张佳星
- 作品数：7 被引量：30H指数：2
- 供职机构：北京工商大学化学与环境工程学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金北京市教育委员会科技发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 农杆菌介导的转化芦荟的研究(英文)被引量：2
- 2007年
- 芦荟(Aloe)是美容和医疗保健工业的重要植物资源,然而基因工程途径改良芦荟鲜有报道。本实验研究了次氯酸钠、升汞不同浓度和时间对芦荟外植体的灭菌效果,比较了芦荟不同部位(叶片、叶鞘和茎段)的再生能力,利用GUS基因瞬间表达技术(X-Gluc染色)探讨了不同农杆菌对不同芦荟外植体的侵染效果,确定了G418筛选剂在芦荟转化后的最适筛选浓度,摸索了适宜于农杆菌—芦荟共培养用培养基组成和共培养条件,通过转化、筛选和移栽共获得了67棵抗性再生植株,进一步对抗性再生植株进行了PCR、Southern blotting和ELISA检测。结果表明,芦荟外植体灭菌方法为20.0%次氯酸钠溶液浸泡25min,效果优于利用0.1%升汞灭菌处理,茎部切段的再生能力高于叶片切段和叶鞘切段,适宜的共培养条件为芦荟外植体浸泡在含有农杆菌的液体共培养基中半小时后,在无菌滤纸上、24℃、10h光照共培养3天;EHA105农杆菌菌系对芦荟茎部细胞的侵染能力明显强于C58C1,EHA105侵染后GUS基因瞬时表达率达到了80.0%左右,而C58C1侵染后GUS基因瞬时表达率只有30.0%左右。G418用于筛选抗性再生芽和抗性植株的适宜浓度为10.0～25.0mg/L。PCR和Southern blotting检测证实外源基因已成功整合到芦荟基因组中,转化效率为0.9%,单拷贝整合占80.0%,2～3拷贝整合占20.0%,ELISA检测证明外源基因已在转基因芦荟中稳定表达。综上所述,初步建立了农杆菌介导转化芦荟的技术体系,为利用基因工程途径改良芦荟奠定了基础。
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- 关键词：芦荟农杆菌分子检测ELISA检测
- 农杆菌介导的单子叶植物转基因研究进展被引量：24
- 2007年
- 农杆菌介导法是目前应用最为广泛的植物转基因方法。简单介绍了农杆菌遗传转化的原理,并从农杆菌携带外源基因进入植物的角度对农杆菌转化单子叶植物的关键和相关影响因素进行了论述,同时对近年来利用农杆菌介导法转化的单子叶植物的成功范例做了总结。
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- 关键词：农杆菌单子叶植物转基因
- 农杆菌介导法将海藻糖合成酶基因转入芦荟的研究被引量：6
- 2007年
- 采用农杆菌介导法将海藻糖合成酶基因otsA导入芦荟,共培养后的芦荟外植体在含10-15 mg·L^-1G418筛选剂的MS培养基上经多次筛选和分化,获得了一定数量的抗性再生芽,对移栽成活的抗性再生植株进行PCR检测,表明otsA基因已经导入芦荟基因组中,转化率约为0.77%。Southern检测表明,目的基因在60%的阳性植株基因组中表现为单拷贝整合,进一步证明otsA基因已经整合到芦荟基因组中。气相色谱法测定转基因植株的海藻糖含量表明,转基因植株中的海藻糖含量为未转化植株的2.934倍,证明otsA基因在转基因芦荟植株中已得到表达。
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- 关键词：芦荟农杆菌海藻糖合成酶基因
- 一种培育转基因芦荟的方法
- 本发明公开了一种培育转基因芦荟的方法。该方法包括以下步骤：1)以经消毒灭菌的茎段为外植体，将其切成小块后，在23－27℃下，用经芦荟农杆菌共培养用液体培养基悬浮制成的携带有目的基因的农杆菌的菌液浸泡20－40min进行侵...
- 何聪芬叶兴国董银卯张佳星陈杰王艳丽徐惠君杜丽璞赵华兰社益
- 文献传递
- 燕麦盐诱导DREB基因的克隆及农杆菌介导的相关DREB基因转化芦荟的研究
- 逆境是对植物生长和生存不利的各种环境因素的总称，又称胁迫。植物车其生长周期内会遇到各种各样外界恶劣环境的胁迫，如干旱、霜冻、盐碱和低温等。胁迫使植物生长发育受到抑制，甚至导致植株死亡。这些非生物胁迫造成的危害已经成为农业...
- 张佳星
- 关键词：燕麦芦荟DREB基因RACE农杆菌
- 文献传递
- 农杆菌介导OsDREB基因转化库拉索芦荟(Aloe vera L.)的研究
- 2008年
- 通过农杆菌介导法将提高植物抗寒能力的水稻OsDREB基因导入芦荟,共培养后的芦荟外植体在含G418筛选剂的MS培养基上经多次筛选和分化,获得了一定数量的抗性再生芽,对移载成活的抗性再生植株进行PCR检测。表明OsDREB基因已经导入芦荟基因组中,转化率为0.5%。采用电导率测定的方法检测转化DREB基因对芦荟抗逆性的影响,以低温逆境对转化DREB基因得到的芦荟再生植株进行胁迫处理,同时观察转基因植株的生长发育和抗性变化,发现对照芦荟植株的叶片显褐色干枯半透明,出现严重冻伤的迹象,而转基因植株生长情况较好,且转基因植株的相对电导率与对照植株相比明显较低。结果表明外源基因已成功整合入芦荟基因组DNA中并得到稳定表达。
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- 关键词：芦荟农杆菌分子检测
- 一种培育转基因芦荟的方法
- 本发明公开了一种培育转基因芦荟的方法。该方法包括以下步骤：1)以经消毒灭菌的茎段为外植体，将其切成小块后，在23-27℃下，用经芦荟农杆菌共培养用液体培养基悬浮制成的携带有目的基因的农杆菌的菌液浸泡20-40min进行侵...
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- 文献传递
