王海娟
- 作品数：33 被引量：91H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MTA1及其抑制剂的制药用途
- 本发明涉及MTA1及其抑制剂的制药用途。具体而言，本发明发现了MTA1维持干细胞干性及促进肿瘤干细胞的行为，并且可以是以肿瘤干细胞为靶点的肿瘤治疗策略的分子靶点。MTA1可以用于制备维持干细胞干性的制剂，而MTA1的抑制...
- 钱海利林晨刘健詹启敏王海娟
- 文献传递
- 一种预测乳腺癌对曲妥珠单抗联合化疗治疗敏感性的生物标志物
- 本发明公开了一种预测乳腺癌对曲妥珠单抗联合化疗治疗敏感性的生物标志物，具体的涉及预测HER2阳性乳腺癌患者对曲妥珠单抗靶向治疗联合化疗治疗敏感性的TRBV7‑7生物标志物，本发明通过高通量二代测序方法，对曲妥珠单抗联合化...
- 徐兵河马飞樊英王海娟王文娜易宗毕
- 文献传递
- 肿瘤转移相关基因1在食管癌细胞上皮间质转化过程中的促进作用被引量：6
- 2015年
- 目的 探讨肿瘤转移相关基因1(MTA1)对食管癌细胞上皮间质化(EMT)过程的影响及分子机制.方法 采用慢病毒感染方法建立MTA1敲降的食管癌细胞系LV3-shMTA1-KYSE410及MTA1过表达的食管癌细胞系LV5-MTA1-KYSE450;通过Western Blot方法检测上述食管癌细胞系中MTA1蛋白及EMT相关蛋白的表达水平;进而采用免疫荧光实验检测上述食管癌细胞系中EMT相关蛋白分子标志物E-cadherin和Vimentin的定位以及表达水平的变化;最后应用划痕实验明确MTA1表达水平改变后对食管癌细胞迁移能力的影响.结果 食管癌KYSE450细胞系过表达MTA1后,EMT相关蛋白标志物中的E-cadherin表达水平降低而Vimentin表达水平升高,迁移能力增强,细胞迁移率为0.91±0.00,对照组为0.23±0.04;食管癌KYSE410细胞系敲降MTA1后,E-cadherin表达水平升高而Vimentin 表达水平降低,迁移能力降低,细胞迁移率为0.19±0.01,对照组为0.53±0.01,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 MTA1过表达可促进食管癌细胞的间质化、提高食管癌细胞的迁移能力.
- 刘欢王海娟李春晓李慧林晨钱海利
- 关键词：MTA1食管癌
- 一种预测乳腺癌对曲妥珠单抗联合化疗治疗敏感性的生物标志物
- 本发明公开了一种预测乳腺癌对曲妥珠单抗联合化疗治疗敏感性的生物标志物，具体的涉及预测HER2阳性乳腺癌患者对曲妥珠单抗靶向治疗联合化疗治疗敏感性的TRBV7‑7生物标志物，本发明通过高通量二代测序方法，对曲妥珠单抗联合化...
- 徐兵河马飞樊英王海娟王文娜易宗毕
- 文献传递
- Ad-PUMA用于肿瘤基因治疗的可行性研究
- 恶性肿瘤严重威胁人类健康，亟需发展多种治疗方法改善肿瘤的预后。PUMA(p53up-regulatedmodulatorofapoptosis)是2001年报道发现的具有快速强大促凋亡作用的p53下游基因。本研究旨在探讨...
- 王海娟
- 关键词：肿瘤基因治疗腺病毒化疗药物
- 文献传递
- MTA1转基因小鼠的构建及鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的将人的MTA1外源基因整合到C57BL/6J小鼠中,构建稳定高表达MTA1的小鼠模型。方法通过RT-PCR方法克隆人的MTA1编码序列,将MTA1插入真核表达载体pcDNA3.1构建pcDNA3.1-MTA1载体,回收片段后利用显微注射技术将目的基因片段注入到受精卵的雄原核中,使用MTA1特异性的引物经PCR鉴定出基因型阳性的转基因小鼠,再利用Western-blot及免疫组化方法检测MTA1在转基因小鼠全身级织表达情况。结果成功构建了MTA1转基因注射片段。在320枚显微注射受精卵中挑选出300枚存活卵移植到10只ICR小鼠假孕受体的输卵管中,10只ICR小鼠均怀孕,移植成功率为100%,共生出子代鼠80只,经PCR检测其中共有9只整合了MTA1基因,整合率为11.25%。经PCR鉴定MTA1整合阳性的F1代小鼠,再经Western-blot和免疫组化分析检测MTA1表达水平在脑、肺、肝、肠等组织中表达明显增高,肾、骨骼肌表达无差异。结论成功构建了脑、肝、肺、结肠高表达MTA1的转基因小鼠,为进一步MTA1研究奠定了良好的研究模型。
- 薛洪省王海娟刘健张丽林晨詹启敏赵志龙钱海利
- 关键词：MTA1转基因
- In Situ PLA技术原位分析MTA1与NuRD复合体其他组分的相互作用
- 2014年
- 目的原位检测肿瘤转移相关蛋白MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用并分析MTA1/NuRD复合体在HCT116细胞中的分布情况。方法首先利用co-IP技术体外验证MTA1与NuRD复合体其他组分Mi2、HDAC2及MBD3在HCT116细胞裂解液中的相互作用。然后利用In Situ PLA技术,体内原位检测MTA1与三者的相互作用,并根据镜下阳性荧光信号数目,比较MTA1与Mi2、HDAC2及MBD3之间的作用强弱;根据相互作用位点的亚细胞分布情况,分析间期及M期MTA1/NuRD复合体的核质分布情况。结果首次从体内原位水平证实MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用;其作用强度HDAC2最高,Mi2次之,MBD3最弱;首次发现MTA1/NuRD复合体存在很明显的胞质分布(约占总量的1/4);另外,我们还首次发现在M期MTA1/NuRD复合体不再位于核区,而是位于染色体外周。结论In Situ PLA技术是一项有效的原位检测蛋白相互作用的新技术;MTA1/NuRD复合体可能参与MTA1胞质中功能的发挥;并且其胞质分布可能参与M期进程调控。
- 刘健王海娟刘群李春晓刘欢黄骁舾孟希亭赵枚林晨黄常志钱海利
- 关键词：MTA1相互作用SITU
- 盐酸埃克替尼与多西他赛、培美曲塞不同联合方式对非小细胞肺癌PC-9细胞系作用的实验研究被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨盐酸埃克替尼以不同次序联合多西他赛、培美曲塞对非小细胞肺癌细胞系PC-9的作用。方法:运用xCELLigence系统检验多西他赛、培美曲塞、盐酸埃克替尼单药作用于PC-9细胞系的半数抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC50),用流式细胞仪检测埃克替尼与多西他赛/培美曲塞联合的不同组合方式对PC-9细胞系的细胞周期影响及凋亡。结果:1埃克替尼对PC-9细胞作用60 h后的IC50值为5.3μM;多西他赛对PC-9细胞作用36 h后的IC50为21.5 mg·m L-1;培美曲塞对PC-9细胞作用36 h后的IC50为30μM。2Annexin V-FITC凋亡实验观察到化疗药先于埃克替尼应用对靶细胞的体外杀伤作用均明显高于其他各组,先用多西他赛组细胞凋亡率为(23±0.2)%,高于先用埃克替尼组(10.2±0.1)%和两药同时用药组(15.8±0.4)%;先用培美曲塞组细胞凋亡率为(36.3±0.03)%,高于先用埃克替尼组(14.7±0.1)%和两药同时用药组(30.6±0.03)%,差异有统计学意义(P<0.05)。3流式细胞仪周期检测结果显示埃克替尼先于多西他赛(或培美曲塞)用药或两药同时应用时PC-9细胞G0/G1期比例比多西他赛(或培美曲塞)先于埃克替尼用药组高。结论:多西他赛、培美曲塞先于埃克替尼应用方案对肿瘤细胞杀伤作用优于晚用埃克替尼或同时应用埃克替尼。
- 郭磊王键玮李爱洁汪进良刘欢李春晓王海娟钱海利胡毅
- 关键词：埃克替尼多西他赛培美曲塞肺癌
- 干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞的生物学特性被引量：4
- 2012年
- 目的探讨干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞的相关蛋白表达及生物学特性。方法用干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞,Western blot检测干细胞相关蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期;同时检测干细胞增殖、黏附、耐药及侵袭能力,并摸索结肠癌干细胞最佳冻存条件。结果用干细胞培养基成球培养法成功培养出了结肠癌细胞球,检测发现干细胞相关蛋白表达增强,静止期细胞比例明显升高,细胞增殖速度慢,黏附性、耐药性、侵袭性均强于亲本细胞。结论干细胞培养基成球培养法筛选的细胞球中富集了肿瘤干细胞,为结肠癌干细胞的研究提供了良好的细胞模型。
- 杨东张金龙黄轶轩栾青春刘健孟希亭王海娟钱海利李贵新林晨
- 关键词：结肠癌干细胞黏附性耐药性
- 多西他赛、培美曲塞联合盐酸埃克替尼不同序贯用药时序及选择合理用药时机对非小细胞肺癌细胞的体外抑制作用被引量：5
- 2015年
- 目的:探讨盐酸埃克替尼联合化疗药(多西他赛、培美曲塞)以不同次序序贯及选择合理用药时机用药对非小细胞肺癌细胞系GLC-82的作用。方法:运用x CELLigence系统检测多西他赛、培美曲塞、盐酸埃克替尼单药作用GLC-82的IC50,及单药在GLC-82细胞内的时间依赖性IC50,并检测盐酸埃克替尼不同次序联合多西他赛、培美曲塞对GLC-82的增殖毒性,用流式细胞仪检测埃克替尼与二者联合的不同次序对GLC-82细胞的细胞周期影响。结果:多西他赛、培美曲塞在作用36 h后在细胞内达到平衡期,而埃克替尼在作用60 h后在细胞内达到平衡期。多西他赛作用于GLC-82细胞系36 h的IC50为25 mg·m L-1,培美曲塞作用于GLC-82细胞系36 h的IC50为560μmol·L-1,埃克替尼作用于GLC-82细胞系60 h的IC50为10μmo·L-1。先用多西他赛或培美曲塞后用埃克替尼方案与其他用药方案相比,细胞倍增时间显著增加:D-I组倍增时间为(–829.1±46.9)h;P-I组倍增时间为(–342.0±3.4)h,与其他序贯联合方式相比,差异有统计学意义(P<0.05);并可使细胞阻滞在G2/M期(培美曲塞阻滞在S期),细胞生长抑制效果更好(P<0.05)。结论:先于埃克替尼使用多西他赛或培美曲塞,并且选择合理的用药时机为体外抑制NSCLC细胞增殖的最佳联用方案。
- 郭磊汪进良钱海利王海娟胡毅
- 关键词：埃克替尼多西他赛培美曲塞序贯用药
