吉冬梅 作品数:12 被引量:71 H指数:5 供职机构: 复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术发展基金 上海市现代生物与新药产业发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
软骨血管生成抑制因子抑制血管生成及其抗肿瘤作用的研究 1998年 测定了小牛软骨血管生成抑制因子(cartilageangiogenesisinhibitoryfactor,CAIF)对血管内皮细胞的细胞毒作用、对内皮细胞骨架系统及其运动迁移的抑制效应、对小鼠肿瘤生长的抑制效应.结果表明CAIF对血管内皮细胞产生明显的细胞毒作用,对内皮细胞骨架具有明显的抑制作用,能显著抑制内皮细胞的运动迁移,并显著抑制小鼠肿瘤的生长.提示CAIF的抗肿瘤作用机制可能是:通过抑制血管内皮细胞的骨架系统及其分裂增殖,并抑制内皮细胞的运动迁移,从而抑制血管内皮芽的形成和新生血管的生成.由于切断了肿瘤的营养供应及血道转移途径,从而抑制肿瘤的生长和转移. 沈先荣 吉冬梅 贾福星 黄建生 刘为平 任大明 姚锡惠 龚叶芳 王玲 雷呈祥 杨哓燕 孙加红关键词:软骨 血管生成 抗肿瘤作用 肿瘤防治 一种新的血管生成抑制因子—TSF的设计及表达 被引量:5 2002年 目的 选择 PF4和 TSP1的高活性片段设计融合基因— TSF,在大肠肝菌表达 ,细胞水平上检测表达产物的生物学活性。方法 PF4的 C—末端 13肽和 TSP1的 4 2 9~ 4 5 9片断 31肽通过 Gly-Pro- Gly肽桥设计为融合蛋白— TSF。采用 p GEX- 2 T载体在 E.coli JM10 9中表达 TSF蛋白。采用 MTT方法测定 TSF及其相关物 GST- TSF、PF4 (5 8- 70 )、TSP1(42 9~ 4 5 9)等对血管内皮细胞、平滑肌细胞、QGY772 1人肝癌细胞、HL F人肺成纤维细胞等生长的抑制效应。结果 合成的 TSF融合基因 ,克隆到p GEX- 2 T载体 ,转化 E.coli JM10 9,获得了 TSF蛋白的高效表达。建立了 TSF蛋白的纯化复性方法 ,获得了 GST- TSF融合蛋白及 TSF蛋白。TSF、GST- TSF、PF4 (5 8~ 70 )和 TSP1(42 9~ 4 5 9)均特异抑制血管内皮细胞的生长 ,其中 TSF的活性最强 ,活性大小次序为 TSF>GST- TSF>PF4 (5 8~ 70 ) >TSP1(42 9~ 4 5 9)。结论 融合表达蛋白— TSF在细胞水平上能高效特异抑制血管内皮细胞的生长。 沈先荣 吉冬梅 贾福星 胡幼卿 蒋定文 邓新贤 储智勇 王玲 雷呈祥 黄建生 胡忻然 任大明关键词:凝血酶敏感蛋白-1 血管生成 基因表达 血管内皮细胞 肿瘤细胞 血管生成抑制因子TSF的设计、表达及其对血管生成的抑制效应 被引量:3 2001年 PF4的C-末端13肽和TSP1的429~459片段31肽通过Gly-Pro-Gly肽桥设计为融合蛋白TSF.采用pGEX-2T载体在 E.coliJM109中获得了 TSF蛋白的高效表达.采用 MTT方法、损伤细胞迁移实验。鸡胚绒毛尿囊膜实验和小鼠移植肿瘤抑制实验,测定了TSF及其相关物GST-TSF,PF4(58-70),TSP1(429~459)等对血管生成和肿瘤生长的抑制效应.结果显示TSF特异抑制小牛主动脉血管内皮细胞的生长,并有明显的剂量依赖关系;非常显著抑制血管内皮细胞的运动迁移;显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜的新生血管生成;上述抑制活性TSF>>GST-TSF>PF4(58~70)>TSP1(429~459).TSF显著抑制小鼠Lewis肺癌的生长,1.0μmol/kg·d的TSF对Lewis肺癌的抑瘤率达到68.75%.结果说明TSF的重组设计是成功的,TSF为一个人工重组的有效的血管生成抑制因子. 沈先荣 吉冬梅 胡幼卿 贾福星 邓新贤 王玲 储智勇 蒋定文 雷呈祥 黄建生 胡忻然 任大明关键词:PF4 TSP1 血管生成抑制因子 基因表达 肿瘤防治 鲨鱼软骨提取物对小鼠Lewis肺癌生长的抑制效应 被引量:9 2002年 目的 探讨含有血管生成抑制因子、肿瘤细胞抑制因子和酸性粘多糖的鲨鱼软骨提取物对小鼠接种肿瘤生长的抑制效应。方法 用东海鲸鲨软骨制备得到鲨鱼软骨提取物。采用 C57BL / 6小鼠 ,小鼠 L ewis肺癌腋皮下接种模型 ,接种第 2天腹腔注射给药 ,连续给药 8d,观察抑瘤率 ;小鼠 L ewis肺癌足趾皮下接种模型 ,接种第 2天腹腔注射给药 ,连续给药 10 d,观察抑瘤率。结果 腋皮下接种模型 ,高剂量组 12 5 mg/ kg的抑瘤率为 46 .6 1% ,中剂量组 5 0 m g/ kg的抑瘤率为 37.5 6 % ,低剂量组 2 0mg/ kg的抑瘤率为 2 6 .2 4% ;足趾皮下接种模型 ,超高剂量组 2 5 0 mg/ kg抑瘤率为 5 7.6 8% ,高剂量组12 5 mg/ kg为 5 4.44 % ,中剂量组 5 0 mg/ kg为 42 .6 4% ,低剂量组 2 0 m g/ kg为 33.87%。 王曦 沈先荣 贾福星 蒋定文 任大明 吉冬梅 王玲 储智勇 雷呈祥关键词:鲨鱼软骨 LEWIS肺癌 肿瘤治疗 鲨鱼软骨血管生成抑制因子的抗体制备与组织特异性表达的检测 被引量:1 2000年 纯化鉴定了鲨鱼软骨血管生成抑制因子 (SharkCartilage derivedAngiogenesisInhibitoryFactor Ⅰ ,SCAIF Ⅰ )的纯度及分子质量 .采用新西兰大白兔背部皮下多点注射法制备了SCAIF Ⅰ的多克隆抗体 ,测定了抗体的效价 .通过Westernblot检测 ,证明了SCAIF Ⅰ相关蛋白在哺乳动物中的广泛分布及SCAIF Ⅰ在鲨鱼软骨中的组织特异性表达 . 胡幼卿 沈先荣 邓新贤 吉冬梅 胡忻然 黄建生 任大明关键词:鲨鱼 软骨 血管生成 抗体制备 丙型肝炎病毒多表位抗原在小鼠与家兔中的免疫应答 被引量:6 1999年 在丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus,HCV)基因组中优选 5个具有良好免疫原性的高度保守T/B细胞表位 ,组合成一个HCV多表位抗原基因 ,并与β 半乳糖苷酶基因融合后在E .coli中高效表达了具有HCV免疫特异性的GZ PCX抗原 .纯化的蛋白质免疫小鼠与家兔后 ,诱发了高滴度 ( 10 -6)的抗 GZ PCXIgG ,并可在高水平上维持数月 .弗氏完全佐剂与死减毒鼠伤寒沙门氏菌均可发挥高效的佐剂效应 .用GZ PCX抗原及其表位多肽刺激后 ,可诱发较高水平的特异性CTL应答、迟发性超敏反应及淋巴细胞增殖 .在免疫小鼠的肠道灌洗液中可检测到抗 GZ PCXsIgG .免疫后小鼠未见明显的毒副反应 ,具有良好的安全性 ,可望发展一种针对不同型。 黄建生 彭春娴 解咏梅 张潜 沈先荣 吉冬梅 SaidA.Saleh 贾福星 KazunariK.Yokoyama 许谆 郑维扬 兰和魁 郭明秋 任大明关键词:多表位抗原 疫苗 免疫应答 丙型肝炎病毒 tTSF基因的酵母表达及其基因治疗研究 2006年 目的选择PF4,TSP1的高活性片段及肿瘤细胞靶向肽,设计合成融合基因-tTSF,进行酵母表达及小鼠基因治疗研究。方法根据PF4和TSP1的抑制血管生成高活性片段设计合成TSF基因,并在N-端接上肿瘤细胞靶向肽,设计合成了tTSF。将tTSF基因构建到pPIC9质粒,重组质粒pPICg/ tTSF转化GS115酵母菌株进行表达,并检测表达产物对血管内皮细胞生长的抑制作用。将tTSF基因克隆到pcDNA3.1(+)载体,重组质粒pcDNA3.1(+)/tTSF通过皮下注射治疗C57BL/6小鼠移植肿瘤 Lewis肺癌。结果重组质粒pPIC9/tTSF转化GS115酵母菌株后,获得了tTSF的高效表达,表达产物对血管内皮细胞生长产生明显的抑制作用;皮下注射重组质粒pcDNA3.1(+)/tTSF后,C57BL/6小鼠移植肿瘤Lewis肺癌的生长受到明显抑制。结论 tTSF基因设计成功,其酵母表达产物对血管内皮细胞生长产生具有明显的抑制作用,tTSF基因的体内基因治疗也具有显著的抗肿瘤效应。 沈先荣 胡幼卿 兰和魁 吉冬梅 蒋定文 贾福星 任大明关键词:血管生成 PF4 TSP1 两种新的鲨鱼血管生成抑制因子(SCAIF18、SCAIF80)的分离纯化与生物学效应研究 吉冬梅关键词:鲨鱼 软骨 血管生成 血管生成抑制因子 鲨鱼软骨血管生成抑制因子及其分离纯化方法 一种鲨鱼软骨血管生成抑制因子及其分离纯化的方法。该鲨鱼软骨血管生成抑制因子SCAIF-I其SDS-PAGE电泳结果银染显示一条带,分子量为18000。它以鲨鱼软骨为原料,经盐酸胍溶液抽提,有机溶剂分级沉淀,Resourc... 沈先荣 吉冬梅 贾福星 任大明 孙加红 黄建生 雷呈祥 杨晓燕 王玲 刘为平文献传递 鲨鱼软骨血管抑制因子的高效液相色谱与电喷雾质谱研究 被引量:3 1999年 The studies of SCAIF I(an unknown protein) by HPLC and ESIMS was reported in this paper. The SCAIF I is a kind of antiangiogenesis extracted from shark cartilage. The extracted protein was purified by HPLC and then studied by ESIMS. The molecule weight of the SCAIF I protein was confirmed to be 15 601 in the first time. Peptide map of the unknown protein was obtained by HPLC ESIMS with a trypsin digestion and possible partial sequences were deduced with the online CID technique. With partial sequence information the homologous proteins are searched with protein database. The homology of SCAIF I summarized in this work is useful in further studies of this unknown protein. 岳贵花 杨芃原 沈先荣 吉冬梅 任大明 刘为平 许云敏 王洪海关键词:鲨鱼软骨 血管抑制因子 液相色谱 电喷雾质谱