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小鼠胚泡黏附时子宫内膜Galectin-1的变化被引量：5: 2004年; 目的:探讨小鼠胚胎黏附时子宫内膜Galectin-1的变化。方法:双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)分析妊娠d 5小鼠胚泡黏附时着床点、着床旁子宫内膜总蛋白,以同龄未交配鼠子宫内膜为对照,差异蛋白质组学显示pI约5.1、分子量约15 ku的蛋白点在着床点、着床旁子宫内膜表达上调,且在着床点更明显。对此蛋白点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定其胶内酶解后的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)。结果:Mascot: PMF在SWISS-PROT数据库查询为鼠源性Galectin-1。RT-PCR结果显示d 5孕小鼠子宫内膜Galectin-1 mRNA水平也明显增加。结论:Galectin-1可能参与胚泡着床这一重要生命活动过程。; 潘卫王应雄黎刚翁亚光刘孝云; 关键词：GALECTIN-1 着床蛋白质组肽质量指纹谱

一种基于滚环扩增反应检测肿瘤细胞的方法: 本发明公开了一种基于滚环扩增反应检测肿瘤细胞的方法，属于生化检测和分子诊断领域，其技术方案要点是，步骤如下：S1、选出特异性结合MUC1的适配体S2.2，并设计与适配体S2.2部分互补的核酸链CDNA；S2、使适配体S2...; 刘秋云望芳鸣黎刚; 文献传递

自然流产患者绒毛EVTs的基因芯片初步分析被引量：1: 2010年; 目的:探讨自然流产绒毛外滋养细胞(Extravillous trophoblast cells,EVTs)侵袭相关基因表达变化。方法:利用U133plus2.0芯片对自然流产绒毛和正常绒毛组织中EVTs的基因表达谱进行检测,并用生物信息学方法对检测结果进行分析。结果:与正常EVTs相比,在自然流产EVTs中,发现显著上调基因219个,下调基因293个,其功能主要涉及细胞粘附、免疫应答、代谢等。结论:与滋养层细胞细胞粘附、免疫应答、水解酶及凋亡等相关基因的差异表达可能与滋养细胞侵袭行为变化及自然流产有关。; 余秋波胡建刚王应雄黎刚谭彬何俊琳; 关键词：自然流产基因表达谱

PRP基因绿色荧光蛋白载体构建及其生物学功能初步研究被引量：1: 2011年; 目的:构建Prolifein related protein(PRP)基因荧光表达载体,并初步探讨其生物学功能。方法:提取小鼠睾丸RNA,RT-PCR扩增PRP基因编码区片段,酶切连入pEGFP-C1载体,构建含有PRP基因片段的绿色荧光表达载体PRP-pEGFP-C1。为了探讨PRP基因功能,PRP-pEGFP-C1经Lipofectamine 2000介导转染293FT细胞,MTT实验分析细胞增殖变化,流式细胞仪分析细胞周期分布。结果:质粒PRP-pEGFP-C1经测序验证,证实PRP基因已正确连入pEGFP-C1载体。免疫荧光染色显示PRP定位于293FT细胞胞浆。MTT结果表明,上调PRP基因引起293FT细胞增殖活性下降,细胞周期分布情况提示G1期细胞增加,S期细胞减少。结论:成功构建PRP-pEGFP-C1荧光表达载体,对其功能研究表明PRP具有抗人293FT细胞增殖,扰乱细胞增殖周期的功能。本研究为PRP在抗人肿瘤方面的研究提供基础。; 王琦郝杰赵丽娜吕自兰王丽敏余秋波王应雄黎刚; 关键词：RELATED PROTEIN

小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1/NDPK A的表达被引量：1: 2004年; nm23家族除与肿瘤转移抑制有关,它还参与调节正常细胞的发育、增殖、分化及凋亡等过程。运用RT-PCR、Western blot 和免疫组织化学技术,分析小鼠胚泡黏附时子宫内膜着床点和着床旁组织nm23-M1/NDPK A 的表达,以未交配鼠作对照,为进一步阐明胚泡着床的机制提供有意义的实验依据。RT-PCR 结果显示,小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1/NDPK A mRNA 表达明显高于对照组,并且着床点明显高于着床旁,Western blot 和免疫组织化学分析nm23-M1/NDPK A 蛋白表达,也得到一致的结果。提示nm23-M1/NDPK A 参与胚泡着床这一重要生命活动过程。; 潘卫王应雄黎刚杨戎何俊琳刘学庆; 关键词：着床 RT-PCR 小鼠胚泡子宫内膜胚胎

一种SPOP基因杂合性缺失的熔解曲线分析检测试剂盒及其检测方法和应用: 本发明提供了一种SPOP基因杂合性缺失的熔解曲线分析检测试剂盒及其在卵巢癌检测中的应用，该试剂盒使用了卵巢癌抑癌基因SPOP，包括用于高分辨率熔解曲线分析的SPOP特异引物、DNA提取试剂、LC480 HRM maste...; 杨竹于超余秋波黎刚吴兰香李春莉; 文献传递

自然流产患者蜕膜组织疾病特异蛋白的初步筛选与鉴定被引量：2: 2010年; 目的建立早期自然流产蜕膜组织和早期正常蜕膜组织双向电泳图谱,并观察两者之间蛋白表达的差异。方法采用双向电泳技术分离蜕膜组织蛋白,利用专用软件分析所得差异明显蛋白并使用免疫组化和Western blotting验证双向电泳结果。结果成功建立了早期自然流产蜕膜组织和早期正常蜕膜组织双向电泳图谱,并鉴定出9个差异显著的蛋白。结论 9个差异显著的蛋白的功能主要涉及绒毛外滋养细胞的侵袭、自然流产蜕膜组织血管的重建以及蜕膜细胞的凋亡等方面,为进一步研究自然流产发病机制和治疗手段奠定了基础。; 陈倩谭彬王应雄黎刚胡建刚余秋波; 关键词：自然流产蜕膜蛋白质组学

肿瘤抑制基因Nm23-M1原核表达载体的构建和表达: 2006年; 目的:构建鼠Nm23-M1基因的原核表达载体并进行表达。方法:应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术扩增Nm23-M1基因,将其克隆于pQE30质粒中,测序正确后,构建重组体pQE30-Nm23-M1,在大肠杆菌中诱导NM23-M1蛋白表达。结果:SDS-PAGE凝胶电泳分离显示,在分子量大约17.5kD处有一诱导表达蛋白带,表达蛋白量占菌体蛋白量的15%,通过Westernblot证实,表达产物与抗人Nm23-H1单克隆抗体有特异性免疫反应。经Ni-NTA柱纯化,获得电泳均一性为92%的重组蛋白。结论:成功构建Nm23-M1表达载体,并获得了重组NM23-M1蛋白。; 刘芳王应雄翁亚光何俊琳刘学庆杨曦黎刚; 关键词：基因表达

人可溶性 gp1 90在酵母Pichiapastoris中的表达(英文)被引量：2: 2004年; 人可溶性 gp190 (sgp190 )是白血病抑制因子 (LIF)的可溶性受体 ,可能在LIF行使众多生物学功能中扮演着重要的角色。为获得这一蛋白以研究它在人体内的生物学活性 ,在酵母Pichiapastoris中实现了重组sgp190分泌表达。利用基因重组技术 ,将编码人可溶性 gp190 (LIF受体α亚基 gp190胞外区 )cDNA克隆到毕赤酵母Pichiapastoris分泌表达载体 pPIC9K ,构建了重组表达质粒 pPIC9K sgp190。原生质体法转染PichiapastorisGS115菌株 ,经过G4 18筛选 ,得到了高效分泌表达sgp190蛋白的毕赤酵母菌株GS115 / pPIC9K sgp190 ,sgp190蛋白占摇瓶培养表达上清中总蛋白质的 2 6 %。经初步纯化 ,对表达产物的性质鉴定表明 ,其分子量约 12 5kD ,具有免疫活性。; 黎刚王应雄潘卫刘学庆何俊琳翁亚光陈雪梅; 关键词：毕赤酵母白血病抑制因子受体可溶性受体分泌表达白血病基因重组技术

精液蛋白质组研究进展: 2005年; 后基因组时代的主要研究任务之一即是蛋白组研究。蛋白质组学方法发展迅速 ,已被广泛应用于寻找生理状态与疾病相关的差异表达蛋白质。生殖技术已取得了很大的进展 ,但人们对生殖尤其是人类生殖的分子机制了解仍很贫乏。受精是雌雄配子发育向新的合子个体发育转变的枢纽。利用蛋白质组研究技术分析精液 ,可从蛋白质分子整体水平了解受精的机制。; 黎刚潘卫王应雄; 关键词：蛋白质组精子精液受精

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黎刚

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