文忠
- 作品数：103 被引量：339H指数：10
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 间充质干细胞靶向转运胸苷激酶基因联合更昔洛韦杀伤鼻咽癌细胞被引量：1
- 2012年
- 背景:研究证实,间充质干细胞能通过基因修饰成为肿瘤治疗的靶向载体。目的:观察转染胸苷激酶基因的胸苷激酶-间充质干细胞联合更昔洛韦对鼻咽癌细胞的靶向杀伤作用。方法:应用LipofectamineTM2000将表达胸苷激酶基因的重组质粒pGL3-EGFP-胸苷激酶转染至SD大鼠间充质干细胞,观察其增殖能力。应用Transwell小室观察胸苷激酶-间充质干细胞的归巢特性;将胸苷激酶-间充质干细胞植入裸鼠,观察其致瘤性;用胸苷激酶-间充质干细胞/更昔洛韦干预人鼻咽癌细胞5-8F,观察其对细胞的杀伤作用及旁观者效应。结果与结论:荧光显微镜观察及RT-PCR检测结果提示实验成功将胸苷激酶基因转染至间充质干细胞,CCK-8检测结果显示胸苷激酶-间充质干细胞与间充质干细胞增殖能力差异无显著性意义(P>0.05)。Transwell小室迁移实验显示胸苷激酶-间充质干细胞具有归巢特性,裸鼠移植瘤实验显示胸苷激酶-间充质干细胞无致瘤性。CCK-8检测检测发现胸苷激酶-间充质干细胞/更昔洛韦具有旁观者效应,可明显降低5-8F的生存率(P<0.01)。提示胸苷激酶-间充质干细胞/更昔洛韦对鼻咽癌细胞具有靶向迁移及杀伤作用,间充质干细胞可作为治疗鼻咽癌的理想靶向转运载体。
- 钟品能文忠申聪香王海丽王军旗
- 关键词：间充质干细胞归巢旁观者效应
- NLRs模式识别受体在变应性鼻炎患者鼻粘膜中的表达和意义
- 目的 探讨NLRs样模式识别受体(PRR) Nod1、Nod2、Nalp3在变应性鼻炎患者鼻粘膜中的作用及意义.方法 分别采用Real-Time RT-PCR、免疫组织化学及western-blot检测Nod1、Nod2...
- 文忠张沈华申聪香李冠雪杨柯柯史欣
- 耳鼻咽喉-头颈外科学课程解剖生理双语教学模式初探
- 2010年
- 本文探讨了耳鼻咽喉-头颈外科学课程中解剖生理双语教学的模式、实施效果、优势及存在问题.教学实践表明,耳鼻咽喉-头颈外科学课程中解剖生理开展双语教学是可行的.为了提高教学效果,双语教学应当特别关注教学质量、提高学生学习主动性、提高师资外语水平及建立完善的双语教学评价体系等方面的问题.
- 文忠申聪香陈浩钱宇虹谢民强
- 关键词：耳鼻咽喉-头颈外科学双语教学解剖学生理学
- Lenti-TK介导间充质干细胞对鼻咽癌CD133^+干细胞的靶向迁移及杀伤作用被引量：2
- 2013年
- 目的:观察慢病毒-胸苷激酶(lentivirus-thymidine kinase,Lenti-TK)/间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对鼻咽癌CD133+干细胞的靶向迁移及杀伤作用。方法:构建包含TK基因的重组慢病毒表达载体Lenti-TK,感染MSC后得到Lenti-TK-MSC,RT-PCR及Western blotting检测Lenti-TK-MSC中HA-TK的表达。免疫磁珠法从鼻咽癌5-8F细胞中分选CD133+细胞;Transwell小室迁移实验检测Lenti-TK-MSC对CD133+5-8F细胞的趋向性;Lenti-TK-MSC联合更昔洛韦(ganciclovir,Lenti-TK-MSC/GCV)与CD133+5-8F细胞共培养,CCK-8试剂盒检测其对细胞的杀伤作用和旁观者效应。结果:成功构建重组慢病毒载体Lenti-TK,其滴度为1×108UT/ml,Lenti-TK(MOI=50)感染MSC 72 h时,感染效率达(95.1±0.1)%。Lenti-TK-MSC迁移至CD133+5-8F细胞组的细胞数明显多于CD133-5-8F细胞组、未分选5-8F细胞组[(83.0±8.7)vs(29.6±5.3)、(38.3±5.2),P=0.000]。Lenti-TK-MSC/GCV处理组与单独GCV处理组、Lenti-TK-MSC/GCV条件培养液(即Lenti-TK-MSC加入1 mg/L GCV培养48 h的培养上清)处理组相比,CD133+5-8F细胞的存活率明显降低[(37.2±2.3)%vs(98.5±3.1)%、(83.8±3.4)%,P=0.000]。Lenti-TK-MSC数量达到混合细胞总数(Lenti-TK-MSC和CD133+5-8F细胞)的20%时,CD133+5-8F细胞存活率为(68.2±2.3)%,表现出明显的旁观者杀伤效应。结论:Lenti-TK感染后MSC对鼻咽癌CD133+5-8F细胞具有靶向迁移及杀伤作用。
- 李冠雪申聪香文忠钟品能杨柯柯张沈华
- 关键词：鼻咽癌间充质干细胞旁观者效应
- 脂肪来源间充质干细胞调控变应性鼻炎小鼠T细胞免疫状态的研究被引量：10
- 2016年
- 目的 探讨脂肪来源间充质干细胞（adipose—derivedstemceils，ADSC）对变应性鼻炎（allergicrhinitis，AR）小鼠辅助性T细胞（Th）、调节性T细胞（Treg）的调节作用及其机制。方法取Balb／c小鼠60只，采用随机数字表法随机分为6组（分组表示为：致敏／激发／处理），分别为实验组1（OVA／OVA／高剂量ADSC）、实验组2（OVA／OVA／低剂量ADSC）、实验组3（0VA／OVA／磷酸盐缓冲液PBS）、实验组4（OVA／OVA／0）、对照组1（PBS／PBS／0）和对照组2（O／O／0）。常规分离提取小鼠ADSC，卵清蛋白（ovalbumin，OVA）联合氢氧化铝构建AR小鼠模型，尾静脉注射CM-Dil标记的ADSC（高剂量组：3×10^6；低剂量组：1×10^6）连续3d，48h后处死，酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）检测血清中自细胞介素（interleukin，IL）4、IL-6、IL-10和叮干扰素（Y interferon，IFN-y）的水平，反转录聚合酶链反应（reversetranscriptasepolymerasechainreaction，RT—PCR）检测脾脏中上述各细胞因子mRNA的表达，荧光显微镜下观察ADSC在AR模型鼠鼻黏膜中的迁移分布，鼻黏膜HE染色观察嗜酸粒细胞浸润情况。以SPSS13．0软件进行统计学处理。结果成功分离培养并鉴定小鼠ADSC。AR模型小鼠症状学评分与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组1与实验组4相比，血清IL4、IL-6水平下调[组1：（17．95±7．78）、（27．51±5．93）pg／ml；组4：（56．82±9．12）、（70．034-7．22）pg／m1]，IFN-1、IL-10水平上调[组1：（367．74±、13．79）、（417．10±72．40）p∥ml；组4：（199．464-11．25）、（122．50±15．57）pgZml]，差异均有统计学意义（P值均〈0．01）。实验组1与实验组2相比，血清IL-4、IL．6水平下调[组1：（17．95±7．78）、（27．51±5．93）pg／ml；组2：（41．57±12．27）、（56．21±9．23）pg／m1]，IFN-1、IL-10水平上调[组1�
- 李冠雪刘艳慧申聪香文忠张沈华杨柯柯
- 关键词：调节性T细胞
- 增强型胸苷激酶基因表达载体的构建及其杀伤鼻咽癌细胞的实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨改良构建人端粒酶催化亚单位（human telomerase catalytic subunit promoter,hTERT）启动子及巨细胞病毒原核（cytomegalovirus,CMV）增强子联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（thymidine kinase,TK）的增强型表达载体在鼻咽癌细胞体内外实验中的靶向杀伤效应及体内应用的安全性评价.方法 以pGL3-basic空载体为模板,分别酶切连接hTERT启动子、CMV增强子及TK基因构建靶向性增强型表达载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTERTp-CMV（以hTERT单启动子调控TK基因表达载体作为对照组）,转染端粒酶阳性的人鼻咽癌5-8F细胞及用做对照组的人乳腺癌MCF-7细胞和端粒酶阴性的正常人脐静脉内皮细胞ECV-304,分别采用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达差异、实时荧光定量PCR检测转染后TK基因mRNA表达差异、TeloChaser法检测上述细胞中的端粒酶活性、四甲基偶氮唑蓝（MTt）联合Boyden小室实验分析增强型载体对鼻咽癌细胞增殖及侵袭抑制的作用.将鼻咽癌细胞接种于裸鼠腋部皮下,构建裸鼠鼻咽癌移植瘤模型,研究增强型载体对裸鼠移植瘤的体内生长抑制作用及对全身的毒副反应情况.结果 ①成功改良构建hTERT/CMV双调控TK基因的增强型表达载体.②转染增强型载体组及单启动子载体组的鼻咽癌5-8F细胞均有绿色荧光表达,但前者荧光数量及强度均较后者强,对照组端粒酶阳性的乳腺癌细胞也有很强的荧光表达,而ECV-304细胞几乎无绿色荧光表达.实时荧光定量PCR结果显示,增强型载体组的TK基因mRNA表达量是单启动子组的2-5倍.③ TeloChaser法结果显示,两种肿瘤细胞（5-8F细胞、MCF-7细胞）端粒酶活性均为阳性,正常对照ECV-304细胞端粒酶活性为阴性.④MTT联合Boyden小室侵袭实验结果显示,增强型表达载体对5-8F细胞体外增殖及侵袭力均有明显抑制作用.相对细胞存活率为37.0%,较对照组明显低（P〈0.01）.⑤体内实验结
- 申聪香文忠钱宇虹关小芳牟少凤
- 关键词：胸苷激酶鼻咽肿瘤巨细胞病毒
- PinX1基因靶向抑制端粒酶活性诱导鼻咽癌细胞凋
- 目的探讨PinX1基因靶向抑制端粒酶活性诱导鼻咽癌细胞凋亡作用和意义。方法1、构建包含全长人PinX1基因序列的克隆载体pEGFP-C3-PinX1。2、半定量RT-PCR法检测鼻咽癌细胞转染前后PinX1 mRNA的表...
- 文忠赖肖芬申聪香于超生
- 咽鼓管鼓口黏膜下半堵塞术治疗咽鼓管异常开放症
- 目的探讨提高手术治疗咽鼓管异常开放症疗效的方法。方法采用咽鼓管鼓口黏膜下半堵塞术治疗咽鼓管异常开放症15例(18耳)。结果术后随访0．5～6年,治愈14例16耳(88．9%),好转1例2耳(11．1%),同时,未观察到任...
- 江刚文忠徐学东郭梦和黄以乐
- 关键词：咽鼓管异常开放症手术治疗
- 文献传递
- 慢性化脓性中耳炎合并迷路瘘管诊治体会(附32例报告)被引量：5
- 2009年
- 目的探讨慢性化脓性中耳炎并发迷路瘘管的临床特征及其手术治疗方法。方法回顾分析我科2000—2007年收治的32例(36耳)手术证实的慢性化脓性中耳炎伴迷路瘘管患者的临床资料。其中有眩晕史者24例(75.0%),诉耳鸣者28例(87.5%),瘘管试验阳性12例(37.5%)。对于小于2mm的骨性半规管瘘,在彻底清除病变后予肌筋膜覆盖。对瘘管大于2mm者,如迷路瘘管处病变难以清除,予保留一薄层胆脂瘤基质,行开放式乳突根治术;如能彻底清除病变者,予带筋膜的耳屏软骨片封闭瘘管,外面再覆盖一层肌筋膜。对瘘管破坏严重者,在彻底清除病变的同时行半规管阻塞术。22耳行开放式乳突根治术后I期行鼓室成形术,14耳行改良乳突根治术。结果胆脂瘤型28耳,骨疡型8耳;瘘管位于外半规管30耳(83.4%),上半规管3耳(8.4%),两者同时有瘘管1耳(2.7%),鼓岬部瘘管2耳(5.5%);面神经骨管破坏致神经裸露16例,3例位于垂直段,7例位于水平段,同时合并有面神经水平段或锥曲段骨管部分缺损6例。30例患者于术后1～12天内(平均3.5天)眩晕缓解。2例行半规管填塞者,术后16天眩晕逐渐缓解。术后纯音测听平均骨导阈值(0.5kHz、1kHz、2kHz和4kHz),12耳与术前相同,较术前下降10～20dB者16耳,较术前下降20dB以上者8耳。随访3月～6年,眩晕无复发。结论前庭症状存在与否,瘘管试验是否为阳性,以及影像学的改变等都不是术前确诊迷路瘘管的可靠指标,术中探查所见是确诊迷路瘘管最重要的依据。手术方法的选择及对瘘管区病变的处理应根据瘘管的部位、大小及患者听力状况和术者的手术经验而定。
- 万良财郭梦和谢南屏文忠陈浩龚剑陈帅君
- 关键词：化脓性中耳炎迷路炎瘘管
- 浅谈课堂教学中的“题外话”
- 2006年
- 江刚郭梦和文忠
- 关键词：课堂教学
