张艳辉
- 作品数：8 被引量：36H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学生命科学研究院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市科技创新能力建设计划项目重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HPLC法测定大鼠UGT1A6的酶活性及体外动力学分析被引量：3
- 2012年
- 目的:建立灵敏、稳定的高效液相色谱法,以对硝基酚为探针底物,评价体外大鼠肝微粒体中UGT1A6酶活性。方法:色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为20 mmol.L-1磷酸二氢钾缓冲液-甲醇(50∶50,V/V),流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,检测波长280 nm。对硝基酚与大鼠肝微粒体在37℃共同孵育一段时间后,加入冰乙腈终止反应,于4℃下12000 r.min-1离心15 min后,吸取上清进行HPLC分析,以双倒数作图法计算酶动力学参数。结果:对硝基酚保留时间为8.95 min,线性范围为0.5～100μmol.L-1,回归方程为Y=5973.12X+571.58(r=0.9999),最低检测限(LOD)为0.1μmol.L-1(S/N≥3),最低定量限(LLOQ)为0.5μmol.L-1,回收率为104.5%～105.5%,日内、日间RSD均小于10%,温孵体系中其他内源性物质不干扰测定;计算酶动力学参数Km为24.63μmol.L-1,Vmax为18.87 nmol.min-1.mg.protein-1。结论:该方法灵敏度高、稳定性好,适合体外对硝基酚的测定,可用于大鼠体外UGT1A6酶活性的评价及酶动力学研究。
- 郭延垒于超杨竹王应雄张艳辉张有金
- 关键词：大鼠肝微粒体
- 237例小儿腹痛病因及临床研究
- 目的:了解小儿腹痛病因及不同病因所致的腹痛的特点和辅助检查的差异。
方法:自2009年11月至2010年2月,对以腹痛为主诉欲行胃镜检查的237例门诊及部分住院患儿进行详细的病史采集,随访胃镜及相关的辅助检查结果,...
- 张艳辉
- 关键词：儿童腹痛病因分析胃镜检查
- 文献传递
- HPLC测定大鼠肝微粒体中谷胱甘肽硫转移酶活性及体外动力学研究被引量：3
- 2012年
- 目的建立一种测定1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)高效液相色谱分析方法,并以1-氯-2,4-二硝基苯为探针测定大鼠肝微粒体中谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性并进行体外动力学分析。方法色谱条件:Welch Materials UltimateTMXB C18反相柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水(7∶3),流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,检测波长238 nm。实验方法:1-氯-2,4-二硝基苯与大鼠肝微粒体在37℃温孵7 min后,冰乙腈终止反应。反应液离心取上清液过滤后进行HPLC分析,通过Sigma Plot软件作图求算Vmax、Km及代谢清除率(CLint)值。结果 1-氯-2,4-二硝基苯的Rt=6.0 min,峰形良好,且无内源性干扰。最低检测限为1.0μmol.L-1,线性范围:2.5～100.0μmol.L-1。日内、日间精密度均小于10%。5 d内于室温及-20℃下较稳定。方法回收率为99.38%～108%。动力学分析表明,不同浓度1-氯-2,4-二硝基苯在0.02 mg.mL-1蛋白浓度下孵育7 min,测得动力学参数:Vmax为85.45 nmol.min-1.(mg protein)-1;Km为15.09μmol.L-1;CLlint为5.66 mL.min-1.(mg protein)-1。结论该方法稳定可靠,灵敏度高,能准确快速测定谷胱甘肽硫转移酶活性,可用于其体外动力学研究。
- 张有金于超郭延垒张艳辉杨竹李文娟
- 关键词：高效液相色谱法大鼠肝微粒体谷胱甘肽硫转移酶
- 高效液相色谱法测定鼠肝微粒体中CYP1A2酶的活性及动力学考察被引量：8
- 2012年
- 目的:建立以非那西丁为探针的高效液相色谱-紫外检测的实验方法,测定大鼠肝微粒体中CYP1A2酶活性并对其进行动力学考察。方法:采用Shimadzu Shim-Pack VP-ODS柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为:100 mmol·L-1磷酸二氢钠缓冲液(pH 4.3)和乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温为室温,检测波长245 nm。非那西丁与大鼠肝微粒体在37℃温孵60 min,加入冰甲醇终止,12000 r.min-1离心10 min,取上清进行HPLC分析,以Lineweaver-Burk作图计算Vmax与Km值。结果:非那西丁、对乙酰氨基酚及其内标间乙酰氨基酚三者分离良好且无内源性干扰。对乙酰氨基酚最低检测限50 nmol·L-1,线性范围0.1～10μmol·L-1。日内日间精密度均小于10%。回收率大于75%。动力学考察表明选择甲醇作为终止试剂效果较好,非那西丁在0.2 mg·mL-1大鼠肝微粒体体系中孵育60 min,测得动力学参数Vmax为0.21 nmol·min-1.mgprotein-1,Km为20.39μmol·L-1。结论:该方法稳定,结果能准确地反映CYP1A2酶的活性,可以用于相关动力学研究。
- 张艳辉于超郭延垒张有金杨竹王应雄
- 关键词：非那西丁对乙酰氨基酚CYP1A2微粒体高效液相色谱药代动力学
- 黄芪甲苷通过抑制大鼠体内CYP1A2酶活性影响药物相互作用被引量：10
- 2012年
- 目的研究黄芪甲苷对大鼠体内CYP1A2酶活性的影响,阐明由CYP1A2酶所引发的药物相互作用可能性。方法采用色谱柱为waters-symmetry C18柱(250 mm×4.6 mm I.D.,5μm);流动相为甲醇和水(体积比17∶83);检测波长=274 nm;柱温=30℃;流速=1 ml/min的色谱条件。7只SD大鼠随机分为2组,实验组3只预给予黄芪甲苷1周,对照组4只给予0.1%DMSO水溶液,第8天分别给予茶碱,通过高效液相色谱法测定探针药物茶碱的血药浓度,比较2组的动力学参数的差异来考察黄芪甲苷对CYP1A2酶活性的影响。结果茶碱、内标对乙酰氨基酚二者分离良好且无内源性干扰,茶碱的最低检测限80 nmol/L,线性范围0.2～50μmol/L,日内日间精密度均小于10%,提取回收率大于91%,实验组的动力学参数药物浓度-时间曲线下面积AUC(0-∞)(131.16±3.22)明显高于对照组(97.51±6.40),而体内总体清除常数CL/F(0.12±0.01)明显低于对照组(0.17±0.02)(P<0.05)。结论黄芪甲苷对大鼠体内CYP1A2酶活性有明显的抑制作用,临床用药中应尽量避免与由CYP1A2所代谢的药物联合应用。
- 张艳辉于超郭延垒张有金李文娟杨竹王应雄
- 关键词：CYP1A2黄芪甲苷茶碱
- 以CDNB为探针测定大鼠肝微粒体中GST活性并优化反应体系被引量：2
- 2013年
- 目的以1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)为探针,优化大鼠肝微粒体中谷胱甘肽硫转移酶(GST)催化反应的条件,为准确测定GST活性提供依据。方法采用Welch Materials Ultimate TM XB C18反相柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(7∶3),流速0.8 mL.min-1,检测波长238 nm。首先于0.05 mg.mL-1蛋白浓度下,孵育10 min,检测CDNB能否被GST催化发生反应,然后分别在CDNB及CDNB+GSH两种反应条件下,比较不同浓度蛋白、孵育时间、底物浓度的反应差异,选出合理反应条件。结果 CDNB在选定色谱条件下实现了快速分离,且无内源性干扰。CDNB在GST催化下发生了反应;在不同浓度蛋白、孵育时间、底物浓度下,两种反应条件下CDNB反应存在明显差异(P<0.05):CDNB及GSH作为起始条件时反应较少,此外,CDNB反应量与蛋白浓度、孵育时间分别呈线性关系,是优化反应条件的重要依据。结论采用CDNB测定GST活性时,选择合适的CDNB及GSH反应条件能准确地测定GST活性,可用于GST活性测定及相关动力学分析。
- 张有金郭延垒张艳辉李文娟于超
- 关键词：高效液相色谱法大鼠肝微粒体谷胱甘肽硫转移酶
- 青海产小叶黑柴胡中皂苷类成分的含量分析被引量：10
- 2012年
- 目的测定青海产小叶黑柴胡中总皂苷、柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的含量,为其质量评价和开发利用提供参考。方法采用分光光度法测定小叶黑柴胡中总皂苷的含量;采用高效液相色谱法测定小叶黑柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量。结果小叶黑柴胡中总皂苷含量>2.77%,柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量分别高于0.54%和0.14%,其中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量远高于中国药典中柴胡含量项下的标准。结论本方法简便快速,结果准确、稳定,适用于小叶黑柴胡中皂苷类成分的含量测定。青海产小叶黑柴胡具有较高的药用价值。
- 曹纬国陶燕铎张有金张艳辉郭延垒于超
- 关键词：小叶黑柴胡柴胡总皂苷柴胡皂苷A柴胡皂苷D高效液相色谱法
- 黄芪甲苷对大鼠CYP1A2酶活性影响的研究
- 目的：探讨黄芪甲苷对大鼠CYP1A2酶活性的影响。 方法：分别选用非那西丁和茶碱作为测定CYP1A2酶活性的探针，以研究黄芪甲苷对CYP1A2酶活性的影响。在体外试验中，采用微粒体温育法，考察黄芪甲苷对大鼠肝微粒体中C...
- 张艳辉
- 关键词：联合用药黄芪甲苷动物模型
- 文献传递
