孙玉
- 作品数：48 被引量：138H指数：6
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
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- 经肝动脉化疗栓塞术联合射频消融治疗巴塞罗那B期原发性肝癌的效果及预后影响因素分析被引量：32
- 2019年
- 目的探讨经肝动脉化疗栓塞术(TACE)联合肝癌射频消融(RFA)治疗巴塞罗那(BCLC) B期原发性肝癌患者的疗效及其预后影响因素。方法选择2007年1月-2012年1月在首都医科大学附属北京佑安医院住院行TACE联合RFA治疗的BCLC-B期原发性肝癌患者154例。收集所有患者基线实验室及影像检查资料,通过门诊、住院或电话随访所有病例。采用KaplanMeier法绘制生存曲线,采用log-rank检验生存曲线,将单因素分析中P <0. 05的指标纳入多因素Cox回归分析。结果 154例BCLC-B期肝癌患者,中位生存期37个月,1、2、3、5年生存率分别为82. 5%、59. 7%、50. 6%和36. 1%。将患者按照BCLC-B期亚分期分为B1、B2、B3、B4期,B1期患者生存率明显高于B2～B4期,差异有统计学意义(χ~2=16. 881,P=0. 001); RFA后1个月达到完全消融、年龄<60岁、术前AFP <400 ng/ml、胆碱酯酶≥4000 U/L、TBil≤21μmol/L、Child-Pugh A级,肿瘤数目≤3个、肿瘤最大直径<3 cm组患者生存率分别高于不完全消融、年龄≥60岁、AFP≥400 ng/ml、胆碱酯酶<4000 U/L、TBil> 21μmol/L、ChildPugh B级、肿瘤数目> 3个、肿瘤最大直径> 5 cm组,差异均有统计学意义(χ~2=173. 002,P <0. 001;χ~2=6. 336,P=0. 012;χ~2=10. 765,P=0. 001;χ~2=6. 933,P=0. 008;χ~2=4. 624,P=0. 032;χ~2=5. 570,P=0. 018;χ~2=6. 761,P=0. 009;χ~2=7. 430,P=0.024)。Cox多因素回归分析显示消融评价[P <0. 001,比值比(OR)=21. 950,95%可信区间(95%CI):11. 817～40. 772]、ChildPugh分级(P=0. 002,OR=2. 190,95%CI:1. 329～3. 609)、AFP水平(P=0. 014,OR=1. 760,95%CI:1. 122～2. 760)、B期亚分期(P=0. 004,OR=2. 178,95%CI:1. 284～3. 694)是BCLC-B期肝癌患者RFA治疗后生存期的影响因素。结论 TACE联合RFA治疗BCLC-B期肝癌安全有效,不完全消融、AFP≥400 ng/ml、Child-Pugh B级、BCLC-B期亚分期越晚是影响BCLC-B期肝癌RFA治疗后生存期的独立危险因素。
- 孙玉张洪海生守鹏李聪袁春旺崔石昌扈彩霞刘博君李星明张永宏郑加生
- 关键词：肝肿瘤导管消融术预后
- 分泌型碱性磷酸酶示踪的TA克隆真核表达载体的构建被引量：3
- 2010年
- 目的制备具有分泌型碱性磷酸酶示踪作用和真核表达功能的TA克隆载体。方法把CMV启动子区-TA克隆位点-BGH多聚腺苷酸区序列克隆到pSEAP2-control载体中,构建成具有真核表达功能并外分泌碱性磷酸酶(SEAP)的pcDNA5AP-前T载体。增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆到pcDNA5AP-T载体上并进行EGFP表达分析和SEAP活性检测。结果 pcDNA5AP-EGFP以400ng/孔转染6孔板293T细胞,EGFP表达率达50%,SEAP活性比对照组高20倍。结论成功构建了具有真核表达功能并外分泌碱性磷酸酶的pcDNA5AP-T载体。
- 张洪海计云霞孙玉张玉林乔录新崔丹陈德喜
- 关键词：T载体真核表达
- NRTIs引起的细胞线粒体DNA缺失的检测及其意义
- 2010年
- 目的应用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative PCR)检测核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)司它夫定(d4T)与齐多夫定(AZT),对HepG2细胞线粒体DNA数量的影响,并探讨其意义。方法用0、3、10、100、200、300μmol/L d4T及AZT处理HepG2细胞2周,应用实时荧光定量PCR检测不同浓度药物作用后线粒体DNA的相对含量。结果成功建立线粒体DNA的定量PCR检测方法。d4T组中,药物浓度为0、3、10、100μmol/L的4个组,细胞线粒体DNA相对含量分别为(96.94±5.77)、(53.73±7.14)、(20.78±3.10)、(1.37±0.29),4个组比较差异有统计学意义(P<0.01);而药物浓度为200及300μmol/L的两个组,细胞均死亡。AZT用药组中,药物浓度为0-300μmol/L的6个组,细胞线粒体DNA相对含量分别为(96.94±5.77)、(108.84±7.80)、(172.56±4.70)、(199.51±10.37)、(158.74±6.64)、(64.06±6.27),差异有统计学意义(P<0.01)。结论实时荧光定量PCR检测细胞线粒体DNA方法切实可行,d4T引起细胞线粒体DNA缺失呈浓度依赖性,AZT对细胞线粒体DNA的影响表现为先增高后降低,其机制有待进一步研究。
- 孙玉张洪海石英柳雅立张彤吴昊陈德喜
- 关键词：核苷类逆转录酶抑制剂聚合酶链反应
- 天门冬氨酸氨基转移酶与血小板比值对肝动脉栓塞联合射频消融治疗乙型肝炎相关肝细胞癌患者预后的影响被引量：2
- 2020年
- 目的研究天门冬氨酸氨基转移酶与血小板比值(aspartate aminotransferase to platelet ratio index,APRI)对肝动脉栓塞联合射频消融治疗乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后的评估价值。方法选取2008年1月至2010年12月在首都医科大学附属北京佑安医院接受肝动脉栓塞联合射频消融治疗的201例HBV相关HCC患者为研究对象。收集患者基线临床资料,包括性别、年龄、病史、基础肝病、白细胞(white blood cell,WBC)、血小板(blood platelet,PLT)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、白蛋白(albumin,ALB)、总胆红素(total bilirubin,TBil)、胆碱酯酶(cholinesterase,CHE)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、Child-Pugh分级、肿瘤数目、肿瘤最大直径、肿瘤部位及腹水。计算各患者APRI值,采用受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线确定基线APRI的临界值,并将患者分为低APRI组(APRI≤临界值)及高APRI组(APRI>临界值)。采用Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,绘制生存曲线,采用Log-rank检验比较组间差异,采用Cox多因素回归分析影响HBV相关HCC患者肝动脉栓塞联合射频消融治疗总生存率的独立危险因素。结果根据ROC曲线确定基线APRI临界值为1.30。低APRI组104例,高APRI组97例,低APRI组与高APRI组患者间肝硬化(无/有:62/41vs 42/56)、WBC计数(<4×10~9/L/≥4×10~9/L:29/74 vs 55/43)、ALT(<45 U/L/≥45 U/L:82/21vs 63/35)、ALB(<35 g/L/≥35 g/L:24/79 vs 49/49)、TBil(≤21μmol/L/> 21μmol/L:73/30vs 40/58)、PT(≤12.8 s/> 12.8 s:79/24 vs 46/52)、CHE(<4000 U/L/≥4000 U/L:16/87 vs43/55)、腹水(有/无:4/99 vs 15/83)及Child-Pugh分级(A级/B级:91/12 vs 70/28)的差异有统计学意义(P均<0.05)。低APRI组患者生存率显著高于高APRI组,差异有统计学意义(χ~2=27.84,P <0.001)。Cox多因
- 张洪海孙玉生守鹏张永宏郑加生
- 关键词：肝细胞癌射频消融预后
- 微RNA-758／星形细胞上调基因1信号通路调控肝癌细胞转移的分子机制被引量：3
- 2017年
- 目的探讨微RNA（miR）-758对肝癌细胞转移的影响及其作用机制，研究miR-758对促癌基因星形细胞上调基因1（AEG-1）的调控作用。方法用miR-758瞬时转染HepG2细胞，通过Transwell迁移和侵袭实验，观察miR-758对肿瘤细胞转移的影响。利用CCK8法检测细胞增殖活性，观察miR-758对肿瘤细胞增殖的影响。使用流式细胞仪定量分析细胞周期，观察miR-758对细胞周期的影响。通过上皮间充质转化（EMT）实验，观察miR-758是否影响肝癌细胞EMT。用miR-758瞬时转染人脐静脉内皮细胞（HUVEC），观察miR-758对管腔形成的影响。软件预测显示miR-758的靶基因为AEG-1。将含miR-758结合位点的AEG-1 3′UTR构建到荧光素酶表达载体中，用miR-758和AEG-1基因3′UTR载体共同转染HepG2细胞，验证miR-758的靶基因是否为AEG-1。用miR-758瞬时转染HepG2细胞，检测AEG-1蛋白的表达量变化。结果miR-758过表达可抑制HepG2细胞的迁移、侵袭，抑制细胞增殖和周期，抑制HepG2细胞EMT，抑制HUVEC细胞管腔形成。miR-758和AEG-1基因3′UTR质粒共同转染HepG2细胞后，荧光素酶的表达量降低。miR-758靶点AEG-1 3′UTR突变后，荧光素酶的表达量恢复。另外，细胞中miR-758含量升高时，Western Blot检测到AEG-1蛋白水平的表达量降低。结论miR-758负调控癌症转移的多个步骤，包括细胞迁移、侵袭、增殖、EMT以及血管新生等。miR-758下游靶基因为AEG-1。
- 李聪王宏光吕俊生龙江扈彩霞尹甜崔石昌张雯雯王勋生守鹏张洪海孙玉郑加生
- 关键词：肝癌肿瘤转移
- P53凋亡刺激蛋白2在gp120诱导的神经细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的研究P53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)在人类免疫缺陷病毒外膜糖蛋白(gp120)诱导的神经细胞凋亡中的作用。方法体外培养小鼠大脑皮质神经细胞,给予gp120处理,免疫荧光技术检测P53和ASPP2在细胞内的表达与分布,蛋白印迹法检测活性caspase-3表达情况,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测神经细胞凋亡。分析gp120对神经细胞内P53、ASPP2表达影响,微小RNA干扰技术反向验证ASPP2的作用。结果 gp120处理前,神经细胞内无P53表达,ASPP2表达在细胞浆中;gp120处理后,神经细胞出现P53表达并定位于细胞核,部分ASPP2由细胞浆移位到细胞核,与P53定位于同一部位。gp120处理前,caspase-3无活性,神经细胞凋亡率为5%,gp120处理后caspase-3被激活,神经细胞凋亡率为50%,微小RNA干扰ASPP2表达后,神经细胞凋亡率由50%降低到15%。结论 ASPP2参与了gp120诱导的经P53介导的神经细胞凋亡。
- 孙玉栾森张洪海邓尧郑加生陈德喜
- 关键词：获得性免疫缺陷综合征人类免疫缺陷病毒细胞凋亡神经元
- 原发性肝癌组织线粒体DNA含量检测及意义被引量：2
- 2010年
- 目的检测原发性肝癌及其癌旁组织中线粒体DNA含量,探讨线粒体DNA含量变化与肝癌发生的关系。方法荧光实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)法扩增22例肝癌及相应癌旁组织中线粒体DNA编码基因细胞色素C氧化酶Ⅱ(COⅡ),以核编码基因磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照,比较两种组织中线粒体DNA含量的差异。结果肝癌组织中线粒体DNA相对含量为156.54±107.54,癌旁组织线粒体DNA相对含量为290.24±187.37,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肝癌组织线粒体DNA的含量与肝癌发生有密切关系,有望成为一种新的肝癌标志物。
- 孙玉曲红梅张洪海张彤吴昊陈德喜
- 关键词：DNA线粒体聚合酶链反应
- PBL联合CBL在肝癌血管介入进修医师培训中的运用被引量：4
- 2021年
- 目的研究以问题为基础的教学(problem-based learning,PBL)和以案例为基础的教学(case-based learning,CBL)在肝癌血管介入进修医师培训中的应用效果。方法选择2017年9月—2019年12月在首都医科大学附属北京佑安医院肝病与肿瘤微创介入中心进修的48名进修医师作为研究对象,采用随机数字表法将进修医师分为观察组和对照组两组,每组24例;观察组进修医师接受PBL联合CBL教学,对照组进修医师接受传统教学方法。培训时间6个月,采用理论知识考核、技能操作考核及问卷调查方法评价教学效果。结果观察组进修医师理论知识及技能操作评分均高于对照组医师,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组进修医师学习兴趣、临床思辨能力、团队协作能力、文献阅读能力、学习效率提高率均高于对照组医师,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PBL联合CBL在肝癌血管介入进修医师培训中运用效果显著。
- 孙玉张洪海郑加生张永宏
- 关键词：原发性肝癌血管介入进修医师教学
- HIV-1B’亚型gp120转基因载体构建与转基因小鼠制备
- 背景多数HIV-1感染患者的中枢神经系统都可感染HIV-1,并可导致一系列运动与认知功能障碍等精神神经症状,严重者发展为HIV相关脑痴呆。虽然小胶质细胞和星形胶质细胞是HIV-1的靶细胞,神经元不直接被感染,但其受累却最...
- 陈德喜张洪海孙玉柳雅立石英张彤吴昊
- 文献传递
- 原发性肝癌组织p53和ASPP2基因突变检测及临床意义被引量：11
- 2010年
- 目的:检测原发性肝癌组织中p53与ASPP2基因突变,并探讨其临床意义。方法:收集24例肝癌标本,分别提取DNA及RNA,PCR扩增p53基因,逆转录PCR扩增ASPP2基因并进行半定量分析,基因测序后进行突变分析。结果:24例肝癌患者中,p53基因在肝癌组织中的突变率是75.0%,在癌旁组织中的突变率为20.8%,P<0.01;肝癌组织中ASPP2与GAPDH的灰度比值平均为0.81,癌旁组织中为0.85,P>0.05,但是癌组织和癌旁组织均未检测到ASPP2基因突变。结论:在原发性肝癌发生过程中,p53基因突变比AS-PP2基因突变可能起到更重要的作用。
- 谭军英张洪海郭洪亮孙玉王磊季万胜陈德喜李宁
- 关键词：肝肿瘤P53基因基因突变
