詹媛
- 作品数：36 被引量：33H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 鸡高迁移率蛋白1双抗体夹心ELISA方法的建立
- 2018年
- 为建立鸡高迁移率族蛋白1(chHMGB1)蛋白酶联免疫定量分析方法,本研究原核表达重组ch HMGB1蛋白(rchHMGB1)。以纯化的rchHMGB1作为免疫原分别免疫BABL/c小鼠和新西兰大白兔以分别制备针对rchHMGB1的鼠单克隆抗体(MAb)和兔多克隆抗体(PAb),并对兔PAb进行辣根过氧化物酶(HRP)标记。以鼠抗rchHMGB1 MAb做为包被抗体,HRP标记兔PAb为检测抗体,建立了定量测定rchHMGB1的双抗体夹心ELISA方法。对该方法进行了特异性、检测限和稳定性等试验。结果显示,包被抗体和检测抗体的最佳工作浓度均为1∶500稀释,抗原浓度在72.5 ng/mL^75μg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数R2>0.99。该方法可以特异性检测rchHMGB1,最低检测限为36.25 ng/mL,连续6 d检测抗原绘制的标准曲线稳定性良好。本实验建立的rchHMGB1双抗体夹心ELISA方法,灵敏度较高,重复性好,为进一步研究chHMGB1在疾病感染过程中发挥的病理学机制奠定基础。
- 曲昱蓉詹媛仇旭升丁铲
- 关键词：单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 新城疫病毒在感染早期通过Akt/mTOR/4E-BP1和p38/Erk/Mnk1通路激活宿主真核翻译起始因子eIF4E的研究被引量：2
- 2015年
- 为阐明新城疫病毒(NDV)在感染宿主细胞后对宿主真核翻译起始因子以及相关调控通路的调节作用,本实验采用western blot检测NDV感染He La细胞早期真核翻译起始因子e IF4F的磷酸化水平以及Akt/m TOR/4E-BP1和p38/Erk/Mnk1调控通路的活化情况,同时用紫外线(UV)灭活的NDV进行对照试验。结果显示,NDV感染He La早期能够迅速诱导真核起始因子e IF4E的磷酸化,而UV灭活NDV作用的细胞则无此现象。通过对相关调控通路的检测发现,NDV在感染早期对e IF4E的磷酸化是通过激活p38/Erk/Mnk1通路实现的。此外,NDV感染还可以激活Akt/m TOR/4E-BP1通路,诱导e IF4E阻遏蛋白4E-BP1发生磷酸化并解离出e IF4E,从而促进e IF4F复合体的形成,确保真核翻译的进行。该结果对深入解析NDV与宿主之间的相互作用以及翻译相关信号通路参与调控病毒复制的机制具有重要意义。
- 詹媛仇旭升曲昱蓉孙英杰谭磊宋翠萍丁铲
- 关键词：新城疫病毒EIF4E
- 新城疫病毒在感染早期通过Akt/mTOR/4E-BP1和p38/Erk/Mnk1通路激活宿主真核翻译起始因子eIF4E的研究
- 引言新城疫(NewcastleDisease,ND)是由新城疫病毒(NDV)强毒株引起的一种急性、烈性、高度接触传染性禽传染病,严重危害世界养禽业的健康发展。目前已有报道表明,NDV感染可以激活Akt、mTOR以及p70...
- 詹媛仇旭升曲昱蓉孙英杰谭磊宋翠萍丁铲
- 文献传递
- 新城疫病毒M基因片段的表达纯化及其多克隆抗体的制备
- 2017年
- M蛋白是新城疫病毒(NDV)的一个多功能结构蛋白。为了制备针对M蛋白的多克隆抗体,本研究通过克隆M蛋白部分基因片段至原核表达载体,重组蛋白在大肠杆菌中表达后进行了纯化。免疫新西兰大白兔获得血清并纯化后得到抗M蛋白多克隆抗体。Western-blot分析结果显示,该抗体具有良好的特异性。本试验成功制备的抗M蛋白多克隆抗体,为进一步研究M蛋白的生物学功能奠定了良好的基础。
- 曲永星王新詹媛茅翔丁铲唐兆新
- 关键词：新城疫病毒原核表达M蛋白多克隆抗体
- ClassⅠ新城疫病毒强毒株融合蛋白的表达时相分析被引量：1
- 2010年
- 根据ClassⅠ新城疫病毒分离株9a5b编码序列,设计特异性引物扩增融合蛋白(F)基因截短片段(199～1 500 nt),利用原核表达获得重组蛋白,切胶免疫Balb/c小鼠,制备特异性多抗血清,利用制得的血清进行F蛋白表达时相分析。结果表明:NDV 9a5b病毒按5M.O.I(multiplicity of infection,多重感染复数)感染量接种DF1单层细胞,经IFA检测,在感染6 h时,F蛋白开始出现,主要分布于细胞浆内;12～16 h胞浆中的F蛋白含量逐渐增多,形成包涵体,开始在细胞膜上分布;当病毒感染24h后,F蛋白在细胞膜上形成明显的膜周染色;至感染36h后,出现多个细胞融合的包涵体,细胞已基本崩解。此时,F蛋白也散在分布于包涵体中。这为深入开展F蛋白与该病毒的毒力演化机制研究工作奠定了基础。
- 孙英杰陈鸿军仇旭升詹媛于洋宋翠萍于圣青丁铲
- 关键词：CLASSI融合蛋白
- 新城疫classI强毒株9a5b-D5C1的拯救
- 新城疫（Newcastle Disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle Disease Virus,NDV）引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,严重危害世界养禽业,已造成了巨大的经济损失。目前已报道的大...
- 仇旭升于洋徐丹韦娜娜詹媛孟春春陈鸿军于圣青丁铲
- 关键词：新城疫病毒
- 文献传递
- 新城疫病毒CLASS Ⅰ强毒株磷蛋白的表达及细胞内定位
- 根据Class Ⅰ新城疫病毒分离株9a Sb编码序列设计特异性引物扩增P基因，原核表达后利用纯化的蛋白免疫Balb／c小鼠制备单克隆抗体，经二次亚克隆后筛选到4株针对P蛋白的单克隆抗体，利用所得单抗进行P蛋白在细胞内定位...
- 孙英杰陈鸿军詹媛仇旭升于洋宋翠萍于圣青丁铲
- 关键词：新城疫病毒磷蛋白细胞内定位蛋白表达
- 新城疫病毒基因型差异性单克隆抗体的制备及鉴定
- 2015年
- 目前新城疫病毒(NDV)弱毒株的混杂对禽病实验室病原诊断工作造成很大困扰,NDV强弱毒株以及基因型的快速鉴别是亟待解决的重要问题。研究选用一株与疫苗株La Sota存在显著抗原性差异的强毒株PI/CHINA/SD/2012/167制备油乳剂疫苗免疫小鼠制备单克隆抗体。采用间接ELISA检测抗体对该强毒株及La Sota株的反应性,筛选广谱型和强弱毒株差异型的单克隆抗体,最终获得2株存在基因型差异的单克隆抗体。其中,3F10株不与ClassⅠ以及ClassⅡ基因Ⅰ型毒株反应,而与其他毒株都有很好的反应性,而7E11株不仅与ClassⅠ以及ClassⅡ基因Ⅰ型毒株反应性弱,而且与La Sota株和Mukteswar株的反应性也远远低于ClassⅠ基因Ⅵ、Ⅶ和Ⅸ型的强毒株。为了确定两株克隆抗体靶向的病毒蛋白,构建了NDV蛋白真核表达质粒转染DF1细胞,并利用Western blot和间接免疫荧光试验进行检测。结果显示,3F10针对NDV M蛋白,而7E11针对NDV F蛋白。两株单克隆抗体与NDV不同基因型毒株反应的差异性为NDV的鉴别诊断技术研究奠定了基础。
- 任亭亭李仕超詹媛孟春春孙英杰宋翠萍谭磊封振仇旭升丁铲
- 关键词：新城疫病毒单克隆抗体
- 外泌体在免疫学和病毒感染中的研究及应用
- 外泌体(Exosome,Exo)是细胞向胞外分泌的一种囊泡,直径30～100nm,其主要通过一系列复杂的形成机制和步骤产生,所有的细胞都可以向外分泌Exo,因此Exo也会出现在各种体液中,Exo可以选择性地携带不同的蛋白...
- 张玉嫱谭磊詹媛丁铲
- 关键词：免疫肿瘤病毒
- 新城疫基因型差异性单克隆抗体的制备及鉴定
- 目前,NDV弱毒株的混杂对禽病实验室病原诊断工作造成很大困扰。因此,NDV强弱毒株以及基因型的快速鉴别技术是目前亟待解决的重要问题。本研究利用一株与疫苗株La Sota存在显著的抗原性差异的强毒株PI/CHINA/SD/...
- 任亭亭李仕超詹媛孟春春孙英杰宋翠萍谭磊封振仇旭升丁铲
- 关键词：新城疫病毒单抗
- 文献传递
