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PEP-1介导血红素加氧酶-1导入肝细胞的实验研究被引量：1: 2011年; 目的采用体外培养的L02肝细胞株,研究PEP-1肽介导血红素加氧酶-1(PEP-1-HO-1)穿透肝细胞的能力。方法实验分为PEP-1-HO-1组和HO-1组,用基因工程的方法制备并纯化PEP-1-HO-1融合蛋白,将纯化的目的蛋白及HO-1蛋白加入培养的L02肝细胞,通过免疫荧光及western blot来分析其转导能力。结果经测序分析证实,原核表达质粒pET15b-PEP-1-HO-1重组成功。SDS-PAGE及western blot结果表明,PEP-1-HO-1在Rosetta(DE3)pLysS菌中获得了高效表达,经Ni2+-NTA-树脂柱亲和层析纯化得到了融合蛋白PEP-1-HO-1,将其加入到体外培养的L02肝细胞培养基中,发现它能以剂量依赖及时间依赖的方式转导入细胞内,并能持续稳定表达48h,免疫组化显示其主要分布于胞质和胞核中。结论 PEP-1-HO-1融合蛋白能高效地转导入培养肝细胞,为进一步研究肝细胞氧化应激损伤防治的动物模型实验提供了新的途径。; 曾天才王卫星陈先祥唐俊明郭凌郧郑飞张林菲; 关键词：血红素加氧酶蛋白转导肝细胞

超声引导下胆囊穿刺气囊导管引流治疗高危急性胆囊炎被引量：2: 2015年; 急性胆囊炎是肝胆外科常见急腹症之一,随着腹腔镜技术的发展及成熟,腹腔镜胆囊切除术已成为治疗急性胆囊炎的经典方法。然而对于合并严重基础疾病（如心脑血管疾病、肺功能不全、糖尿病）或妊娠的患者,急诊手术并发症的发生率及病死率均较高,其病死率可达20%-40%,即使行开腹胆囊切除术,病死率也高达6%-20%。在患者拒绝手术或不能耐受手术及麻醉风险的情况下,经皮胆囊穿刺引流术可作为其替代疗法。; 曾天才蔡庆和徐阳张林菲程彩涛冯勇涂华华陈先祥; 关键词：急性胆囊炎胆囊穿刺引流

三腔二囊管联合脾切除贲门周围血管离断术治疗门静脉高压症急性上消化道大出血: 2013年; 门静脉高压症并发急性上消化道大出血在临床十分常见,该病发病突然,出血量大,病死率极高。目前临床上常采用药物治疗、三腔二囊管压迫、内镜介入治疗、外科切脾加胃底食管周围血管离断术等治疗。药物治疗往往难以控制出血;内镜介入治疗在大出血时因操作视野不清,硬化剂注射难以达到满意程度;三腔二囊管压迫用于紧急、; 曾天才蔡庆和徐阳陈先祥张林菲; 关键词：门静脉高压三腔二囊管脾切除贲门周围血管离断术

S100钙结合蛋白A13和人成纤维细胞生长因子-1在甲状腺肿瘤中的表达及临床意义被引量：1: 2015年; 目的检测S100钙结合蛋白A13（S100A13）和人成纤维细胞生长因子-1（FGF-1）在甲状腺癌、甲状腺腺瘤、正常甲状腺组织中的表达,探讨两者与甲状腺癌发生发展的关系.方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）方法检测甲状腺癌、甲状腺腺瘤、正常甲状腺组织中两者的表达,比较两者在两种不同组织中的表达.结果甲状腺癌组织中,S100A13的表达阳性率为93.3％（56/60）,在甲状腺腺瘤组织中S100A13的表达阳性率为66.7％（20/30）,在正常甲状腺组织中的表达阳性率为60.0％（12/20）,S100A13在甲状腺癌组织的表达阳性率明显高于甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,但是在甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织中其表达差异无统计学意义（P＞0.05）;FGF-1在甲状腺癌组织中的表达阳性率为81.7％（49/60）,在甲状腺腺瘤组织中FGF-1的表达阳性率为63.3％（19/30）,在正常甲状腺组织中的表达阳性率为55.0％（11/20）,FGF-1在甲状腺癌组织的表达阳性率明显高于甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,但是在甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织中其表达差异无统计学意义（P＞0.05）;S100A13与FGF-1表达阳性与甲状腺癌的淋巴结转移相关（P＜0.05）.结论 S100A13与FGF-1与甲状腺癌的发生及发展密切相关.; 涂华华陈先祥程彩涛冯勇张林菲曾天才蔡庆和; 关键词：甲状腺癌甲状腺腺瘤

PE P-1-血红素加氧酶-1融合蛋白预处理对L02肝细胞缺氧复氧损伤的影响: 2014年; 目的：评价细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1（HO-1）预处理对L02肝细胞缺氧复氧损伤的影响。方法利用基因工程手段表达和纯化融合蛋白PEP-1-HO-1（PEP-1-heme oxy-genase-1，PEP-1-HO-1）。使用人肝细胞株（HL-7702）建立培养人肝细胞缺氧复氧模型。按实验需要以10％新生牛血清的DMEM液静置培养L02肝细胞，将细胞进行随机分为7组：A组，正常对照组（常规培养）；B组，缺氧复氧组（缺氧复氧组细胞缺氧18 h，复氧6 h）；C组，PEP-1-HO-1预处理组，按PEP-1-HO-1浓度分为5亚组（C1，0．125μmol/L；C2，0．25μmol/L ；C3，0．5μmol/L；C4，1．0μmol/L；C5，2．0μmol/L，缺氧前以PEP-1-HO-1融合蛋白预处理2 h，缺氧18 h，复氧6 h）。复氧结束后，收集各组细胞及培养液上清，检测MDA、LDH、AST、ALT含量及SOD活性。结果缺氧复氧组较正常对照组相比，MDA、LDH、AST及ALT水平明显升高（P＜0．05），而 SOD 水平下降（P＜0．05）；PEP-1-HO-1预处理组与缺氧复氧组相比，预处理组能明显降低MDA、LDH、AST及ALT水平（P＜0．05），使得SOD水平上升（P＜0．05），且在一定浓度下与剂量呈正相关。结论 PEP-1-HO-1融合蛋白预处理可减轻细胞缺氧复氧损伤。; 曾天才蔡庆和徐阳张林菲周晋航涂华华陈先祥; 关键词：血红素加氧酶-1 肝细胞缺氧复氧 HEME

完全腹腔镜下和开腹脾切除、贲门周围血管离断术的临床疗效对比研究被引量：2: 2014年; 目的探讨完全腹腔镜下脾切除、贲门周围血管离断术治疗门静脉高压症的安全性与可行性。方法对30例完全腹腔镜下脾切除、贲门周围血管离断术与30例开腹脾切除、贲门周围血管离断术的临床资料进行对比研究。结果完全腹腔镜下脾切除、贲门周围血管离断术在住院时间、住院费用、手术出血量、肠道功能恢复时间、术后并发症等方面优于开腹脾切除、贲门周围血管离断术。结论完全腹腔镜下脾切除、贲门周围血管离断术是安全可行的。; 张林菲蔡庆和程彩涛曾天才涂华; 关键词：贲门周围血管离断术门静脉高压症

手辅助腹腔镜脾切除加门奇断流术治疗门脉高压患者的应用价值分析被引量：1: 2013年; 目的:探讨手辅助腹腔镜脾切除加门奇断流术治疗门脉高压患者的临床应用价值,并为其临床应用提供依据。方法:共纳入52例确诊为门脉高压的患者,均行脾切除加门奇断流术,采用随机数字法平均分为观察组与对照组,观察组患者行手辅助腹腔镜手术,对照组患者行开腹手术。观察两组患者手术出血量、手术时间、住院时间等,并分析其对机体应激反应(TNF-α,IL-6,CRP)的影响。结果:观察组术中出血量、手术时间及术后引流量、引流时间、肛门排气时间、住院时间明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组切脾最大直径大于观察组,但差异无统计学意义(P>0.05)。术后观察组患者CRP、IL-6、TNF-α水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:手辅助腹腔镜脾切除加门奇断流术治疗门脉高压患者具有较好的临床疗效,可减少术中出血量、术后引流量,缩短手术时间、住院时间,机体应激反应较小。; 周晋航陈先祥吴黎明张林菲; 关键词：门脉高压脾切除术门奇断流术手辅助

重组腺病毒介导的p27mt基因转移对肝癌治疗的研究: 于洋刘晓波王家宁何志军蔡庆和陈先祥徐兵余开峰王江华张林菲黄永章; 鉴于p27mt具有比p27wt更强的负调控细胞周期进程、诱导细胞凋亡作用，课题组设想利用腺病毒载体将p27mt导入人肝癌细胞中，代替原基因进行功能表达，以增加肝癌细胞中p27蛋白水平而起到治疗作用。该课题进行肝癌细胞系培...; 关键词：; 关键词：肝癌治疗基因治疗动物实验

射频消融联合鼻胆管冷循环治疗肝门部肿瘤1例分析被引量：1: 2014年; 肝癌是消化道常见恶性肿瘤,肝癌的治疗通常首选为手术切除,但是由于临床症状出现较晚,大部分肿瘤患者一经发现就已经失去手术机会,只有20%左右的患者能够接受手术治疗。近年来,随着微创技术的发展,经皮肝脏射频消融术（Radio frequency abation）已成为肝癌治疗的重要辅助手段,并且随着技术的发展与成熟,射频消融的适应症逐渐放宽,但临近Glison鞘附近的肿瘤一直以来被视为射频消融治疗的禁区，本文通过射频消融联合鼻胆管冷循环治疗肝门部肿瘤来探讨肝门部肝癌射频消融的可行性与安全性。; 张林菲陈先祥蔡庆和曾天才周晋航; 关键词：射频消融

腹腔镜胆总管探查取石65例临床体会: 2011年; 随着腹腔镜技术的进步,腹腔镜胆总管探查术（laparoscopic common bile duct exploration,LCBDE）临床应用越来越广泛,已逐渐成为治疗胆总管结石的理想方法。我院2007年1月至2009年12月为65例患者行LCBDE,效果满意,现报告如下。; 何志军陈先祥蔡庆和程彩涛张林菲陈海田; 关键词：腹腔镜技术胆总管探查取石腹腔镜胆总管探查术 LCBDE DUCT

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张林菲

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