张东林
- 作品数：9 被引量：23H指数：3
- 供职机构：南阳师范学院生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目湖北省科技攻关计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 狂犬病病毒N基因植物表达载体的构建
- 2013年
- 以提取的狂犬病病毒总RNA为模板,以N1和N2为引物,反转录为cDNA,然后再以cDNA为模板进行PCR扩增,将PCR产物克隆至质粒pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-N,采用HindⅢ和BamHⅠ双酶切法及PCR确认正确后,利用pMD18-T-N重组质粒为模板,以N3和N4为引物,成功构建了重组植物表达载体pBI121-N。
- 张二芹张东林马强
- 关键词：狂犬病病毒N基因
- 应用细胞培养方法分离猪源弓形虫虫株被引量：3
- 2009年
- 为获得猪源弓形虫野生虫株,对细胞培养过程中的培养基种类、血清用量及培养佐剂等条件进行优化,选择最佳分离条件。对临床血清学检测呈阳性猪场的19份血液样品进行弓形虫虫株的培养检测,共获得野生虫株10株。运用PCR方法进行初步鉴定,证实分离虫株为弓形虫野生虫株。结果表明,细胞培养方法是一种分离弓形虫虫株较为理想的方法。
- 张东林惠煜周艳琴王玉海董海岚王正松赵俊龙
- 关键词：弓形虫虫株细胞培养
- 南阳市鸡致病性大肠杆菌的分离鉴、定及药敏试验
- 2013年
- 从南阳地区各养鸡场的发病鸡中分离出大肠杆菌,经常规方法培养、纯化、镜检及生理生化鉴定,分离出29株鸡致病性大肠杆菌。有14株分离株被鉴定出血清型,其中O1为4株,O2为3株,O78为7株,O1、O2和O78血清型占分离株总数的48.3%。未定型15株,用29株分离菌株分别接种供试雏鸡后,发病症状及剖检病变均符合本病特征,其中高致病性菌株有13株,中度致病菌株有9株,低致病性菌株有7株,分别占试验菌株总数的44.8%、31%和24.2%。采用22种药敏纸片对29株分离菌进行药敏试验,结果表明,分离出的大肠杆菌耐药性相当普遍,仅对头孢噻肟、丁胺卡那霉素、壮观霉素及新霉素等药物敏感性较高。
- 董海岚惠煜张东林李丽
- 关键词：大肠杆菌药敏试验
- 检测多种动物弓形虫抗体的SPA-ELISA方法的建立及初步应用被引量：4
- 2009年
- 利用重组弓形虫MIC3作为包被抗原，SPA作为偶联物建立了可检测多种动物弓形虫抗体的SPA—ELISA方法。确定了抗原最适包被质量浓度为2．6mg／L；血清最适稀释度为1：160，作用时间为45min；优化了酶标SPA工作浓度，作用时间及底物显色时间。对已知阳性血清的检测下限可达1：6400，其敏感性是IHAT方法的50～100倍。对临床4种动物共332份血清进行检测，阳性率由高到低依次为：SPA-ELISA（39．4％）〉MAT（39．1％）〉IHAT（13．1％）。以上结果表明，SPA-ELISA不失为一种适用于多种动物弓形虫抗体检测的理想方法。
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- 关键词：弓形虫
- 蛋白AG检测多种动物弓形虫抗体AG-ELISA的效果评价
- 2008年
- 利用建立的可检测多种动物弓形虫抗体的AG-ELISA方法,检测了人工感染及自然感染4种动物血清中的弓形虫抗体。对人工感染猪血清的检测结果表明,AG-ELISA法可于感染后第10天全部检出阳性,早于MAT方法的第14天,其检出率、敏感性及准确度等指标亦优于MAT法。在对临床上304份动物血清检测中,AG-ELISA法对猪、羊血清的阳性检出率高于MAT法,而对犬、猫血清的检出率则与MAT法相同。Kappa一致性试验表明,AG-ELISA法与MAT法符合良好。上述结果证实AG-ELISA法可用于多种动物弓形虫抗体的检测。
- 张东林惠煜周艳琴王玉海方瑞聂浩王正松赵俊龙
- 关键词：弓形虫
- 鸡致病性大肠杆菌的分离、鉴定及药敏试验
- 2011年
- 从南阳地区各养鸡场的发病鸡中分离出大肠杆菌，经常规方法培养、纯化、镜捡及生理生化鉴定，分离出29株鸡致病性大肠杆菌。有14株分离株被鉴定出血清型，其中O14株、O23株、O787布株，未定型15株，O1、O2，和O78血清型占分离株总数的48．3％。用29株分离菌株接种供试雏鸡后，发病症状及剖检病变均符合大肠杆菌病特征．其中高致病性菌株有13株，中度致病茵株有9株，低致病性菌株有7株，分别占试验菌株总数的44．8％、31．0％、24．2％。采用Kirby-Bauer纸片法，用22种药敏纸片对29株分离茵进行药敏试验，结果表明，分离出的大肠杆菌耐药性相当普遍，仅对头孢噻肟、丁胺卡那霉素、壮观霉素及新霉素等药物敏感性较高。
- 李丽惠煜董海岚张东林
- 关键词：大肠杆菌药敏试验
- 弓形虫病分子诊断方法及弓形虫分离株耐药性的研究
- 弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)引起的以孕妇(畜)流产、弱胎、畸胎、死胎和儿童(幼畜)生长受阻、死亡等为特征的人畜共患病。该病广泛存在于世界各地，宿主范围十分广泛，...
- 张东林
- 关键词：弓形虫病分子诊断耐药性宿主范围预防疫苗粘附蛋白
- 弓形虫MIC3基因真核表达质粒的构建及在IBRS-2细胞内的表达被引量：13
- 2007年
- 采用PCR技术从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码MIC3的基因,克隆入pMD18-T载体,转化至E.coliDH5α感受态细胞,经抗性平板筛选、小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定后,亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1。然后筛选含有目的基因的重组质粒,并转染IBRS-2细胞,在G418压力下进行筛选,利用SDS-PAGE、Western blot和ELISA检测表达情况。结果显示,扩增的MIC3基因与GenBank上相应基因序列(AJ132530)的一致性达99.9%,构建的真核表达质粒pcMIC3能在转染的IBRS-2细胞中表达分子量约为39.2ku的MIC3,且表达的蛋白质具有良好的免疫活性,为进一步研究该质粒的动物免疫试验奠定了基础。
- 江涛张东林聂浩姚宝安赵俊龙
- 关键词：刚地弓形虫真核表达
- 斑羚疥螨病的诊断被引量：1
- 2007年
- 惠煜张东林董海岚
- 关键词：疥螨病斑羚发病情况林区
