汪润
- 作品数：28 被引量：123H指数：5
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 流式细胞术分析ITP巨核细胞分化发育异常的初步研究被引量：6
- 2010年
- 目的建立流式细胞术(FCM)分析人骨髓巨核细胞的新方法,用于特发性血小板减少性紫癜(ITP)巨核细胞分化发育异常的初步研究。方法对15例正常骨髓供者(对照组)、37例ITP患者及11例继发性血小板减少症(ST)患者进行骨髓巨核细胞绝对计数;采用Percoll密度梯度分离法富集骨髓巨核细胞,经透膜处理后,用荧光素标记的单克隆抗体标记巨核细胞糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(CD41a)、血管性血友病因子(vWF)、P-选择素(CD62P),用碘化丙锭(PI)标记巨核细胞DNA,流式细胞术分析巨核细胞倍体分布和糖蛋白表达水平。结果对照、ITP和ST三组之间比较,骨髓巨核细胞绝对数量无差异(P>0.05)。富集后的骨髓标本,巨核细胞比例显著增高,可比富集前高17倍,而且DNA倍体(N)分布清晰,易于FCM分析设门和计算。与对照组比较,ITP患者巨核细胞DNA倍体分布未见明显改变,但CD41a表达量在2N、4N、8N、16N、32N、64N显著高于对照组(P<0.01);vWF表达量在各倍体巨核细胞均减低,32N时减低更显著(P<0.05);CD62P表达量在ITP组与对照和ST组间差异无显著性(P>0.05)。结论在ITP患者骨髓巨核细胞的分化发育过程中,其数量和DNA倍体增加未受影响,但其功能蛋白合成出现显著变化。在不同倍体巨核细胞中,CD41a表达显著增高;而vWF呈现表达下降趋势,尤其是高倍体(32N)时减低更为显著;P-选择素表达水平稳定。多色流式细胞术分析骨髓巨核细胞为ITP的发病机制及其相关研究提供了新手段。
- 张海燕屈晨雪王建中张晓辉付海霞汪润袁家颖
- 关键词：流式细胞术特发性血小板减少性紫癜巨核细胞GPIIB/IIIA
- UniCel DxH推染片一体机染色条件的设置及效果评价
- 目的:摸索UniCelDxH推染片一体机的最佳染色条件,并对染色效果进行评价。方法:通过改变瑞氏-吉姆萨复合染液的染色时间、染液配比等方法,摸索UniCel DxH推染片一体机的最佳染色方案以达到与手工染色相近的效果。然...
- 邢莹屈晨雪李智慧陆遥汪润王玎玲宋一楠朱鹰
- 关键词：白细胞分类计数
- 全自动数字图像分析在外周血细胞形态学检查中的性能评价及验证被引量：5
- 2022年
- 目的评价全自动数字图像分析(DIA)系统用于外周血细胞形态学分类计数的性能。方法选取北京大学第一医院血常规检验外周血涂片379份,疟原虫感染外周血涂片18份,经瑞氏-姬姆萨染色,通过DIA系统完成白细胞(WBC)预分类(DIA直接分类)、再分类(DIA分类后人工审核),以及人工直接显微镜分类。分别计算DIA系统的批内及批间变异系数(CV)进行重复性验证;以人工分类结果为金标准,计算DIA系统检测的灵敏度、特异度、正确率。并对其外周血原始细胞形态学计数、血小板(PLT)形态学计数及疟原虫形态学检查能力进行验证。结果除嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞外,DIA系统对正常样本WBC分类的CV均<10%,异常样本WBC分类的CV随所占百分比减低而增大;DIA系统进行WBC预分类的灵敏度、特异度和正确率分别为90.5%、99.2%和98.2%。触发原始细胞报警的血涂片经DIA系统预分类、再分类后,其结果均与人工分类结果具有相关性(r=0.812、0.983,均P<0.01)。DIA系统血小板形态学计数与血细胞分析仪计数结果具有相关性(r=0.946,P<0.01);两种方法计数血小板偏差绝对值<15%;血小板聚集及巨大血小板增多样本偏差绝对值均>15%。经DIA系统采集图像的18份疟原虫阳性外周血涂片,其中17份检出疟原虫滋养体,且图像清晰。结论DIA系统进行外周血分类计数的重复性较好,灵敏度、特异度和正确率较高;其预分类、再分类结果与人工分类结果具有相关性。
- 汪润杨明昱张静瑜苏惠青段洁米纪王美玲
- 关键词：白细胞血小板疟原虫属
- 流式细胞术计数淋巴细胞亚群的全血质控品的研究被引量：19
- 2005年
- 目的研究流式细胞术(FCM)计数血液淋巴细胞亚群的全血质控品。方法流式细胞术多色分析方法计数不同保存剂处理后、不同时间内血液中淋巴细胞亚群。结果成功研制出FCM计数血液淋巴细胞亚群的全血质控品。在2～8℃冰箱内保存72d内,各种白细胞的光散射特点及CD45保持稳定,淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞群与细胞碎片分离良好,可通过光散射或荧光/光散射两种方式设门分析淋巴细胞亚群。本质控品在不同保存时间的变异较小,FCM计数血液淋巴细胞亚群的室内批间变异系数<6.5%,全国56个实验室的室间质评变异系数<13%。结论本全血质控品可用于临床FCM计数血液淋巴细胞亚群全过程的室内质量控制和室间质量评价,对提高淋巴细胞亚群计数的质量,保证结果的准确性有重要意义。
- 王建中汪润袁家颖张传保申子瑜
- 关键词：淋巴细胞亚群流式细胞术计数光散射
- 利用微球捕获技术检测血小板微粒的方法建立及其评价
- 目的建立利用微球捕获技术检测血小板微粒（plateletderivedmicroparticles,PMP）的方法并对其进行初步的方法学评价。方法采用包被针对血小板膜糖蛋白IIIa（CD61）单克隆抗体的检测微球捕获PM...
- 李传保吴煦袁家颖汪润屈晨雪王建中
- 关键词：血小板微粒
- 文献传递
- UniCel DxH推染片一体机染色条件的设置及效果评价被引量：1
- 2015年
- 目的探索UniCel DxH推染片一体机的最佳染色条件,并对染色效果进行评价。方法通过改变瑞氏-吉姆萨复合染液的染色时间、染液配比等方法获取推染片一体机的最佳染色条件,在显微镜下观察并评价不同方法制备的血涂片的染色效果。结果延长缓冲液的染色时间可增强血涂片的着色效果,再在缓冲液中加入5%-10%的染液后可进一步提高血涂片的染色效率,且对于血细胞形态的识别可以达到手工制片染色的效果。结论在适宜的染色条件下,UniCel DxH制备的血涂片基本可以达到与手工染色相同的效果,对血细胞异常形态的识别较准确,各实验室应建立适宜的最佳染色方案。
- 邢莹屈晨雪陆遥汪润李智慧王玎玲宋一楠朱鹰
- 关键词：白细胞分类计数
- 西红柿汁体外抑制血小板聚集功能及其机制探讨被引量：2
- 2006年
- 目的:观察西红柿汁在体外对血小板聚集、血小板活化标志物的表达及对血小板纤维蛋白原结合量的影响,初步探讨西红柿汁对血小板聚集功能的影响机制。方法:将不同浓度的西红柿汁与正常人富血小板血浆(PRP)孵育,加入5-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)和胶原,观察西红柿汁对血小板聚集的影响。用ADP及胶原激活血小板,流式细胞仪(FCM)分析西红柿汁对活化血小板纤维蛋白原受体(Fib-R)和P-选择素(CD62P)的表达水平及血小板纤维蛋白原结合量的影响。结果:西红柿汁能够明显抑制由ADP、胶原诱导的血小板聚集,且随着西红柿汁浓度的增加,对血小板聚集的抑制率增高。西红柿汁不能抑制ADP、胶原诱导的血小板Fib-R、CD62P表达,但能显著抑制由ADP、胶原诱导的血小板与纤维蛋白原结合量。结论:西红柿汁在体外能够显著抑制血小板聚集,其抗血小板聚集的作用机制与阻碍纤维蛋白原与血小板Fib-R结合有关。西红柿汁具有潜在的抗血小板治疗前景。
- 王新华王建中屈晨雪吴煦袁家颖汪润
- 关键词：西红柿血小板聚集
- 流式微球技术检测血小板微粒的方法建立及其评价被引量：5
- 2005年
- 目的建立血小板微粒(plateletderivedmicroparticles,PMPs)的流式微球技术(cytometricbeadarray,CBA)检测方法并对其进行方法学评价。方法采用包被针对血小板膜糖蛋白Ⅲa(CD61)单克隆抗体的检测微球捕获PMPs,用CD41PE结合捕获的PMPs,利用流式细胞仪对微球PMPsCD41PE复合物进行检测。通过试验优化检测条件;并对方法的重复性和检测线性进行评价。对45例健康人PMPs水平进行检测。结果检测微球在4℃可以稳定保存90d以上,变异系数0.65%,基本可以满足临床检测的要求。应用CTAD抗凝管采集标本可以有效的抑制PMPs的体外释放;室温反应4h可以达到PMPs最大的结合;利用PBS洗涤可以去除检测微球对PMPs的非特异性吸附。该方法批内变异系数6.8%;批间变异系数10.4%,有较好的重复性;利用该方法检测血小板活化上清中的PMPs,在0～200μl之间有较好的线性(r=0.9962)。45例正常健康成人血液PMPs参考范围为1.031～1.766(相对荧光强度)。结论流式微球技术可以简便、快捷、准确地检测PMPs,对于临床出血、血栓性疾病的诊治具有重要意义。
- 李传保王建中吴煦袁家颖汪润张爱玉赵燕君屈晨雪王新华
- 关键词：流式微球技术血小板微粒
- 流式免疫微球芯片技术分析特异性血小板自身抗体被引量：5
- 2008年
- 目的建立流式免疫微球芯片技术（FCIBA）分析特异性血小板自身抗体的新方法。方法使用不同红色荧光强度的微球，包被不同血小板膜蛋白单克隆抗体（抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC单克隆抗体），制备特异性血小板自身抗体检测微球，用流式细胞仪检测微球捕获的血小板抗原-自身抗体复合物，检测结果与微孔板改进抗原捕获ELISA（MACE）进行比较，并检测了部分免疫性以及非免疫性血小板减少性紫癜患者血清中的5种特异性血小板自身抗体。结果FCIBA分析抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体，批内重复性变异系数（CV）分别为4．82％、6．09％、5．04％、5．73％、5．30％；稀释试验呈对数线性相关，相关系数（r）分别为0．9972．0．9966．0．9988．0．9965、0．9982；新方法对5种特异性血小板自身抗体的分析结果均与MACE试验结果高度相关，r值分别为0．9289、0．9224、0．8894、0．9100、0．9134（P均〈0．01）。新方法分析98例免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，血小板特异性自身抗体检出的阳性率为51．69％；其中，抗GPⅡb／Ⅲa为40．82％，抗GPⅠa／，Ⅱa为24．45％，抗GPⅣ为19．39％，抗GPⅠb／Ⅸ为32．65％，抗HLA-ABC为17．35％。新方法分析40例非免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，阳性率为0。结论本研究建立了FCIBA分析特异性血小板自身抗体的新方法，可同时分析抗血小板GPⅡb／Ⅲa、GPⅠa／，Ⅱa、GPⅣ、GPⅠb／Ⅸ和HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体。
- 吴煦王建中李传保屈晨雪袁家颖汪润王新华赵燕君张爱玉
- 关键词：血小板减少性紫癜血小板膜糖蛋白类蛋白质阵列分析
- 部分蔬菜抗血小板聚集功能及其作用机制的初步研究被引量：4
- 2008年
- 目的对部分具有抗血小板聚集功能蔬菜的作用机制进行初步探讨。方法将不同种类的蔬菜汁（以西红柿汁作为阳性对照）分别与正常人富血小板血浆（PRP）孵育，加入血小板聚集诱导剂，观察各种蔬菜汁对血小板聚集的影响；用诱导剂激活血小板，流式细胞仪分析蔬菜汁对活化血小板纤维蛋白原受体（Fib-R）和P-选择素（CD62P）的表达水平及血小板纤维蛋白原结合量的影响；利用动物试验对血小板抑制作用进行体内验证，普通白兔随机分为5组，分别定量饲以生理盐水、熟西红柿汁、蒜黄汁、大白菜汁及菠菜汁，观察不同时间后血小板聚集情况。结果在花生四烯酸（AA）诱导下，未发现熟蔬菜汁有明显抑制体外人血小板聚集的作用，但在二磷酸腺苷（ADP）、胶原或肾上腺素诱导下，熟蒜黄汁、大白菜汁、菠菜汁能够明显抑制血小板聚集，并且随着蔬菜汁浓度的增加，对血小板聚集的抑制率增高。熟蒜黄汁、大白菜汁、菠菜汁不能抑制ADP、胶原或肾上腺素诱导的血小板Fib-R、CD62P表达，但能够显著抑制由ADP或胶原诱导的血小板与纤维蛋白原结合量。普通白兔在饲以熟大白菜汁、蒜黄汁、菠菜汁后，ADP诱导的兔血小板聚集率分别在第3、5、8周末时开始降低，熟大白菜汁喂养组血小板聚集的抑制率在第3、5、8周末分别为：45．7％、53．6％、48．5％，熟蒜黄汁喂养组分别为：10．7％、66．7％、46．3％，熟菠菜汁喂养组分别为：8．7％、21．0％、42．6％；饲以熟大白菜汁、蒜黄汁后，胶原诱导的兔血小板聚集率分别在第5、8周末时开始降低，熟大白菜汁喂养组血小板聚集的抑制率在第5、8周末分别为：54．9％、56．3％，熟蒜黄汁喂养组分别为：28．4％、86．7％。在8周内，熟西红柿汁对兔血小板未产生抗聚集作用。结论在ADP或胶原诱导下，熟蒜
- 王新华王建中屈晨雪吴煦袁家颖汪润张爱玉赵燕君
- 关键词：血小板聚集蔬菜体外研究动物实验
