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一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统及方法和应用: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统及方法和应用。一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统，其特征在于该系统包括：1）3’-核苷酸酶核苷酸序列和蛋白超表达载体；2）加...; 孙梅好杨依林杨洋王艳兴李鸿艳马建辉; 文献传递

干旱胁迫对水稻形态及光合特性的影响被引量：4: 2009年; [目的]研究干旱胁迫对水稻形态及光合特性的影响。[方法]以水稻品种IR64和Azucena为试验材料,用15%PEG6000模拟干旱,胁迫7 d后,测定水稻植株的形态和生理指标。[结果]干旱胁迫下,水稻幼苗根长增加,株高降低;根冠比增大;不定根生长受抑制,主根上侧根数增多;IR64具有更高的生物量积累,保持了相对较高的光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率。[结论]IR64比Azucena具有更好的抗旱性。; 孙娜封雷王涛王艳兴杨玲; 关键词：水稻干旱胁迫光合特性抗旱性

球形红细菌硫酸盐活化酶复合体底物通道机理研究: 硫是生命活动的必需元素之一,哺乳动物可直接吸收利用来自食物的硫,而植物和微生物则主要通过吸收周围环境中的硫酸盐,作为体内硫元素的主要来源。ATP硫酸化酶(ATP sulfurylase,ATPS)催化的硫酸盐与ATP反应...; 王艳兴; 关键词：球形红细菌

一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统及方法和应用: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统及方法和应用。一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统，其特征在于该系统包括：1）3’-核苷酸酶核苷酸序列和蛋白超表达载体；2）加...; 孙梅好杨依林杨洋王艳兴李鸿艳马建辉; 文献传递

硫酸盐活化复合体的分类及其功能被引量：4: 2011年; 硫酸盐进入细胞内活化的第一步是ATP硫酸化酶(ATP sulfurylase,ATPS)催化硫酸盐与ATP反应生成腺苷-5’-磷酰硫酸(adenosine 5’-phosphosulfate,APS)和焦磷酸,此反应非常不易进行。研究发现某些ATPS可与硫酸盐同化代谢相关酶组成硫酸盐活化复合体(sulfate activating complex,SAC)而促进硫的同化。本文介绍了目前已发现的三类SAC:GTPase型SAC(GTPase type SAC)、APSK型SAC(APSK type SAC)和APSR型SAC(APSR type SAC),并对其促进APS合成的方式及目前的研究热点进行了讨论。; 王艳兴杨玲孙梅好; 关键词：硫酸盐 ATP硫酸化酶

大肠杆菌Ⅱ型丙酮酸激酶的纯化分析及其作为偶联酶的应用被引量：4: 2013年; 目的:分析大肠杆菌Ⅱ型丙酮酸激酶(pyruvate kinase Ⅱ,PKⅡ)的酶学特性及其作为偶联酶的可行性。方法:PCR法从大肠杆菌基因组克隆pkⅡ,构建入原核表达载体pSKB4,经IPTG诱导表达、纯化获得PKⅡ。利用乳酸脱氢酶偶联法分析其催化ADP、GDP、UDP、CDP磷酸化的能力以及不同pH、温度对其活性的影响,并利用PKⅡ作为偶联酶对球形红细菌硫酸盐活化复合体(sulfate activating complex,SAC)及其突变体进行了活性分析。结果:原核表达、纯化、分析大肠杆菌PKⅡ,发现其对ADP、GDP、UDP的催化效率与兔肌肉PK类似,且由大到小分别为:A>G>C>U;而对CDP的催化效率为兔肌肉PK的6倍。PKⅡ的最适pH为7.0,在20～50℃范围内活性稳定,且18个月的-80℃低温及24 hr的室温存放基本不影响其活性。PKII的高催化效率以及稳定性表明其可作为偶联酶进行NDP的测定。利用PKⅡ作为偶联酶对球形红细菌SAC及其突变体的活性测定表明S410和K409参与了5'-腺苷磷酰硫酸的磷酸化。; 李鸿艳周思甜马建辉王艳兴孙梅好; 关键词：丙酮酸激酶大肠杆菌球形红细菌

球形红细菌耐硒胁迫的机理初探: <正>球形红细菌,一种在自然界中广泛分布的紫色非硫光合细菌,具有较强耐受硒酸盐胁迫的能力.硒的细胞毒害作用主要是通过以硫的类似物进入细胞代谢,从而影响细胞的生长发育,而代谢过程中产生的过氧化物同样可引起毒害作用.最近的研...; 孙梅好王艳兴马建辉

球形红细菌无机焦磷酸酶的原核表达、纯化及初步分析被引量：2: 2013年; 无机焦磷酸酶(inorganic pyrophosphatase,PPase)水解在许多生物大分子的生物合成过程中产生焦磷酸并释放能量,形成的热力学拉力可促进合成反应的进行。球形红细菌(Rhodobacter sphaeroides 2.4.1)无机焦磷酸酶(RsPPase)属于II型可溶性焦磷酸酶,钴离子对于其活性的维持具有重要的功能,而其活性调控及其表达对细菌生长的影响尚未报道。研究克隆、原核表达纯化RsPPase。结果发现,钴离子会导致谷胱甘肽S-转移酶(glutathione sulfotransferase,GST)标签不能进行蛋白酶切,且融合蛋白GST-PPase水解焦磷酸的催化效率较低(Km/kcat=2.0×104mol(/L.s));在球形红细菌胞内表达大肠杆菌焦磷酸酶(Km/kcat=5.5×107mol/(L.s))没有影响细菌的生长,暗示球形红细菌胞内PPase活性足够高。通过对其结构的模拟推测,在钴离子存在的情况下为闭合构象,GST标签的存在可能影响PPase羧基端结构域的运动,而影响其结合底物和释放产物的能力;在钴离子不存在的情况下为开放构象,GST标签具有较大的自由度,可暴露蛋白酶识别位点酶切产生无标签RsPPase。; 黄园波王艳兴戴梦瑶马建辉孙梅好; 关键词：球形红细菌无机焦磷酸酶原核表达

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王艳兴