孟芳
- 作品数：16 被引量：54H指数：5
- 供职机构：湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目湖南省科技厅资助项目湖南省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 分子信标荧光定量PCR检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立被引量：1
- 2015年
- 利用新型荧光探针—分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的HA和NA基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用实时荧光定量PCR技术检测H3N2亚型SIV。构建重组质粒p SK-H3和p SK-N2并绘制标准曲线。结果显示,该检测方法的敏感性达到102拷贝/μL;与其它主要相关病毒均不发生交叉反应,批内和批间试验的重复性变异系数(CV)均小于3%,表明该方法灵敏度强、特异性好。此方法的建立将为流感病毒H3N2亚型定型检测提供一种快速有效的方法。
- 禹思宇周宇唐连飞孟芳袁晓芬梁斌
- 关键词：猪流感病毒H3N2亚型实时荧光定量PCR
- 规模化猪场猪结核病流行病学调查被引量：5
- 2009年
- 朱中武鲁杏华吕晓星黄萍唐连飞孟芳
- 关键词：规模化猪场流行病学调查结核病慢性传染病器官形成肉芽肿
- 湖南省规模化猪场H1N1猪流感流行病学调查被引量：7
- 2011年
- 为了解H1N1猪流感(SIV)在湖南省规模化猪场中感染和流行情况,2010年6月采用间接ELISA和实时荧光RT-PCR对1 065份猪血清、16 796份猪棉拭子和360份肺脏样品进行检测。结果显示,SIV H1N1抗体阳性率达37.84%,猪场阳性率达100%;H1N1猪流感病毒抗原阳性率为0.12%,SIV在湖南的流行情况有着明显的区域性差异。
- 禹思宇易征璇孟芳欧阳振宇唐连飞朱中武
- 关键词：ELISA实时荧光RT-PCR流行病学调查
- 集约化养猪场口蹄疫免疫程序探讨被引量：4
- 2008年
- 朱中武鲁杏华吕晓星孟芳唐连飞
- 关键词：集约化养猪场口蹄疫疫苗免疫程序阻断ELISA病毒结构蛋白O型口蹄疫
- 盐渍猪肠衣猪瘟检疫方法的研究
- 2001年
- 采用IDEXX公司生产的猪瘟抗原 (CSFV Ag)ELISA试剂盒和动物接种试验 ,对不同盐渍时间的猪肠衣进行猪瘟检疫。结果 :盐渍时间达 6个月的肠衣仍可用CSFV AgELISA试剂盒进行检测 ,但盐渍后猪瘟病毒免疫原性和感染性存在明显差异。
- 朱中武吴愈柏孟芳鲁杏华谈志祥
- 关键词：盐渍肠衣猪瘟ELISA检疫抗原检测接种试验
- 规模化养猪场猪瘟、猪生殖-呼吸综合征、猪伪狂犬病监测及原因分析被引量：2
- 2002年
- 采用夹心ＥＬＩＳＡ对我省１２猪场６０份猪组织样品进行猪瘟抗原检测，其中阳性样５０份，占８３．３％，分布于１０猪场。用ＰＲＲＳＶ抗体ＥＬＩＳＡ对１８猪场５１８份猪血清样品进行抗体检测，其中阳性样品２１３份，占４１．１％，分布于１３个猪场。用ＰＲＶ－ｇｐＩ－抗体ＥＬＩＳＡ对２６个猪场５１４份猪血清样品进行抗体检测，其中阳性样品２６８份，占５２．１％。
- 朱中武吴愈柏鲁杏华孟芳陈荣兵王建筑刘新生
- 关键词：猪瘟伪狂犬病疫病监测规模化养猪场
- 非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：12
- 2010年
- 根据GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)P72基因序列,设计了一对特异性引物和探针,使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,建立了非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法。结果表明:该方法的敏感性可达100个拷贝值,具有良好的敏感性和重复性。
- 黄萍肖家勇欧阳振宇陈盼白雪朱中武孟芳吴愈柏唐连飞
- 关键词：非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR质粒
- 嗜酸氧化亚铁硫杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：1
- 2010年
- 〔目的〕建立一种检测进出境环保用微生物菌剂中嗜酸氧化亚铁硫杆菌(acidithiobacillus ferrooxidans,A.ferrooxidans)的实时荧光定量PCR方法。〔方法〕用9K培养基培养A.ferrooxidans标准菌株A.ferrooxidans ATCC23270,并提取基因组DNA作模板;根据GenBank中嗜酸氧化亚铁硫杆菌的16S基因序列设计合成引物和探针,用含有101 bp扩增目标产物的pGEM誖-T Easy载体质粒为阳性对照,构建标准曲线,建立荧光定量PCR检测方法,并进行方法学的评估。〔结果〕成功建立了嗜酸氧化亚铁硫杆菌的荧光定量PCR检测方法,该方法对嗜酸硫杆菌属中嗜酸氧化硫硫杆菌(Acidithiobacillus thiooxidans,A.thiooxidans)和嗜酸喜温硫杆菌(Acidithiobacillus caldus,A.caldus)无交叉反应;最少可检测到100个阳性质粒,说明有很好的敏感性;试验内变异系数为0.32%,具有很好的重复性。〔结论〕建立的嗜酸氧化亚铁硫杆菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法特异性和灵敏度高、重复性好,可作为嗜酸氧化亚铁硫杆菌高通量的快速检测方法。
- 唐连飞肖家勇朱中武孟芳欧阳振宇陈盼白雪禹思宇
- 关键词：嗜酸氧化亚铁硫杆菌实时荧光定量PCR卫生检疫
- A型猪流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：7
- 2010年
- 根据WHO推荐的检测A型猪流感病毒的引物和探针序列,建立了A型猪流感病毒实时荧光定量PCR检测方法。使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,检测结果表明,该方法的敏感性可达100拷贝/25μL反应体系,显示出良好的敏感性和重复性,临床上已用于实验室鼻拭子样品的检测,并成为一种快速定量检测A型猪流感病毒的方法。
- 欧阳振宇唐连飞朱中武肖家勇孟芳黄萍吴愈柏
- 关键词：实时荧光定量PCRH1N1亚型
- 非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2
- 2011年
- 为了研究检测非洲猪瘟病毒的方法,试验采用GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)P72基因序列设计了1对特异性引物和探针,并使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,建立了非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法。结果表明:该方法的敏感性可达100个拷贝值,具有良好的敏感性和重复性。
- 黄萍肖家勇欧阳振宇陈盼白雪朱中武孟芳吴愈柏唐连飞
- 关键词：非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR质粒
