欧阳振宇
- 作品数:6 被引量:32H指数:3
- 供职机构:湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目湖南省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:14
- 2010年
- 根据GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)P72基因序列,设计了一对特异性引物和探针,使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,建立了非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法。结果表明:该方法的敏感性可达100个拷贝值,具有良好的敏感性和重复性。
- 黄萍肖家勇欧阳振宇陈盼白雪朱中武孟芳吴愈柏唐连飞
- 关键词:非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR质粒
- 嗜酸氧化亚铁硫杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:1
- 2010年
- 〔目的〕建立一种检测进出境环保用微生物菌剂中嗜酸氧化亚铁硫杆菌(acidithiobacillus ferrooxidans,A.ferrooxidans)的实时荧光定量PCR方法。〔方法〕用9K培养基培养A.ferrooxidans标准菌株A.ferrooxidans ATCC23270,并提取基因组DNA作模板;根据GenBank中嗜酸氧化亚铁硫杆菌的16S基因序列设计合成引物和探针,用含有101 bp扩增目标产物的pGEM誖-T Easy载体质粒为阳性对照,构建标准曲线,建立荧光定量PCR检测方法,并进行方法学的评估。〔结果〕成功建立了嗜酸氧化亚铁硫杆菌的荧光定量PCR检测方法,该方法对嗜酸硫杆菌属中嗜酸氧化硫硫杆菌(Acidithiobacillus thiooxidans,A.thiooxidans)和嗜酸喜温硫杆菌(Acidithiobacillus caldus,A.caldus)无交叉反应;最少可检测到100个阳性质粒,说明有很好的敏感性;试验内变异系数为0.32%,具有很好的重复性。〔结论〕建立的嗜酸氧化亚铁硫杆菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法特异性和灵敏度高、重复性好,可作为嗜酸氧化亚铁硫杆菌高通量的快速检测方法。
- 唐连飞肖家勇朱中武孟芳欧阳振宇陈盼白雪禹思宇
- 关键词:嗜酸氧化亚铁硫杆菌实时荧光定量PCR卫生检疫
- A型猪流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量:7
- 2010年
- 根据WHO推荐的检测A型猪流感病毒的引物和探针序列,建立了A型猪流感病毒实时荧光定量PCR检测方法。使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,检测结果表明,该方法的敏感性可达100拷贝/25μL反应体系,显示出良好的敏感性和重复性,临床上已用于实验室鼻拭子样品的检测,并成为一种快速定量检测A型猪流感病毒的方法。
- 欧阳振宇唐连飞朱中武肖家勇孟芳黄萍吴愈柏
- 关键词:实时荧光定量PCRH1N1亚型
- 湖南省规模化猪场H1N1猪流感流行病学调查被引量:7
- 2011年
- 为了解H1N1猪流感(SIV)在湖南省规模化猪场中感染和流行情况,2010年6月采用间接ELISA和实时荧光RT-PCR对1 065份猪血清、16 796份猪棉拭子和360份肺脏样品进行检测。结果显示,SIV H1N1抗体阳性率达37.84%,猪场阳性率达100%;H1N1猪流感病毒抗原阳性率为0.12%,SIV在湖南的流行情况有着明显的区域性差异。
- 禹思宇易征璇孟芳欧阳振宇唐连飞朱中武
- 关键词:ELISA实时荧光RT-PCR流行病学调查
- 非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:3
- 2011年
- 为了研究检测非洲猪瘟病毒的方法,试验采用GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)P72基因序列设计了1对特异性引物和探针,并使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,建立了非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法。结果表明:该方法的敏感性可达100个拷贝值,具有良好的敏感性和重复性。
- 黄萍肖家勇欧阳振宇陈盼白雪朱中武孟芳吴愈柏唐连飞
- 关键词:非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR质粒
- H1N1猪流感病毒血凝素蛋白抗原表位的筛选及其抗原性分析被引量:2
- 2011年
- 本研究旨在对H1N1猪流感病毒血凝素蛋白抗原分子的模拟表位进行分离鉴定并分析其抗原性。用抗H1N1猪流感病毒血凝素蛋白小鼠血清IgG对噬菌体随机12肽库进行筛选,3轮亲和筛选后,特异性噬菌体得到了有效富集;对随机挑选的47个噬菌体克隆用ELISA进行鉴定,其中40个为阳性;对40个阳性克隆测序得到3种不同氨基酸序列;用Westernblotting对获得的3个不同序列的噬菌体克隆进行抗原性分析,显示这3种噬菌体插入短肽能和H1N1猪流感病毒感染小鼠血清特异性结合。结果表明,本试验获得了3种H1N1猪流感病毒血凝素蛋白模拟抗原表位,它们都具有明显的抗原性,为H1N1猪流感病毒的疫苗研究和诊断奠定了基础。
- 唐连飞易征璇朱中武朱金国陈盼孟芳禹思宇欧阳振宇姜金林
- 关键词:噬菌体肽库抗原表位猪流感病毒血凝素蛋白