杨静华
- 作品数：6 被引量：35H指数：2
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 针对马铃薯卷叶病毒复制酶基因负链的突变核酶的克隆及体外转录
- 2000年
- 根据特异性切割马铃薯卷叶病毒中国分离株 ( PLRV-Ch)复制酶基因负链 RNA的锤头状核酶 ,设计、合成了编码与其相应的突变核酶的 c DNA,并克隆到质粒 p GEM-4 Z中 ,经序列分析及体外转录表明得到完整的突变核酶基因重组质粒 。
- 杨静华乔建军张鹤龄
- 关键词：马铃薯卷叶病毒克隆
- 二价核酶基因构建及对PLRV负链靶序列的体外切割研究被引量：1
- 2012年
- 根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)中国分离株(PLRV-Ch)复制酶基因负链RNA的二价核酶序列。将该核酶基因克隆到pGEM-4Z中,构建成体外转录载体pGEM-4ZDR;同时将包含核酶切割识别位点的PLRV-Ch复制酶基因cDNA近5'端的874 bp片段反向插入到pGEM-4Z中,构建了体外转录载体pGEM-4ZR5。以线性化的重组质粒pGEM-4ZDR和pGEM-4ZR5为模板,在T7 RNA聚合酶的作用下,分别转录获得核酶RNA和PLRV-Ch复制酶基因5'端负链RNA底物片段。将以上2种RNA转录物混合并经37℃保温后,检测结果表明,所得核酶RNA对PLRV-Ch复制酶基因负链RNA在体外具有较强的特异切割活性。
- 张剑峰张鹤龄于嘉林迟胜起贺秀芳郝文胜杨静华
- 关键词：马铃薯卷叶病毒复制酶基因体外切割
- 特异切割马铃薯卷叶病毒复制酶基因负链的核酶研究被引量：19
- 1998年
- 根据锤头状核酶的作用模式，设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒中国分离株（ＰＬＲＶ－Ｃｈ）复制酶基因负链ＲＮＡ的核酶序列。以体外转录的ＰＬＲＶ－Ｃｈ复制酶基因负链ＲＮＡ作为底物，与转录的核酶ＲＮＡ共同保温，以检测核酶对底物的体外切割作用。实验结果表明。
- 杨静华哈斯阿古拉梁成罡张鹤龄
- 关键词：马铃薯卷叶病毒核酶体外切割
- 表达葡萄糖氧化酶基因抗晚疫病马铃薯的培育(英文)被引量：17
- 2001年
- 葡萄糖氧化酶催化分子氧氧化b -D葡萄糖产生葡萄糖酸和H2 O2 。产生H2 O2 和其它活性氧物质是植物对病原体侵入的防御反应。实验证明H2 O2 水平升高不仅可诱发细胞过敏坏死反应 ,而且还能激活抗病基因表达如植物抗毒素及诱导病原相关蛋白 (PR)等基因的表达。通过农杆菌介导将来自黑麴霉(Aspergillusniger)的葡萄糖氧化酶基因转入 2个马铃薯重要栽培品种大西洋 (Atlantic)和夏普蒂 (Shepody)中获得 2 3个转基因株系 ,其中 75 %为Kan抗性植株。在 2 3个转基因株系中有 16个株系可用PCR扩增出目的基因。进一步用核酸斑点杂交选出 13个杂交阳性株系。转基因植物总DNA的Southernblot分析表明 ,GO基因已整合到马铃薯四倍体基因组中 ,转基因大西洋植株中目的基因为 2～ 4个拷贝 ,而夏普蒂转基因植株中为 1个拷贝。将转基因植株离体叶片接种呼和浩特地区流行的Phytophthoroinfestans的复合生理小种 1,3,4孢子。结果表明 ,和未转基因对照相比转基因植株病斑出现时间晚 ,病斑扩展速度慢 ,发病程度轻 ,感病叶片少。总体上表现出较明显抗病性。转基因大西洋中抗性株系多于夏普蒂。转基因马铃薯植株体内H2 O2 含量测定表明 ,转基因马铃薯植株的根系和叶片在KI-淀粉培养基上数天后变为蓝色 ,而未转基因对照植株的根系?
- 张立平杨静华李天然姚裕琪张鹤龄
- 关键词：葡萄糖氧化酶基因马铃薯晚疫病核酸斑点杂交抗性马铃薯
- 表达葡萄糖氧化酶基因抗晚疫病马铃薯的培育
- 本文通过根癌农杆菌介导,用葡萄糖氧化酶(GO)基因转化马铃薯栽培品种大西洋(Atlantic)和夏普蒂(Shepody),获得了23个转基因植株。经卡那霉素的抗性筛选,PCR 扩增检测,植物总 DNA 斑点杂交和 Sou...
- 张立平杨静华李天然姚裕琪张鹤龄
- 关键词：葡萄糖氧化酶基因马铃薯晚疫病斑点杂交
- 文献传递
- 侵染马铃薯的一种短杆状病毒的分离鉴定(英文)
- 1999年
- 从马铃薯“紫花白”叶片中分离到一种短杆状病毒，病毒粒体直径为１９±１．９ｎｍ，长度在１８０～２２０ｎｍ之间，ＯＤ２６０／２８０比值为１．２３，病毒核酸为ｓｓＲＮＡ，单一组分．用提纯的病毒免疫家兔，制备抗血清，微量沉淀法表明此病毒与ＰＬＲＶ，ＰＶＸ，ＰＶＹ，ＰＶＳ，ＴＭＶ均无血清学关系．病毒分离物可摩擦接种茄科，苋科、藜科植物，并在不同指示植物上引起不同的症状，但只在普通烟上产生系统感染．电镜观察和ＤＡＳ－ＥＬＬＳＡ检测证实此病毒可摩擦回接马铃薯“紫花白”，但不引起明显症状．病毒的稀释限点为１０－４～１０－５，体外存活期为６ｄ，致死温度为８０～８５℃．与目前已报道的侵染马铃薯的各种杆状ＲＮＡ病毒比较分析证明，此病毒是侵染马铃薯的一种新病毒，命名为马铃薯短杆状病毒（Ｐｏｔａｔｏｒｏｄ－ｓｈａｐｅｄＶｉｒｕｓ，ＰＲＶ）．
- 杨静华金萍马丽杰庞瑞杰张鹤龄
- 关键词：马铃薯PRV
