胡幼卿
- 作品数:8 被引量:33H指数:3
- 供职机构:复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 血管生成抑制因子TSF的设计、表达及其对血管生成的抑制效应被引量:3
- 2001年
- PF4的C-末端13肽和TSP1的429~459片段31肽通过Gly-Pro-Gly肽桥设计为融合蛋白TSF.采用pGEX-2T载体在 E.coliJM109中获得了 TSF蛋白的高效表达.采用 MTT方法、损伤细胞迁移实验。鸡胚绒毛尿囊膜实验和小鼠移植肿瘤抑制实验,测定了TSF及其相关物GST-TSF,PF4(58-70),TSP1(429~459)等对血管生成和肿瘤生长的抑制效应.结果显示TSF特异抑制小牛主动脉血管内皮细胞的生长,并有明显的剂量依赖关系;非常显著抑制血管内皮细胞的运动迁移;显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜的新生血管生成;上述抑制活性TSF>>GST-TSF>PF4(58~70)>TSP1(429~459).TSF显著抑制小鼠Lewis肺癌的生长,1.0μmol/kg·d的TSF对Lewis肺癌的抑瘤率达到68.75%.结果说明TSF的重组设计是成功的,TSF为一个人工重组的有效的血管生成抑制因子.
- 沈先荣吉冬梅胡幼卿贾福星邓新贤王玲储智勇蒋定文雷呈祥黄建生胡忻然任大明
- 关键词:PF4TSP1血管生成抑制因子基因表达肿瘤防治
- 鲨鱼软骨血管生成抑制因子的抗体制备与组织特异性表达的检测被引量:1
- 2000年
- 纯化鉴定了鲨鱼软骨血管生成抑制因子 (SharkCartilage derivedAngiogenesisInhibitoryFactor Ⅰ ,SCAIF Ⅰ )的纯度及分子质量 .采用新西兰大白兔背部皮下多点注射法制备了SCAIF Ⅰ的多克隆抗体 ,测定了抗体的效价 .通过Westernblot检测 ,证明了SCAIF Ⅰ相关蛋白在哺乳动物中的广泛分布及SCAIF Ⅰ在鲨鱼软骨中的组织特异性表达 .
- 胡幼卿沈先荣邓新贤吉冬梅胡忻然黄建生任大明
- 关键词:鲨鱼软骨血管生成抗体制备
- 新型血管抑制因子hTSF基因的克隆、表达及基因治疗研究
- PF-4和TSP-1同为血小板α颗粒蛋白,国内外多种文献报道了其抗血管增生活性.它们的不同降解片段具有不同的活性,其中PF-4的C末端13肽和TSP-1的429~459片段具有较强的活性,我们将这两个活性片段和另一段肿瘤...
- 胡幼卿
- 关键词:血管生成血管生成抑制因子TSP-1肿瘤治疗
- 文献传递
- 一种新的血管生成抑制因子—TSF的设计及表达被引量:5
- 2002年
- 目的 选择 PF4和 TSP1的高活性片段设计融合基因— TSF,在大肠肝菌表达 ,细胞水平上检测表达产物的生物学活性。方法 PF4的 C—末端 13肽和 TSP1的 4 2 9~ 4 5 9片断 31肽通过 Gly-Pro- Gly肽桥设计为融合蛋白— TSF。采用 p GEX- 2 T载体在 E.coli JM10 9中表达 TSF蛋白。采用 MTT方法测定 TSF及其相关物 GST- TSF、PF4 (5 8- 70 )、TSP1(42 9~ 4 5 9)等对血管内皮细胞、平滑肌细胞、QGY772 1人肝癌细胞、HL F人肺成纤维细胞等生长的抑制效应。结果 合成的 TSF融合基因 ,克隆到p GEX- 2 T载体 ,转化 E.coli JM10 9,获得了 TSF蛋白的高效表达。建立了 TSF蛋白的纯化复性方法 ,获得了 GST- TSF融合蛋白及 TSF蛋白。TSF、GST- TSF、PF4 (5 8~ 70 )和 TSP1(42 9~ 4 5 9)均特异抑制血管内皮细胞的生长 ,其中 TSF的活性最强 ,活性大小次序为 TSF>GST- TSF>PF4 (5 8~ 70 ) >TSP1(42 9~ 4 5 9)。结论 融合表达蛋白— TSF在细胞水平上能高效特异抑制血管内皮细胞的生长。
- 沈先荣吉冬梅贾福星胡幼卿蒋定文邓新贤储智勇王玲雷呈祥黄建生胡忻然任大明
- 关键词:凝血酶敏感蛋白-1血管生成基因表达血管内皮细胞肿瘤细胞
- 口服丙型肝炎复合多表位DNA减毒鼠伤寒沙门活菌苗的实验研究被引量:4
- 1999年
- 目的 利用减毒鼠伤寒沙门菌作为载体,探讨丙型肝炎病毒(HCV) 口服DNA 疫苗的可行性。方法 把HCV 复合多表位抗原基因PCX 克隆到真核表达载体pcDNA3(CMV 启动子) ,构建HCV 真核表达载体pcDNA3/PCX,转化减毒鼠伤寒沙门菌SL3261 ,获得HCV 重组口服DNA 活菌苗SL3261 (pcDNA3/PCX) ,免疫小鼠及家兔后,检测特异性免疫应答及安全性。结果 SL3261(pcDNA3/PCX) 在小鼠及家兔中均可诱发低水平的特异性体液免疫及细胞免疫应答,免疫动物未见明显的毒性反应。结论 HCV 口服减毒鼠伤寒沙门菌DNA 疫苗可诱发特异性的免疫应答,为HCV
- 黄建生胡幼卿解咏梅许谆张明徽张丽芸陈立茵任大明
- 关键词:多表位疫苗
- 丙型肝炎病毒及恶性疟原虫复合抗原基因表达及诱导小鼠免疫应答的研究被引量:1
- 1999年
- 将合成的丙型肝炎病毒(HCV)复合多表位抗原基因PCX及恶性疟原虫(Pf)多价抗原基因AB(SPf66+SPf105)克隆到表达载体pWR450l中,以β半乳糖甘酶(GZ)HCVPf复合多肽抗原的形式在大肠杆菌中高效融合表达了目的蛋白GZCAB,表达量约30%。所表达的重组抗原可被HCV患者血清及鼠抗Pf抗体特异识别,显示了该融合蛋白质具有HCV和Pf的免疫原性。该蛋白免疫小鼠后,诱发针对GZCAB、GZPCX及PfAg的特异性体液免疫应答及针对GZCAB、GZPCX的迟发性超敏反应,CD8+T细胞明显升高,提示该复合抗原作为HCVPf双价疫苗的可行性。
- 解咏梅黄建生张潜胡幼卿沈先荣张明薇董宁董文其郭明秋任大明
- 关键词:丙型肝炎恶性疟原虫免疫应答
- tTSF基因的酵母表达及其基因治疗研究
- 2006年
- 目的选择PF4,TSP1的高活性片段及肿瘤细胞靶向肽,设计合成融合基因-tTSF,进行酵母表达及小鼠基因治疗研究。方法根据PF4和TSP1的抑制血管生成高活性片段设计合成TSF基因,并在N-端接上肿瘤细胞靶向肽,设计合成了tTSF。将tTSF基因构建到pPIC9质粒,重组质粒pPICg/ tTSF转化GS115酵母菌株进行表达,并检测表达产物对血管内皮细胞生长的抑制作用。将tTSF基因克隆到pcDNA3.1(+)载体,重组质粒pcDNA3.1(+)/tTSF通过皮下注射治疗C57BL/6小鼠移植肿瘤 Lewis肺癌。结果重组质粒pPIC9/tTSF转化GS115酵母菌株后,获得了tTSF的高效表达,表达产物对血管内皮细胞生长产生明显的抑制作用;皮下注射重组质粒pcDNA3.1(+)/tTSF后,C57BL/6小鼠移植肿瘤Lewis肺癌的生长受到明显抑制。结论 tTSF基因设计成功,其酵母表达产物对血管内皮细胞生长产生具有明显的抑制作用,tTSF基因的体内基因治疗也具有显著的抗肿瘤效应。
- 沈先荣胡幼卿兰和魁吉冬梅蒋定文贾福星任大明
- 关键词:血管生成PF4TSP1