陈宪
- 作品数:13 被引量:8H指数:2
- 供职机构:四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省学术和技术带头人培养资金国家社会公益研究专项计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 嗜肺军团菌htpA基因的克隆及其原核表达被引量:2
- 2006年
- 目的克隆并检测嗜肺军团菌htpA基因在原核系统中表达情况,为进一步研究HtpA蛋白的免疫性能作必要的准备。方法采用聚合酶链反应(PCR)从嗜肺军团菌基因组DNA中扩得军团菌热休克蛋白A基因htpA,并将其定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建原核表达重组质粒pGhtpA,重组子经限制性内切酶分析、聚合酶链式反应及测序鉴定后,转化宿主菌大肠杆菌JM109,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定。结果扩增出了291bp完整的htpA基因,构建了原核表达重组质粒pGhtpA,并检测到约36kDa的GST-htpA融合蛋白质表达条带。结论成功克隆了嗜肺军团菌htpA基因并使HtpA蛋白在原核表达系统中得到了有效的表达,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础。
- 刘明杰陈建平廖涛王涛陈宪田玉张雷张莉
- 关键词:嗜肺军团菌基因克隆基因表达
- 人肠三叶肽在大肠杆菌中的表达
- 2010年
- 目的构建三叶肽(TFF)原核重组质粒pET32a-TFF3,实现TFF3融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达并鉴定表达产物。方法用TRIzol试剂提取人结肠组织mRNA,逆转录后经PCR扩增得到不含信号肽的TFF3编码序列,插入原核表达载体pET32a,构建pET32a-TFF3重组质粒,转化大肠杆菌BL-21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达蛋白。结果酶切和测序证实pET32a-TFF3重组质粒构建成功。SDS-PAGE分析表明在IPTG浓度为1 mmol/L时,诱导6 h后蛋白表达量最大。Western blot分析表明,TFF3融合蛋白相对分子质量约为24×103,其能与兔源TFF3抗体特异性结合。结论成功构建了pET32a-TFF3重组质粒,实现了该基因在大肠杆菌中的高效表达,为后续深入研究TFF3奠定了基础。
- 路睿王昕陈建平陈宪徐佳楠
- 关键词:蛋白质表达融合蛋白
- 军团菌外膜蛋白抗原基因的克隆并在原核系统中表达被引量:1
- 2004年
- 目的 克隆军团菌外膜蛋白抗原基因 omp M,构建重组质粒 p LPM,并在原核系统中表达。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从军团菌基因组 DNA中扩增得到 omp M基因 ,导入载体 p UC1 8,在 JM1 0 9中表达 ,并用SDS-PAGE进行鉴定。结果 扩增出 773 bp的 omp M基因 ;构建重组质粒 p LPM;表达出 2 5 k Da的蛋白质。结论 成功扩增军团菌 omp M基因 ,构建重组质粒 p LPM,并在原核系统中得到了表达。
- 芦殿香陈建平张雷王涛刘明杰田玉陈宪
- 关键词:军团菌PCR基因表达
- 肝癌CT/MRI表现与介入治疗疗效相关性研究
- 周翔平官泳松宋彬黄娟陈宪陈卫霞杨汉丰张刚等
- 课题组多年来致力于肝癌的CT/MRI表现和介入治疗的相关性研究,“肝细胞癌螺旋CT同层动态扫描表现与肿瘤血管生成的相关性”为1998年四川省第2批重点科技项目。该课题属医学领域中基础研究与临床应用相结合的研究项目。针对如...
- 关键词:
- 关键词:肝癌介入治疗疗效试验影像诊断
- 杜氏利什曼原虫rAST1蛋白的构建及黑热病诊断的初步研究
- 目的内脏利什曼病(visceral leishmaniasis,VL)又称黑热病(kala-azar),在世界范围内广泛流行,波及62个国家,约2亿人受到本病的威胁,每年估计新增病例约50万人。每年估计新增病例50万人。...
- 陈建平陈宪张建国徐佳楠陈达丽
- 文献传递
- 杜氏利什曼原虫rAST1蛋白的初步研究暨pH敏感水凝胶P(CL-EG-MAA)的急性口服毒性研究
- 陈宪
- 关键词:利什曼氏原虫
- 杜氏利什曼原虫rAST1蛋白的制备及用于黑热病诊断的初步研究
- 方法 以杜氏利什曼原虫L.d.GS 的基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得amastni基因扩增产物.将amastin 基因定向克隆到pcDNA3.1(+) 中,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-GS-amastin...
- 陈建平龚雨杨斌斌徐佳楠陈达丽陈宪孙柯常凯朱达峰赖彩虹
- 关键词:黑热病杜氏利什曼原虫基因基因间接ELISA
- 我国黑热病流行现状
- 利什曼病又称黑热病,广泛流行于62 个国家,约2 亿人受到本病的威胁,每年估计新增病例约50 万人.黑热病曾广泛分布于我国长江以北16 个省、市、自治区,自1950 年代经大规模的有效防治,多数地区已基本消灭了黑热病,近...
- 陈建平龚雨杨斌斌徐佳楠陈达丽陈宪孙柯常凯朱达峰赖彩虹
- 关键词:黑热病
- 吉林省汉坦病毒的分离及进化分析
- 汉坦病毒一个主要特征是每一型的HV都有一个独特的啮齿动物宿主(除TPM株[21]以外)。汉坦病毒可在其宿主中长期存在而不表现症状,并与宿主共进化[18]。人主要通过接触带毒宿主动物及其分泌物和排泄物所形成的气溶胶而感染。...
- 陈宪
- 关键词:大林姬鼠褐家鼠汉坦病毒M基因
- 文献传递
- 杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白N端胞外区基因(ast1)的克隆及表达被引量:1
- 2009年
- 构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白N端胞外区基因(ast1)的原核表达重组质粒pET32a(+)-ast1,并在大肠杆菌BL21中进行表达。从杜氏利什曼原虫基因组DNA中扩增无鞭毛体蛋白基因并用SOSUI和Tmpred方法预测其跨膜区结构;根据跨膜区预测的结果,扩增基因ast1并将其连接到原核表达载体pET32a(+)中,重组质粒命名为pET32a(+)-ast1,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。SDS-PAGE和免疫印迹分析表明,在约27kDa处获得重组目的蛋白rAST1的表达,显示成功构建杜氏利什曼原虫原核表达重组质粒pET32a(+)-ast1,并在大肠杆菌BL21中获得有效表达。
- 陈宪陈建平徐佳楠王昕路睿芦殿香胡孝素
- 关键词:杜氏利什曼原虫