万一 作品数:77 被引量:160 H指数:7 供职机构: 陕西省微生物研究所 更多>> 发文基金: 中国科学院西部之光基金 陕西省科技攻关计划 陕西省社会发展科技攻关项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
人表皮生长因子-天蚕素B融合蛋白在大肠杆菌中的表达 万一 沈卫荣 韩丽萍 陈锐 孙晓宇 1、课题来源与背景: 课题来源于陕西省科学院青年基金。 抗菌肽(antimicrobial peptides)是具有抗菌活性短肽的总称。与青霉素等传统抗生素对细菌作用机制不同的是它的作用靶位是细菌细胞质膜,作用结果是...关键词:关键词:天蚕素B 融合蛋白 人表皮生长因子 一种基于抗菌肽的双功能融合蛋白及其制备方法和用途 本发明公开了一种基于抗菌肽的双功能融合蛋白及其制备方法和用途,所述的基于抗菌肽的双功能融合蛋白,是基于天蚕素B蛋白序列和人表皮生长因子的融合蛋白,并将其连接蛋白特别设计为凝血酶能够识别的位点,并且在融合蛋白上构建纯化的H... 万一 韩丽萍 沈卫荣 张月娟 孙晓宇 张琨 李玥一种NO增强抗生素抗菌敏感性的方法及应用 本发明公开了一种NO增强铜绿假单胞菌对抗生素抗菌敏感性的方法,NO通过外源NO供体提供、内源NO供体提供或内源NO代谢调控的方式累积,可以增强铜绿假单胞菌对氨基糖苷类或者β‑内酰胺类抗生素中一种或者多种组合抗生素的抗菌敏... 万一 陈畅 高磊 乔新华 王琰文献传递 TNFα自体疫苗的制备、筛选及其对TNFα表达过高相关疾病治疗作用的研究 研究背景TNFα是一种具有复杂生物活性的细胞因子,它主要由巨噬细胞和T细胞产生。该分子除了能够在体内或体外杀伤肿瘤细胞外,还具有抗病毒感染、激活巨噬细胞及多形核粒细胞、促进组织相容性抗原表达、调节机体免疫机能等多种功能。... 万一关键词:佐剂 恶病质 内毒素休克 文献传递 黄酮类化合物用于制备β-内酰胺酶抑制剂的用途 本发明提供了黄酮类化合物用于制备丝氨酸β‑内酰胺酶抑制剂的用途。具体的所述黄酮类化合物为槲皮素、漆黄素、木犀草素、3',4',7‑三羟基黄酮、芹菜素、山奈酚和二氢槲皮素中的任意一种或者多种组合,尤其公开了在制备D类丝氨酸... 万一 张月娟 高磊 秦川 张绪 王军不同重楼变种间内生真菌群落多样性差异及生物标记物初探 被引量:5 2020年 目的通过对不同变种重楼内生真菌群落多样性研究及生物标记物分析,为中药材重楼多基源质量等同性及鉴别溯源技术的开发研究奠定基础。方法采用Illmina Hiseq高通量测序技术对3个变种的重楼内生真菌群落基因进行扩增子序列测定,同时对菌群多样性、真菌群落差异进行生物信息学分析。结果对不同变种重楼内生真菌进行多样性分析结果显示,七叶一枝花Paris polyphylla Smith var. chinensis (Franch.) Hara、长药隔重楼Paris polyphylla Sm. var. thibetica (Franch.) Hara、具柄重楼Paris fargesii Franch. var. petiolate (Baker ex C. H. Wright) Wang et Tang三者的内生真菌的α多样性存在差异,但β多样性无显著性差异,具柄重楼中特有的OTU仅为0.27%。真菌群落注释结果表明,3个变种分别注释到6个相同的门,但组成比率不同。另外,通过LEfSe分析,初步探索了3个变种的生物标记物差异,七叶一枝花中Rhizophagus irregularis与其他2变种有显著性差异。结论 3个变种重楼内生真菌群落β多样性变化不显著,但组成比率有很大的差异性。该研究结果中药材重楼多基源质量等同性及鉴别溯源技术的开发研究提供研究基础。 王艳 王汉屏 程虎印 赵乐 万一 杨琳关键词:重楼 内生真菌 生物标记物 白藜芦醇联合酮康唑在制备抗真菌产品中的应用 本发明公开白藜芦醇及白藜芦醇联合酮康唑在制备抗真菌感染疾病药物中的应用。本研究首次利用白藜芦醇和酮康唑药物联用具有协同抗真菌的作用,能显著降低酮康唑的使用浓度,对白色念珠菌、红色毛癣菌及石膏小孢子菌的抑菌效果均优于单独使... 万一 王军 张绪 高磊 张月娟 王璐多黏芽孢杆菌产ɑ-环糊精葡萄糖基转移酶在大肠杆菌中的可溶性表达及其转化产物特异性研究 被引量:2 2017年 通过设计简并引物,从Paenibacillus macerans YLW菌株中克隆到其α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGTase)基因,构建重组质粒α-CGTase-p ET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),得到重组菌株α-CGTase-p ET28a/BL21(DE3)。在16℃,1m M IPTG条件下诱导15 h,实现了α-CGTase的可溶性表达,胞内酶活达到10046U/m L,是野生菌株胞外酶活的3.25倍。经镍柱一步法亲和纯化α-CGTase后,酶蛋白纯化了6.05倍,酶收率28.82%,通过SDS-PAGE检测获得表观电泳纯酶蛋白。酶催化转化实验表明:重组α-CGTase酶转化质量分数为5%的马铃薯淀粉15 h后,环糊精的总转化率可达40.7%,转化生成α-CD,β-CD,γ-CD比例分别为:43.6%、41.8%和14.6%。该重组酶对α-CD具有较好的转化专一性,通过转化条件的进一步优化将具有非常好的产业化开发前景。 王琰 李皎 杨国武 王军 邓媛 万一关键词:Α-环糊精葡萄糖基转移酶 可溶性表达 纯化 NO累积降低铜绿假单胞菌侵袭力的方法、靶点及应用 本发明公开了NO累积降低铜绿假单胞菌侵袭力的方法、靶点及应用,是在铜绿假单胞菌的生存或培养环境中,通过外源NO供体或内源NO代谢阻断的方式达到NO累积,以降低铜绿假单胞菌的侵袭力因子绿脓菌素的产生。仅用微量的NO即可实现... 万一 陈畅 高磊 张玉英 乔新华 王琰铜绿假单胞菌LasR蛋白的表达及抗血清制备 被引量:2 2017年 目的将铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)中的调控蛋白LasR在原核系统中进行表达,制备LasR抗血清,为PA中las调控系统的研究奠定基础。方法以PA模式菌株PAO1全基因组为模板,PCR扩增lasR基因,PCR产物用Bam HI/EcoRI双酶切连接至p GEX-4T-1载体,获得重组表达载体p GEX-4T-1-lasR;PCR产物经Nco I/Xho I双酶切连接至p ET28a载体,获得重组表达载体p ET28a-lasR。将重组表达载体分别转化至大肠杆菌感受态细胞BL21中,分别以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达GST-LasR和His-LasR蛋白,通过GST或Ni^(2+)亲和层析纯化重组蛋白。将纯化后的His-LasR蛋白免疫新西兰大白兔,制备LasR抗血清;纯化后的GST-LasR蛋白用于LasR抗血清ELISA效价的检测。结果 lasR基因序列大小为717 bp;成功构建p GEX-4T-1-lasR和p ET28a-lasR表达载体。构建的工程菌能够有效表达目的蛋白His-LasR和GST-LasR,蛋白纯度大于95%;LasR抗血清的效价为1∶60 000。结论在原核系统中成功表达了可溶性LasR重组蛋白,并获得高效价的LasR抗血清,为PA中las调控系统的研究奠定了基础。 訾静 王军 高磊 张琨 张绪 万一关键词:铜绿假单胞菌 原核表达 抗血清