易富贤 作品数:9 被引量:6 H指数:2 供职机构: 湖南医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
培养的牛心内膜内皮细胞水解细胞外腺苷酸<英文> 1999年 目的:研究牛心内膜内皮细胞(BEEC)腺苷三磷酸双磷酸酶(apyrase)的特性并比较牛心内膜及血管内皮细胞的胞外腺苷酸酶活性。方法:以反相HPLC测定核苷酸含量,以磷离子释放法检测apyrase活性。结果:叠氮钠10mmol·L^(-1)和氟化钠20mmol·L^(-1)分别抑制BEEC apyrase 51%及38%活性,而Na^+/K^+ -ATP酶抑制剂哇巴因则对BEEC apyrase活性无影响。过氧化氢0.5mmol·L^(-1)呈时间依赖性地抑制心内膜内皮细胞apyrase活性。BEEC的apyrase活性低于主动脉内皮细胞的apyrase活性,而BEEC的胞外AMP酶则远较血管内皮细胞的活性高。结论:BEEC apyrase具有叠氮钠和氟化钠敏感的、哇巴因不敏感的特性;与血管内皮细胞相比,BEEC apyrase活性较高而胞外AMP酶活性较低。 易富贤 刘文兰 谌立伟 曾珊 郭兆贵关键词:心内膜 叠氮钠 APYRASE 丝裂素活化的蛋白激酶反义寡核苷酸对p42/p44,p38和JNK激酶的靶向选择性及其对血管平滑肌细胞DNA合成的抑制作用<英文> 被引量:1 1999年 目的:探讨丝裂素活化的蛋白激酶反义寡核苷酸对血清诱导的培养大鼠血和平滑肌细胞增殖的选择性及序列依赖性抑制作用。方法:用脂质体将p42-和p44-MAPK反义寡核苷酸转染入大鼠血管平滑肌细胞,设正义及随机寡核苷酸对照,20%血清刺激后,设正义及随机寡核苷酸对照,20%血清刺激后,用Western Blot法测定总p44/p42-MAPK,p38 MAPK及JNKs蛋白水平及磷酸化MAPK表达。 黄韶玲 丁波 李江 易富贤 刘文兰 余清声 郭兆贵关键词:反义寡核苷酸 血管平滑肌增殖 Platelet-released ADP stabilizes PAF-induced rabbit platelet aggregation by stabilizing intracellular calcium 被引量:3 1998年 PlateletreleasedADPstabilizesPAFinducedrabbitplateletaggregationbystabilizingintracelularcalcium1YIFuXian,GUOZhaoGui2(Lab... 易富贤 郭兆贵关键词:PAF 腺苷三磷酸 乃舒匹林对离体血管的舒张作用 2000年 乃舒匹林(2-(乙酰氧基)苯甲酸-3-(硝氧基)丙酯)是一种新型的阿司匹林硝酸酯衍生物,初步实验提示该药除可能具有抑制环加氧酶而产生抗炎等作用外,在体内还能释放一氧化氮(NO)基团,可能对胃肠粘膜提供一定的保护作用,并能通过NO对心血管等系统产生其他作用如血管舒张效应等。本实验研究了乃舒匹林对离体兔胸主动脉的舒张作用,结果表明乃舒匹林对于内皮完整和去除内皮的血管均有剂量依赖的舒张作用(EC50分别为7.26×10^-6mol·L^-1和1.25×10^-5mol·L^-1),与硝酸甘油(EC50分别为4.69×10^-6mol·L^-1和5.3×10^-6mol·L^-1)。相比,差异无显著性(P>0.05)。阿司匹林对离体血管无显著的舒张作用(浓度范围1×10^-8mol·L^-1至1×10^-4mol·L^-1)研究结果表明乃舒匹林可不依赖于内皮细胞地扩张离体血管,这种血管舒张效应可能与提供NO,作用于血管平滑肌有关。 瞿湘萍 易富贤 等关键词:一氧化氮 血管舒张 主动脉条 培养牛心内膜内皮细胞的腺苷三磷酸双磷酸酶的特性研究(英文) 1999年 包括血管内皮细胞在内的多种细胞和组织存在腺苷三磷酸双磷酸酶(apyrase) , 但心内膜内皮细胞是否含有apyrase 尚无报道。本文旨在研究牛心内膜内皮细胞apyrase 的特性。以无机磷释放法检测培养牛心内膜内皮细胞(BEEC) apyrase 的活性。公认的apyrase 抑制剂叠氮钠呈浓度依赖性地抑制apyrase 活性; 另一种apyrase 抑制剂氟化钠(20 mmol/L) 也明显抑制apyrase 活性。而Na+ /K+ATPase 的抑制剂哇巴因(3 mmol/L) 却不能抑制该酶活性。BEECapyrase 活性依赖于钙或镁等二价阳离子以及pH 的改变, EDTA 或EGTA (1mmol/L) 均能完全抑制其活性, 在pH 值为8-5 时活性最高。由此可见, 牛心内膜内皮细胞存在叠氮钠敏感的、依赖于二价阳离子和pH 值的腺苷三磷酸双磷酸酶活性。 易富贤 孙平 黄韶玲 刘文兰 郭兆贵关键词:腺苷三磷酸 腺苷二磷酸 心内膜 血小板活化因子诱导血小板P-选择素表达及相关信号传导机制(英文) 1999年 目的:研究PAF诱导P-选择素表达的细胞内信号机制。方法:置备人血小板悬液,用流式细胞术测定PAF诱导的P-选择素表达。结果:用依他酸2mmol·L^(-1)和BAPTA200μmol·L^(-1)分别阻断外钙内流和络合内钙,显著抑制PAF诱导的P-选择素表达[13.3±0.9)%;(16.8±1.9)% vs PAF对照组(47.5±1.3)%,P<0.01]。用阿米洛利400μmol·L^(-1)抑制Na^+/H^+交换,Genistein 300μmol·L^(-1)抑制蛋白酪氨酸磷酸化也均可抑制PAF引起的P-选择素上调[(37.5±2.1)%;(29±4)% vsPAF对照组(47.5±1.3)%,P<0.01)]。结论:蛋白酪氨酸磷酸化,细胞内钙动员及Na^+/H^+交换激活中介PAF诱导的血小板P-选择素表达。 曾珊 易富贤 郭兆贵关键词:血小板激活因子 P-选择素 信号传导 Regulatory role of protein tyrosine phosphorylation in platelet activating factor-induced signal transduction in platelets 被引量:2 1999年 目的:研究蛋白酪氨酸磷酸化(PTP)在血小板激活因子(PAF)诱导血小板信号传导中的作用.方法:用水洗兔血小板考查Gen抑制聚集及5羟色胺释放,Fura2和BCECF负载测胞内钙及pH,特异性抗酪氨酸单抗及免疫印迹法检测PTP.结果:Gen100和200μmol·L-1分别抑制PAF诱导的5羟色胺释放为237%±20%及41%±8%,对胞内钙增加和Na+/H+交换也有抑制作用.PAF增加Mr为70000,60000,50000,42000/40000,34000的PTP.Gen200,400μmol·L-1明显抑制该效应.用Sta20nmol·L-1,BAPTA200μmol·L-1,依他酸2mmol·L-1,分别阻断PKC及胞内钙增加和内流,也减少PTP形成.结论:PTP参与PAF诱导血小板信号传导途径,PKC活化和胞内钙动员对PTP有调节作用. 曾珊 易富贤 郭兆贵关键词:血小板激活因子 高糖增强兔血管平滑肌细胞对内皮素-1的增殖反应性(英文) 1999年 观察高糖对内皮素-1(ET-1)促兔主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.方法: VSMC分别培养于含正常葡萄糖、高糖或高渗(5.5,25,葡萄糖 5.5+甘露醇 19.5 mmol·L-1)的培养基中[3H]胸腺嘧啶掺入法检测DNA合成速率,蛋白质印迹法检测磷酸化 p44/42 MAPK的表达.结果:在 10至 10-8mol·L-1浓度范围内, ET-1以浓度依赖方式增加 VSMC的[3H]胸腺嘧啶掺入及磷酸化p44/42 MAPK的表达,从 10-11到 10-8mol·L-1,培养于高糖的 VSMC对相同浓度 ET-1的增殖反应性高于正常糖或高渗培养条件下的VSMC(P< 0.05,或 P< 0.01),而在后两种条件下,VSMC对ET-1的增殖反应无显著差别.同样,在高糖条件下,ET-1诱导的VSMC磷酸化p44/42MAPK的表达较正常糖和高渗VSMC增加 60%-65%结论:高糖增强VSMC对ET-1的增殖反应性,可能与磷酸化的 p44/42 郭迅 刘文兰 易富贤 郭兆贵关键词:葡萄糖 内皮素-1 血管平滑肌 增殖 牛心内膜腺苷三磷酸双磷酸酶对血小板聚集的抑制作用(英文) 1999年 目的:研究牛心内膜内皮细胞(EEC)腺苷三磷酸双磷酸酶的抗血小板聚集效应。方法:培养牛EEC。以高效液相色谱法测定ADP,用比浊法测血小板聚集。结果:ADP 500μmol·L^(-1)与EEC温孵后,引起ADP浓度进行性地降低。与此相适应的是,未代谢的ADP诱导血小板聚集的能力也降低。在阿司匹林处理过的EEC 1×10~9cells·L^(-1)存在下,凝血酶500U·L^(-1)及PAF 1nmol·L^(-1)诱导的经阿司匹林1mmol·L^(-1)及亚甲基蓝10μmol·L^(-1)处理过的血小板聚集明显受到抑制,且聚集是可逆的;EEC的此种作用类似于腺苷三磷酸双磷酸酶的作用。EEC明显抑制ADP 5μmol·L^(-1)诱导的血小板聚集,但不能抑制ADP-β-S 15μmol·L^(-1)诱导的血小板聚集。结论:腺苷三磷酸双磷酸酶水解ADP是牛EEC重要的抗血栓机制。 易富贤 黄韶玲 郭迅 孙平 郭兆贵关键词:腺苷三磷酸 心内膜 血小板聚集