夏玉平
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院油料作物研究所农业部油料作物生物学重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学哲学宗教更多>>
- 重叠延伸PCR克隆拟南芥ACCase基因和植物表达载体构建被引量：5
- 2009年
- 植物的乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)催化乙酰辅酶A羧化生成丙二酸单酰辅酶A,是脂肪酸合成的第一步,该步骤是种子脂肪酸合成与含油量形成的关键调控步骤。拟南芥中的真核形式ACCase基因cDNA长约7 000bp,难以直接克隆。本研究先通过常规PCR将其cDNA分成八个重叠的片段分别扩增出来,再用重叠延伸PCR将得到的片段逐步拼接成长度为6 890bp的完整的基因序列,测序证实克隆序列正确无误,最后将其克隆到农杆菌转化植物的载体上。序列分析发现ACCase基因的开放阅读框长度为6 765bp,编码一个含2 254个氨基酸残基的多肽链,推测其分子量约为250kDa。ACCase基因的成功克隆为利用该基因调控油料作物的含油量奠定了良好基础,同时为克隆长度较大的基因提供了一种经济可行的方法。
- 胡亚平夏玉平吴刚武玉花肖玲李均卢长明
- 关键词：重叠延伸PCR乙酰辅酶A羧化酶基因克隆
- 种子含油量相关基因的克隆与功能比较研究
- 提高种子含油量是油料作物育种的重要目标。为了对含油量相关基因的功能进行深入分析,本研究克隆或合成了催化整个三酰甘油合成途径的含油量相关的5个基因。于同一遗传转化载体平台,采用农杆菌介导法,在模式植物烟草中完成了5个目标基...
- 夏玉平
- 关键词：油菜烟草含油量基因克隆转基因
- 文献传递
- 多聚酶对转基因产品PCR检测的影响分析
- 2010年
- 本文参考出入境检验检疫行业标准中转基因油菜外源基因的PCR检测体系,分析了18种不同DNA聚合酶对定性PCR检测转基因油菜OXY235中的CaMV35S启动子的影响。结果表明,不同DNA聚合酶对CaMV35S启动子定性PCR检测中非特异扩增的产生以及检测灵敏度影响较大。其中热启动Taq酶效果较好,目标条带清晰,检测灵敏度高,而且完全没有非特异性扩增条带,非常适合用于定性PCR检测。对于同样条件下无法有效扩增0.1%DNA样品的Taq酶,则不推荐用于检测途径。
- 夏玉平吴刚武玉花张丽卢长明
- 关键词：转基因检测灵敏度
