王军
- 作品数:26 被引量:32H指数:2
- 供职机构:陕西省微生物研究所更多>>
- 发文基金:中国科学院西部之光基金陕西省社会发展科技攻关项目陕西省教育厅产业化培育项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 蝇蛆抗菌肽粗提物对铜绿假单胞菌毒力因子绿脓菌素(PCN)合成的影响被引量:1
- 2017年
- 【目的】研究蝇蛆抗菌肽粗提物对铜绿假单胞菌毒力因子绿脓菌素(PCN)的影响。【方法】通过热处理和分级醇沉等方法得到蝇蛆抗菌肽粗提物,得率11%,制成25μg·μl^(-1)的母液,进一步研究不同浓度蝇蛆抗菌肽粗提液体对铜绿假单胞菌模式菌株PAO1和临床分离菌株PCN合成的影响。【结果】当浓度大于0.5μg·μl^(-1)时,蝇蛆抗菌肽粗提液对PAO1的PCN的合成产生了显著的抑制作用。临床分离的铜绿假单胞菌菌株也有类似的结果。【结论】低浓度(非致死剂量的)蝇蛆抗菌肽粗提物对铜绿假单胞菌毒力因子PCN具有显著抑制作用。
- 高磊王军张琨陈文龙万一
- 关键词:铜绿假单胞菌绿脓菌素
- Bacillus clarkii 7364 γ-环糊精葡萄糖基转移酶的可溶性表达及其催化特性分析被引量:2
- 2017年
- 按照大肠杆菌偏爱密码子对Bacillus clarkii 7364来源的γ-环糊精葡萄糖基转移酶(γ-CGTase)进行优化,构建γ-CGTase原核表达菌株,摸索γ-CGTase的可溶性表达条件及纯化条件,并对其催化特性进行研究。结果表明:在28℃条件下实现了γ-CGTase的高效可溶性表达,可溶性蛋白占总蛋白表达量的63%,酶活可达3 830 U/mL。经(NH4)2SO4沉淀和α-CD-Sepharose 6B亲和柱纯化后,酶蛋白纯化了12.97倍,酶收率20.31%。使用该酶对木薯淀粉进行转化,转化产物中γ-环糊精(γ-CD)的比例可达90.9%,几乎无α-环糊精(α-CD),与天然酶的79%相比提高了15%。将该基因工程菌在20 L发酵罐中发酵,10 h后酶活达到4 375 U/mL,证实了其工业化放大的可能。该酶具有非常高的转化专一性,有非常好的工业化前景。
- 王琰万一李皎杨国武邓媛王军
- 关键词:BACILLUSCLARKII可溶性表达
- 秦岭地区羊肚菌根系土样黏细菌的分离
- 2019年
- 通过分离陕西秦岭地区羊肚菌根系土样中的黏细菌,建立黏细菌的分离方法,分析羊肚菌根系土样中黏细菌的多样性。采集自陕西商洛地区种植羊肚菌根系土样,采用不同诱导方法分离土样中的黏细菌,比较不同方法的出菌率,通过菌落形态、显微照片对黏细菌进行观察,并结合16S rRNA序列,分析得到的黏细菌种类。采用活的大肠埃希菌作为诱导底物分离出的黏细菌数量最多,本次实验从羊肚菌根系土样中共分离纯化出17株黏细菌,包括5个属,其中黏球菌属(Myxococcus)12株,珊瑚球菌属(Corallococcus)2株,孢囊杆菌属(Cystobacter)1株,原囊菌属(Archangium)1株,标桩菌属(Stigmatella)1株。结果显示羊肚菌根系土壤有黏细菌存在,其中以黏球菌属居多,为后续探讨黏细菌与羊肚菌之间是否存在互生关系提供参考。
- 王军高磊高磊万一
- 关键词:羊肚菌黏细菌分离纯化
- 秦岭丹江流域黏细菌的分离及其代谢产物研究被引量:2
- 2019年
- [目的]分离陕西秦岭丹江流域土壤中的黏细菌,收集其代谢产物,对代谢产物成分和活性进行分析.[方法]采用大肠杆菌诱导法和滤纸片诱导法分离从丹江流域采集的18份土壤样品中的黏细菌,用摇瓶发酵得到其代谢产物,采用枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌和大肠杆菌作为指示菌对代谢产物进行平板抑菌试验;对4种指示菌抑制活性明显菌株的代谢产物成分进行HPLC和薄层色谱(TLC)分析,采用细胞凋亡法测试了代谢产物组分对HepG2肝癌细胞的毒性.[结果]共分离纯化出23株黏细菌,包括黏球菌属(Myxococcus) 15株,珊瑚球菌属(Corallococcus)3株,孢囊杆菌属(Cystobacter)1株,原囊菌属(Archangium)3株,软骨霉状菌属(Chondromyces)1 株.抑菌试验表明15号菌株的2号代谢产物对4种指示菌均有不同程度的抑制作用.对HPLC得到的15号菌株2号代谢产物的5号组分进行研究,结果表明,其能明显增加HepG2细胞凋亡.[结论]秦岭丹江流域土样中的黏细菌具有一定的多样性,得到1株活性菌株,其代谢产物具有抑菌活性和抗肿瘤细胞活性.
- 王军李宏铎张琨张琨万一
- 关键词:黏细菌代谢产物生物活性丹江流域
- 抗真菌活性粘细菌的筛选及鉴定被引量:2
- 2011年
- [目的]筛选出具有抗真菌活性的粘细菌并对其进行种类鉴定。[方法]从全国23个省、自治区的200个腐殖质土样中分离纯化出237株粘细菌;将菌株在4种不同培养基中发酵培养,发酵产物通过甲醇提取得到代谢产物;以白色念珠菌为模型对次级代谢产物进行高通量筛选。[结果]复筛后得到1株编号为ZJ2的粘细菌,其次级代谢产物具有抗白色念珠菌的活性,对该菌株进行16SrDNA克隆并测序,结果表明ZJ2为橙色粘球菌(Myxococcus fulvus)。[结论]菌株ZJ2的次级代谢产物中,存在对白色念珠菌生长有显著抑制作用的生物活性物质,具有潜在的研究和药用价值。
- 刘建玲李宏铎王军万一
- 关键词:粘细菌代谢产物抗真菌活性高通量筛选
- 黄酮类化合物用于制备β-内酰胺酶抑制剂的用途
- 本发明提供了黄酮类化合物用于制备丝氨酸β‑内酰胺酶抑制剂的用途。具体的所述黄酮类化合物为槲皮素、漆黄素、木犀草素、3',4',7‑三羟基黄酮、芹菜素、山奈酚和二氢槲皮素中的任意一种或者多种组合,尤其公开了在制备D类丝氨酸...
- 万一张月娟高磊秦川张绪王军
- 白藜芦醇联合酮康唑在制备抗真菌产品中的应用
- 本发明公开白藜芦醇及白藜芦醇联合酮康唑在制备抗真菌感染疾病药物中的应用。本研究首次利用白藜芦醇和酮康唑药物联用具有协同抗真菌的作用,能显著降低酮康唑的使用浓度,对白色念珠菌、红色毛癣菌及石膏小孢子菌的抑菌效果均优于单独使...
- 万一王军张绪高磊张月娟王璐
- 一株异常球菌H-1及其在产生红色素中的应用
- 本发明公开一种异常球菌H‑1及其在产生红色素中的应用。通过在南极腐殖土壤中分离筛选并经过系列鉴定获得一株新菌种异常球菌(<I>Deinococcus sp.</I>)H‑1 CGMCC N0.16333,利用分离出的菌种...
- 万一张琨訾静王军张绪高磊
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌蛋白A(SpA)Z结构域串联体的克隆、表达和筛选被引量:2
- 2012年
- 筛选一种高效重组金黄色葡萄球菌蛋白A(SpA)用于制备抗体纯化亲和介质。首先通过基因操作获得金黄色葡萄球菌蛋白A(SpA)的Z结构域单体、二串体、三串体、四串体和五串体基因,将目的基因分别克隆至pET-22b表达载体并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,获得不同串联个数的Z结构域基因工程菌,经诱导表达和Ni2+亲和层析纯化得到Z结构域单体和二-五串体蛋白。纯化后的目的蛋白偶联至琼脂糖凝胶作为亲和层析介质,对人免疫球蛋白G(IgG)进行分离纯化。分析比较Z结构域串联体蛋白产量及其偶联的亲和介质对抗体吸附载量的差异。结果表明,构建的Z结构域单体、二串体、三串体、四串体和五串体基因工程菌能有效表达目的蛋白,制备的凝胶亲和介质可特异性吸附人IgG。增加Z结构域串联数,重组蛋白产量和单位摩尔数多聚体蛋白吸附载量获得提高,其中,重组四串体蛋白产量大(160 mg/10 g湿菌体),对抗体的吸附载量高(34.4 mg人IgG/mL胶),更适合作为配基用于亲和层析介质的制备。
- 万一訾静张琨张志敏张月娟王琰王军
- 一种重组人表皮生长因子的新型制备方法
- 本发明的目的是提供一种方法简单、价格低廉的Ssp内含肽系统介导重组人表皮生长因子的制备方法,该方法利用液相切割和离子交换层析代替传统的柱上切割和几丁质亲和层析。采用液相切割代替了传统Ssp内含肽系统介导的蛋白纯化方法中所...
- 万一张月娟张琨王琰訾静张志敏王军