康文杰
- 作品数：4 被引量：29H指数：4
- 供职机构：南方医科大学基础医学院基因工程研究所更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 转基因食品DNA提取研究进展被引量：6
- 2011年
- 为了满足消费者对转基因食品的知情权,建立准确、快速、高效的转基因成分检测技术至关重要,而高质量DNA模板的获取,是转基因食品进行基因检测的前提。对近几年来国内外转基因食品DNA提取方法:十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)法、十二烷基硫酸钠(dodecyl sulfate,sodium salt,SDS)法、聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,PVP)法、介质纯化法、螯合树脂法等进行了介绍,对各种方法进行综合评述并重点阐述了提取中应注意的问题和转基因食品DNA提取的发展方向,为初步进行DNA提取的科学研究者提供有效的信息。
- 蔡翠霞肖维威康文杰马文丽
- 关键词：转基因食品DNA提取
- 改良Chelex-100法快速提取转基因农产品DNA被引量：6
- 2011年
- 旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法。分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,并研究两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麦和水稻等其他转基因农产品的应用效果。结果表明,改良Chelex-100法能够快速在1.5 h之内从样品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR扩增反应,产物电泳条带清晰明亮。两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果未见明显差别。该方法在玉米、小麦和水稻等转基因农产品的应用效果稳定。因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作为PCR扩增模板用于转基因农产品检测。该方法具有经济、简便、快速、安全的特点,适合转基因农产品大规模筛选和鉴别。
- 蔡翠霞肖维威康文杰周琳华吴永彬郑远金马文丽
- 关键词：CTAB法DNA提取PCR
- 苏云金芽孢杆菌Cry1A(b)抗虫基因LAMP检测方法的建立与应用被引量：7
- 2012年
- 以转基因玉米MON810为模板,针对Cry1A(b)抗虫基因核酸保守序列设计特异性引物,建立LAMP检测体系。对该体系的可行性、灵敏性、特异性进行分析,并应用于转基因产品的检测。研究结果显示该方法快速简单、灵敏度特异性高、结果可视化,可应用于转基因产品中Cry1A(b)基因的初步筛选。
- 周琳华肖维威吴永彬蔡翠霞康文杰刘唐书马文丽
- 关键词：苏云金芽孢杆菌环介导等温扩增技术
- 转基因大豆、玉米、油菜和水稻品系特异性检测质粒标准分子的快速构建及应用被引量：11
- 2011年
- 本文采用重叠延伸PCR技术快速构建了转基因大豆GTS40-3-2、玉米NK603、油菜RT73和水稻TT51-1的4种品系作物的质粒标准分子.经快速PCR鉴定及测序分析验证后,将构建的阳性质粒标准分子应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建,并建立其相应的荧光定量PCR检测体系,同时对该体系的扩增效率、精确度、灵敏度等指标进行了评估.结果显示,建立的实时荧光定量PCR检测体系中,目标序列的扩增效率均在97.434%～101.479%正常范围内(R2≥0.995),定量极限为20 copies,表明我们已成功构建了这4种转基因作物的品系质粒标准分子,并能有效应用于实时荧光定量PCR标准曲线的构建.
- 吴永彬肖维威张宝蔡翠霞康文杰周琳华刘唐书马文丽
- 关键词：转基因重叠延伸PCR实时荧光定量PCR
