组相比有显著性差异(P<0.01);转基因马铃薯5～7子代中hIL-12的表达量无显著性差异。结论本实验室建立的人白介素-12转基因马铃薯表达体系能表达hIL-12,并且遗传性状相对稳定。
- 陈佳瑜葛正龙
- 关键词：马铃薯转基因植物
- 转基因马铃薯中人白介素-12的生物学活性被引量：1
- 2010年
- 目的检测转基因马铃薯体系中表达的人白介素-12(human interleukin 12,hIL-12)的肿瘤杀伤活性。方法通过ELISA法检测转基因马铃薯中hIL-12刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生IFN-γ的量以反映生物学活性,并观察hIL-12单克隆抗体对此生物活性的阻断效应;MTT法检测经转基因马铃薯中hIL-12作用的PBMC对NK敏感肿瘤细胞K562的杀伤作用,肿瘤细胞凋亡以Annexin V/PI双染后激光共聚焦显微镜观察。结果转基因马铃薯叶和块茎中表达的hIL-12与重组人白介素-12(rhIL-12)标准品在25～400 pg/ml间均能诱生IFN-γ,其中转基因马铃薯叶和块茎中hIL-12刺激PBMC产生IFN-γ的量分别为(163.34±22.17)～(12 107.10±3 996.51)pg/ml和(224.20±25.76)～(11 196.30±4 067.48)pg/ml,与野生对照组均有统计学差异(P<0.01),而hIL-12单克隆抗体能完全阻断此诱生IFN-γ效应。同时200 pg/ml转基因马铃薯叶、块茎中提取的hIL-12对人红白血病细胞K562的杀伤率分别为(28.4±8.7)%、(32.3±6.9)%,而与野生对照组(10.3±4.9)%的杀伤率相比,有统计学差异(P<0.05)。激光共聚焦显微镜观察到经转基因马铃薯表达hIL-12作用的K562细胞出现早、中、晚各期的凋亡特征。结论转基因马铃薯表达的hIL-12具有诱导PBMC产生IFN-γ及杀伤肿瘤细胞K562的生物学活性。
- 陈佳瑜刘喜平葛正龙
- 关键词：生物活性马铃薯转基因植物
- 转基因马铃薯中人白介素-12体外诱导人肝癌细胞凋亡的研究被引量：3
- 2010年
- [目的]检测从人白介素-12(human interleukin12,hIL-12)转基因马铃薯中提取的hIL-12的抗肝癌效应。[方法]用MTT法检测转基因马铃薯中hIL-12对人肝癌细胞HepG22.2.15的体外杀伤作用;用AnnexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察转基因马铃薯中hIL-12对HepG22.2.15细胞的诱导凋亡作用。[结果]转基因马铃薯中表达的hIL-12与重组人白介素-12(rhIL-12)在体外对HepG22.2.15具有杀伤作用,而野生对照组无杀伤作用;AnnexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察结果表明,转基因马铃薯中表达hIL-12可诱导HepG22.2.15细胞凋亡。[结论]转基因马铃薯表达体系表达的人白介素-12具有抗肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡的作用。
- 陈佳瑜许洁葛正龙
- 关键词：抗肿瘤作用转基因马铃薯
- HBx-siRNA下调HepG2.2.15细胞中血管内皮生长因子的表达
- 2014年
- 目的研究HBx干扰质粒pSIHBV/X对肝癌细胞HepG2.2.15中VEGF表达的影响。方法将针对HBx基因的干扰质粒载体pSIHBV/X转染HepG2.2.15细胞,用Real-time PCR检测转染前后细胞HBx、VEGF基因mRNA表达,Western blot法检测细胞VEGF蛋白表达。结果Real-time PCR检测结果显示,转染后24h、48h、72h实验组HepG2.2.15细胞中HBx基因mRNA相对表达水平分别为(121.13±8.72)、(83.17±7.930)、(56.33±6.17);24h、48h、72h实验组HepG2.2.15细胞中VEGF基因mRNA相对表达水平分别为(76.26±7.16)、(59.17±6.420)、(42.17±4.33);Western blot检测结果显示,24h、48h实验组HepG2.2.15细胞中VEGF蛋白相对表达水平分别为(0.357±0.025)、(0.218±0.051)。Western blot及RT-PCR结果显示,与对照组相比实验组中VEGF mRNA及蛋白的表达量明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶向HBx的siRNA干扰质粒能抑制HepG2.2.15细胞中VEGF mRNA和蛋白的表达。
- 李长福庄海陈佳瑜范芳
- 关键词：RNA干扰HBX基因血管内皮生长因子
- Artemis影响人肝癌细胞BEL-7402/5-FU化疗药物敏感性的研究（英文）被引量：1
- 2018年
- 目的探讨Artemis对人肝癌耐药细胞株BEL-7402/5-FU化疗药物敏感性的影响及其可能机制。方法将p SGU6/GFP/Neo/sh Artemis干扰质粒转染人肝癌耐药细胞BEL-7402/5-FU(sh Artemis组),通过Real-time PCR法检测P-gp基因表达水平变化;MTT法检测sh Artemis组细胞对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素及索拉菲尼的IC50值和RI值;利用Western-blot法检测p-Artemis和ATM蛋白水平表达变化;使用ATM抑制剂KU55933联合丝裂霉素作用细胞48 h,Westernblot法观察ATM、γ-H2AX和Artemis蛋白水平表达变化。结果与对照组比较,sh Artemis组的P-gp mRNA表达水平下降(P<0.05),且对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和索拉菲尼的敏感性增加,IC50值和RI值均降低(P<0.05)。sh Artemis组的pArtemis与ATM蛋白表达水平降低(P<0.05);KU55933联合丝裂霉素作用细胞后,有效减少ATM蛋白的表达(P<0.05),同时γ-H2AX蛋白表达量增加(P<0.05),但Artemis蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论靶向干扰Artemis的表达能够增强细胞BEL-7402/5-FU对化疗药物的敏感性。此效应可能与Artemis作为BEL-7402/5-FU DNA损伤修复的分子开关,进而通过影响ATM参与DNA损伤修复有关。
- 李宇婷张雪范芳李大玉余春波陈佳瑜刘云李长福
- 关键词：ARTEMIS化疗敏感性肝癌
- 转基因马铃薯中人白介素-12体外诱导人肝癌细胞凋亡的研究(英文)被引量：4
- 2010年
- [目的]检测从人白介素-12(human interleukin 12,hIL-12)转基因马铃薯中提取的hIL-12的抗肝癌效应。[方法]用MTT法检测转基因马铃薯中hIL-12对人肝癌细胞HepG22.2.15的体外杀伤作用;用AnnexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察转基因马铃薯中hIL-12对HepG22.2.15细胞的诱导凋亡作用。[结果]转基因马铃薯中表达的hIL-12与重组人白介素-12(rhIL-12)在体外对HepG22.2.15具有杀伤作用,而野生对照组无杀伤作用;An-nexinV/PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察结果表明,转基因马铃薯中表达hIL-12可诱导HepG22.2.15细胞凋亡。[结论]转基因马铃薯表达体系表达的人白介素-12具有抗肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡的作用。
- 陈佳瑜许洁葛正龙
- 关键词：抗肿瘤作用转基因马铃薯
- 母体暴露壬基酚对仔鼠肝脏的损伤作用被引量：11
- 2008年
- [目的]研究母体暴露壬基酚对仔鼠肝脏的损伤。[方法]母鼠孕14￣19 d灌胃壬基酚(0、40、80、200mg/kg),检测F1仔鼠90 d龄肝脏GSH-PX、SOD活性及MDA含量。[结果]NP 80、200 mg/kg组肝脏GSH-PX及SOD活性明显下降;NP 200 mg/kg组MDA含量上升,病理切片见肝脏中央静脉扩张充血,肝细胞脂肪变性或灶状坏死。[结论]壬基酚可透过胎盘屏障致仔鼠肝脏脂质过氧化损伤。
- 许洁李研陈佳瑜范奇元
- 关键词：壬基酚仔鼠肝脏
- 人白介素-12转基因马铃薯中hIL-12的表达被引量：7
- 2010年
- [目的]研究人白介素-12转基因马铃薯中hIL-12的表达。[方法]采用ELISA和WesternBlot,检测转基因马铃薯中hIL-12的表达情况。[结果]转基因马铃薯叶与块茎中均能被hIL-12p70二聚体特异性的抗体识别的蛋白表达,与野生对照组相比均有0.01水平显著差异。WesternBlot分析结果显示,在40kD处有特异性的蛋白条带出现。[结论]所建立的人白介素-12转基因马铃薯表达体系能正确、有效表达hIL-12二聚体。
- 陈佳瑜罗果葛正龙
- 关键词：马铃薯转基因植物
- 从转基因马铃薯中纯化的人白细胞介素-12的生物学活性分析被引量：3
- 2008年
- 目的研究从转人白细胞介素-12(hIL-12)基因马铃薯中纯化的hIL-12的生物学活性。方法ELISA法测定纯化的hIL-12诱使外周血单个核细胞产生IFN-γ的量。结果纯化的hIL-12在体外能刺激PBMC产生IFN-γ,而野生对照组无作用。结论本实验室从转hIL-12基因马铃薯中纯化的hIL-12具有生物学活性。
- 黄进陈佳瑜罗果葛正龙
- 关键词：纯化转基因马铃薯
- 壬基酚对仔代脑组织AchE和ChAT活性的影响被引量：10
- 2009年
- 目的:研究母体暴露壬基酚对仔鼠学习记忆及脑组织AchE和ChAT活性的影响。方法:母鼠孕9～15d灌胃壬基酚(0、50、100、200mg/kg),用Morris水迷宫法观察壬基酚对仔鼠学习记忆的影响;检测F1仔鼠垂体和海马组织乙酰胆碱脂酶(AchE)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)的活性。结果:与阴性对照组比较,NP200mg/kg组仔鼠水迷宫中逃避潜伏期延长,脑组织ChAT活性明显下降、AchE活性上升(P<0.05)。结论:壬基酚可透过胎盘屏障影响仔鼠学习记忆功能,机理可能与影响胆碱能神经系统功能有关。
- 卢宁俞捷许洁陈佳瑜张仁义继海续
- 关键词：壬基酚仔鼠神经毒性
