郑波
- 作品数：13 被引量：71H指数：6
- 供职机构：同济医科大学实验医学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 氯化汞与大鼠脑突触体膜的相互作用
- 1992年
- 应用荧光探剂ANS,研究了氯化汞与大鼠脑突触体膜的相互作用。结果发现,氯化汞增强膜ANS复合物荧光强度。双倒数及Scatchard作图分析表明,其使膜-ANS复合物荧光强度增强的原因并非ANS荧光量子产率的改变,而是增加了突触体膜对ANS的结合容量和亲和力,亦即降低了膜表面负电荷密度。这一效应与其对膜流动性的影响是一致的。
- 朱砂郑波周哲刘毓谷
- 关键词：氯化汞突触体
- 螨胺磷在大鼠体内的代谢动力学研究被引量：3
- 1999年
- 运用高效液相色谱法，研究了静脉注射时，螨胺磷在大鼠体内的代谢动力学特征、组织分布及排泄途径，并初步分离了胆汁中的代谢产物。结果显示：螨胺磷在体内全身分布，并有周室富集，消除较快，在１０ｍｇ／ｋｇ静脉注射呈二室模型，ｔ１／２α为３．４０ｍｉｎ，ｔ１／２β为５９．０３ｍｉｎ，全身清除率Ｃｌ（ｓ）０．０１８ｍｌ·ｍｉｎ－１；螨胺磷主要分布于血流量大的器官及脂肪组织；螨胺磷在体内不稳定，能被肝脏代谢转化成极性更高的化合物后经由胆汁排出，该成分可在同样的色谱条件下被分离，峰保留时间４．２５ｍｉｎ；
- 郑波李龙石年宋瑞琨
- 关键词：有机磷农药毒代动力学高效液相色谱
- 百日咳杆菌毒素S_1亚单位与谷胱甘肽S-转移酶融合基因在大肠杆菌中表达及其一步纯化被引量：2
- 1999年
- 研究了百日咳杆菌毒素Ｓ１亚单位与谷胱甘肽Ｓ－转移酶融合蛋白（ＧＳＴ－Ｓ１）在大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中的表达，并一步纯化了重组ＧＳＴ－Ｓ１。首先用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增出长度为５６０ｂｐ的编码百日咳毒素Ｓ１亚单位的ＤＮＡ片段。该片段比原编码Ｓ１蛋白的ＤＮＡ片段在其３′端缺失了１３８个碱基，将其按正确的阅读框克隆入质粒ｐＧＥＸ中ＧＳＴ基因的３′端，构成ＧＳＴ－Ｓ１融合基因表达载体ｐＧＥＸ－Ｓ１。经异丙基硫代－β－Ｄ－半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导表达和十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），可见所表达的ＧＳＴ－Ｓ１融合蛋白存在于细菌上清，为可溶性蛋白。分子量为４９ｋｕ处有明显的蛋白表达带。用谷胱甘肽（ＧＳＨ）亲和层析系统，一步纯化出ＧＳＴ－Ｓ１融合蛋白。最后经凝血酶的消化，得到２３ｋｕ的重组百日咳杆菌毒素Ｓ１亚单位蛋白。
- 郑波程继忠皇甫永穆海涛海涛戴五星
- 关键词：疫苗
- 重组BCG疫苗和结核杆菌HSP65 DNA疫苗免疫原性的比较研究被引量：6
- 2000年
- 目的 研究重组BCG(recombinantBCG ,rBCG)疫苗和人结核杆菌热休克蛋白 (heatshockprotein ,HSP) 6 5DNA疫苗对小鼠免疫应答的影响 ,评价两种疫苗的免疫原性。方法 用rBCG疫苗和HSP6 5DNA疫苗免疫BALB/c小鼠 ,免疫 8周时 ,采血、取腹腔巨噬细胞和脾脏进行实验。以NO释放量检测巨噬细胞吞噬活性 ,以淋巴细胞刺激指数 (SI)反映细胞增殖能力 ,以ELISA试剂盒检测血清及脾淋巴细胞培养上清的IL 2和IFN γ的含量。结果 rBCG疫苗以 10 6CFU/鼠的剂量经皮下免疫小鼠后 ,其脾淋巴细胞的增殖能力明显高于对照组 ,BCG组和HSP6 5DNA疫苗组 (P <0 .0 5 ) ;腹腔巨噬细胞一氧化氮 (NO)的含量和血清IL 2的含量明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;血清IFN γ的含量明显高于HSP6 5DNA疫苗组 (P <0 .0 5 ) ;其余测定参数均有升高趋势 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。而HSP6 5DNA疫苗以 5 0 μg/鼠的剂量经肌注免疫小鼠后 ,其血清IL 2的含量明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;血清IFN γ的含量明显低于rBCG组 (P <0 .0 5 ) ;其余测定参数与其他各组相比差异均无显著性(P >0 .0 5 )。结论 本实验结果显示 ,rBCG疫苗具有良好的免疫原性 ,能明显增强BALB/c小鼠的免疫应答反应。HSP6 5DNA疫苗亦能刺激机体的免疫应答 。
- 戴五星郑波皇甫永穆黄翠华黄海浪
- 关键词：重组BCG疫苗免疫原性
- 结核杆菌HSP70在耻垢分枝杆菌中的表达及其免疫原性研究被引量：22
- 1998年
- 目的在重组分枝杆菌中表达编码人结核杆菌（ＴＢ）热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）的ＤｎａＫ基因，并观察其对小鼠的免疫效应。方法采用基因工程和免疫学技术将ＤｎａＫ基因及其两侧的表达调控区一起从质粒ｐＭＴ－７０中切出，经末端修饰后装入大肠杆菌－分枝杆菌穿梭质粒ｐＢＣＧ－２０００中，构建成新的重组质粒ｐＢＣＧ－ＴＢ７０，并用以转化耻垢分枝杆菌及大肠杆菌，用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达的ＨＳＰ７０；以重组耻垢分枝杆菌分别经皮下及腹腔免疫小鼠，用淋巴细胞刺激指数（ＳＩ）反映细胞增殖能力，以ＮＯ法检测巨噬细胞吞噬活性，并检测血清中特异性抗ＴＢＨＳＰ７０的抗体。结果ＴＢＨＳＰ７０能在分枝杆菌中表达，表达量占菌体总蛋白量的１０％，不能在大肠杆菌中表达；重组耻垢分枝杆菌以１０６ＣＦＵ的剂量经皮下免疫小鼠后，可使小鼠脾淋巴细胞刺激指数（ＳＩ）和腹腔巨噬细胞吞噬活性增高（Ｐ＜０．０５），并能刺激机体产生特异性抗ＴＢＨＳＰ７０的抗体，腹腔免疫激发的抗体滴度较皮下免疫为低，而ＳＩ无明显改变。结论构建的表达质粒ｐＢＣＧ－ＴＢ７０能在耻垢分枝杆菌中表达ＨＳＰ７０，该重组菌具有较强的免疫原性。
- 程继忠郑波肖红梁驹卿皇甫永穆
- 关键词：结核分枝杆菌基因转移免疫原性
- 日本血吸虫基因工程BCG多价疫苗的研究被引量：9
- 1998年
- 用日本血吸虫（Sj）成虫提取的总RNA逆转录合成CDNA第一链，并设计合成引物，经PCR扩增，扩增出26kDa的编码区基因，并进行了测序，结果表明Sj中国大陆株（SjC）、Sj菲律宾株（SjP）26kDaGST基因核苷酸同源性99．8％．然后，构建了大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG－Sj26Ⅰ-Ⅳ．再将其依次分别转化大肠杆菌、耻垢分枝杆菌和BCG中，筛选出重组耻垢分枝杆菌疫苗和重组BCG多价疫苗．经SDS－PAGE和薄层扫描分析表明，Sj26kDaGST的表达效率在大肠杆菌、耻垢分校杆菌和BCG中分别占菌体总蛋白的25％-37％、10％－28％、10％－15％．通过酶切图谱、PCR技术和Westernblot分析，证实构建的Sj26kDa基因工程BCG多价疫苗是成功的．用其免疫BABL／c小鼠，结果表明它对日本血吸虫的感染有明显的预防作用，重组BCG多价疫苗的减虫率达27．36％（t=3．42，P＜0．01），减卵率达60．50％（t=6．19，P＜0．01）．实验组虫卵肉芽肿平均面积以及免疫后血清抗体水平与对照组相比其差别具有显著意义．该研究为日本血吸虫成虫疫苗的研究提供了一条新的途径．
- 石佑恩韩家俊李文桂石星李传明邓伟文皇甫永穆郑波程继忠冯作化梁驹卿肖红路艳艳曾星海涛
- 关键词：日本血吸虫病基因工程
- 氯化汞的肝细胞毒性与脂质过氧化被引量：3
- 1993年
- 本文研究了氯化汞对大鼠游离肝细胞的毒性及其与膜脂质过氧化和细胞内巯基含量的关系。结果显示,氯化汞具有明显的肝细胞毒性,呈现时间-效应和剂量-效应关系,其产生明显细胞毒性的最低剂量(5 μmol/L)低于其使细胞内巯基耗损的最低剂量,表明巯基的耗损并非其毒性的原因;应用抗氧化剂二苯基对苯二胺抑制氯化汞的脂质过氧化能力,并不能使肝细胞免于氯化汞的毒性作用,从而证实脂质过氧化亦非氯化汞毒性的原因,而仅为一种伴随现象。
- 朱砂郑波杨铟刘毓谷
- 关键词：氯化汞肝细胞毒性过氧化脂质
- 日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠免疫应答的影响被引量：7
- 2000年
- 采用日本血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。免疫８周时，断头取血，取脾脏，取腹腔巨噬细胞。以淋巴细胞刺激指数（ＳＩ）反映细胞增殖能力，以ＮＯ湫得检测巨噬细胞吞噬活性，以ＥＬＩＳＡ试剂盒检测血清及脾淋巴细胞培养上清的白细胞介素２（ＩＬ－２＿和干扰素γ（ＩＦＮ－γ）的含量。结果表明，ｒＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗以１０＾－６ＣＦＵ剂量经皮下免疫小鼠后。
- 戴五星郑波皇甫永穆
- 关键词：日本血吸虫重组BCG疫苗免疫应答疫苗
- 日本血吸虫32ku抗原基因的克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达被引量：12
- 2000年
- 日本血吸虫３２ ｋｕ抗原（简称ｓｊ３２ｋｕ）是血吸虫的一种保护性抗原，为研究其重组疫苗的保护作用，将该抗原基因的全编码序列按正确的阅读框顺序插入到穿梭质粒 ｐＢＣＧ２１００，受控于人结核杆菌热休克蛋白 ７０（Ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏ－ｔｅｉｎ ７０，简称ｈｓｐ７０）启动子，构建成重组表达质粒 ｐＢＣＧ－ｓｊ３２，在大肠杆菌－分枝杆菌两个系统中能稳定复制。重组分枝杆菌于 ４２℃诱导 ２ ｈ或 ４５℃诱导 ３０ ｍｉｎ，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，在 ３２ ｋｕ的位置能见到明显的蛋白条带，表明 ３２ ｋｕ抗原能在分枝杆菌中高效表达。
- 肖红郑波祁学忠皇甫永穆
- 关键词：分枝杆菌日本血吸虫疫苗基因表达
- 新型大肠杆菌-分枝杆菌穿梭载体的构建及卡那霉素抗性基因表达的研究被引量：10
- 1998年
- 用 PCR（polymerase chain reaction）技术克隆了卡介苗（Bacille Calmette-Guerin,BCG）热休克蛋白 65（heat shock Protein 65, hsp65）启动子序列,构建成穿梭载体ME-65。该载体含有分枝杆菌和大肠杆菌的质粒复制基因、BCG的hsp65高效启动子序列以及在分枝杆菌和大肠杆菌中都能表达的卡那霉素抗性基因。将其转化到耻垢分枝杆菌和BCG中均可稳定复制并表达卡那霉素抗性。质粒对宿主菌的生长无明显的影响,未观察到质粒的丢失和突变。该载体具有分子量小、容量大、转化效率高、复制稳定、含有多克隆位点等优点,将外源基因插入到hsp65启动子的下游,可望在BCG中获得高效表达。为BCG和其它分枝杆菌发展成多价重组疫苗开辟了新途径。
- 路艳艳冯作化皇甫永穆郑波
- 关键词：分枝杆菌穿梭质粒卡介苗大肠杆菌
