梁成罡
- 作品数：8 被引量：43H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院植物保护研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 马铃薯卷叶病毒中国分离株外壳蛋白基因及其上游先导序列的cDNA克隆和序列分析被引量：4
- 1996年
- 按照马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）核苷酸序列，针对ＣＰ基因及其上游基因间隔区全长约０．８ｋｂ的区段设计合成两个特异性引物，以马铃薯卷叶病毒中国分离株（ＰＬＲＶ－Ｃｈ）的ＲＮＡ为模板，反转录合成ＣＤＮＡ第一条链，再经ＰＣＲ扩增合成ｃＤＮＡ，将ＣＤＮＡ克隆于ｐＵＣ１９质粒．限制性酶切分析和核苷酸序列测定表明克隆的ＰＬＲＶ－Ｃｈ外壳蛋白（ＣＰ）基因及其上游基因间隔区的全长ＣＤＮＡ共８２４个核苷酸，与国外报道的４个ＰＬＲＶ分离株的核苷梳序列相比具有高度同源性．ＰＬＲＶ的外壳蛋白基因序列与其上游基因间隔区相比保守性更强．
- 赵福宽张鹤龄梁成罡哈斯阿古拉刘纪麟郑用琏
- 关键词：马铃薯卷叶病毒分子克隆外壳蛋白基因
- 特异切割马铃薯卷叶病毒复制酶基因负链的核酶研究被引量：19
- 1998年
- 根据锤头状核酶的作用模式，设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒中国分离株（ＰＬＲＶ－Ｃｈ）复制酶基因负链ＲＮＡ的核酶序列。以体外转录的ＰＬＲＶ－Ｃｈ复制酶基因负链ＲＮＡ作为底物，与转录的核酶ＲＮＡ共同保温，以检测核酶对底物的体外切割作用。实验结果表明。
- 杨静华哈斯阿古拉梁成罡张鹤龄
- 关键词：马铃薯卷叶病毒核酶体外切割
- 马铃薯卷叶病毒复制酶基因3'端克隆及序列分析被引量：9
- 1997年
- 马铃薯卷叶病毒复制酶基因３端克隆及序列分析梁成罡哈斯阿古拉张鹤龄（内蒙古大学，呼和浩特市０１００２１）关键词马铃薯卷叶病毒，复制酶，基因克隆，ＰＣＲ马铃薯卷叶病毒（Ｐｏｔａｔｏｌｅａｆｒｏｌｖｉｒｕｓ，ＰＬＲＶ）属黄化病毒组（Ｌｕｔｅｏｖｉｒｕｓ）...
- 梁成罡哈斯阿古拉张鹤龄
- 关键词：植物病毒马铃薯卷叶病毒复制酶基因克隆
- 抗菌蛋白AP1编码基因对马铃薯的转化及其介导的青枯病抗性研究被引量：20
- 2002年
- 根据已知马铃薯抗青枯菌蛋白AP1编码基因序列,合成了特异性引物,经PCR扩增、酶切以及连接、转化等分子操作,成功地获得了AP1编码基因植物表达载体pHap1,该载体具有-2E-P35S-12-ap1-结构。以电激法将pHap1导入根癌农杆菌LBA4404,用叶盘法转化马铃薯青枯病感病品种Mira、中-5-1及金冠试管苗,分别获得了卡那霉素(kan)抗性再生苗。经PCR、Southern、Northern检测,表明ap1基因已成功整合到转基因植株染色体上并正确表达。对Mira品种的转基因植株进行了青枯病抗病性鉴定,结果表明,转基因植株的抗病性比非转基因植株对照明显提高,发病或出现萎蔫症状的时间延迟、病情指数降低。
- 梁成罡何礼远
- 关键词：马铃薯青枯病抗病性介导
- 抗菌蛋白AP1编码基因转化马铃薯和烟草及其对青枯病抗性研究
- 根据已知马铃薯抗青枯菌蛋白AP1编码基因ap1序列,合成了一对特异性引物P<,1>/P<,2>,分别引入限制性酶切位点AccI及XhoI.获得了ap1基因的植物高效表达载体pHap1.以电激法将pHap1导入根癌农杆菌L...
- 梁成罡
- 关键词：马铃薯烟草转基因植物青枯病
- 文献传递
- 马铃薯卷叶病毒中国株(PLRV-Ch)复制酶基因结构研究被引量：4
- 2000年
- 用设计合成的两对特异性引物 ,以马铃薯卷叶病毒中国分离株PLRV ChRNA为模板 ,经反转录PCR扩增 ,将复制酶基因 3′端 0 .6kb和 5′端 1.2kb ,克隆于 pUC19中 ,分别构建了重组质粒pLR3和 pLR5,并分五段进行了序列分析。将获得的核苷酸序列及氨基酸序列与国外报导的四个PLRV分离株的相应区段的序列同源性进行了比较。结果表明具有高度同源性。文中对核苷酸序列中存在的可能移码序列和其下游的茎环结构或假节结构、以及特征性三次重复区及氨基酸序列中复制酶蛋白N端的碱性氨基酸序列以及C端区域中包括GDD在内的 8个特征序列进行了讨论。作者发现移码序列上游的三次重复的核苷酸序列可以形成连续折叠的互补双链区和发夹结构 ,这一结构可能和转译移码有关。此外PLRV复制酶蛋白N端部分氨基酸序列易变 ,而C端氨基酸序列十分保守 ,可能和复制酶功能有更重要关系。
- 张鹤龄梁成罡张彤哈斯阿古拉赵国芬
- 关键词：马铃薯卷叶病毒基因克隆复制酶
- 用复制酶基因cDNA探针检测表达病毒外壳蛋白基因马铃薯中的PLRV
- 1997年
- 利用马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）复制酶基因３′端长约６００ｂｐ的ｃＤＮＡ，用缺口平移方法进行３２Ｐ同位素标记，制备成ｃＤＮＡ探针，通过核酸斑点杂交，对提纯的马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）、病毒ＲＮＡ、ＰＬＲＶ感染的马铃薯汁液，表达ＰＬＲＶＣＰ基因的马铃薯叶片及块茎芽进行了检测．结果表明，３２Ｐ标记的复制酶基因ｃＤＮＡ探针特异性强、灵敏度高．可测得提纯病毒的最低含量为４０８ｎｇ／ｍｌ，病毒ＲＮＡ最低量为２７．８ｐｇ／ｍｌ，未转ＣＰ基因接种ＰＬＲＶ的马铃薯叶片提取液的最高稀释度为１３７５．接种ＰＬＲＶ的转ＣＰ基因的抗性马铃薯块茎芽和叶片提取液的最高稀释度为０～１／１５．此探针和只转入病毒外壳蛋白基因，不接种ＰＬＲＶ的转基因马铃薯汁液不发生反应．表明，探针只与ＰＬＲＶ基因组ＲＮＡ特异反应，而不与外壳蛋白基因及其ｍＲＮＡ反应，从而为表达ＣＰ基因的转基因马铃薯中ＰＬＲＶ的检测和抗病性鉴定建立了一种可靠的灵敏的分子生物学技术．此项技术已用于转ＣＰ基因马铃薯Ｄｅｓｉｒｅ，Ｆａｖｏｒｉｔａ。
- 张鹤龄梁成罡冯晓冬
- 关键词：CDNA探针PLRV马铃薯病毒外壳蛋白基因
- 马铃薯卷叶病毒复制酶基因5'端克隆及序列分析被引量：9
- 1998年
- 马铃薯卷叶病毒（Ｐｏｔａｔｏｌｅａｆｒｏｌｖｉｒｕｓ，ＰＬＲＶ）是正链ＲＮＡ病毒，属黄化病毒组（Ｌｕｔｅｏｖｉｒｕｓ）〔１〕，严格虫传，分布广泛，难以控制，侵染马铃薯能引起大面积减产，给马铃薯生产造成巨大损失。ＰＬＲＶ基因组全长６．０ｋｂ，有６个读...
- 梁成罡张彤哈斯阿古拉张鹤龄
- 关键词：马铃薯卷叶病毒RDRP基因克隆
