公共文化服务平台

共 6 条记录，以下是 1-6

全选清除导出

排序方式：

大熊猫秦岭亚种IL-2基因克隆及表达研究: 目的:明确大熊猫四川种群和秦岭种群的IL-2在基因水平是否存在差异;获得具有生物活性的秦岭大熊猫IL-2原核表达产物.方法:采用RT-PCR方法从ConA诱导培养的秦岭大熊猫外周血淋巴细胞中扩增IL-2基因,利用DNA重...; 乔琦马清义朱辉陈德坤; 关键词：大熊猫白细胞介素-2 基因克隆原核表达; 文献传递

秦岭大熊猫IL-2基因的克隆、原核表达及表达产物的生物活性研究: 大熊猫是我国珍稀的野生动物,全球仅存1600多只,尤其是秦岭种群大熊猫的数量据第3次野外普查报告总数仅有273左右。大熊猫人工繁育中,因疾病尤其传染病引起的大熊猫发育不良和死亡是目前大熊猫繁育饲养中的主要问题之一,提高大...; 乔琦; 关键词：秦岭大熊猫白细胞介素-2 ELISA 生物活性; 文献传递

大熊猫秦岭亚种IL-2基因的克隆表达及其生物活性研究被引量：3: 2009年; 目的:明确大熊猫四川种群和秦岭种群IL-2在基因水平是否存在差异;得到具有具有生物活性的秦岭大熊猫IL-2原核表达产物。方法:采用RT-PCR方法从ConA诱导培养的秦岭大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到IL-2的cDNA片段,利用DNA重组技术构建原核表达载体pET32a-IL-2,转入BL21(DE3)中,以IPTGBL21(DE3)表达IL-2融合蛋白。融合蛋白进行SDS-PAGE和Western blot进行鉴定及可溶性分析;用纯化的融合蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体;采用淋巴细胞增殖试验测定融合蛋白生物活性。结果:通过重组表达获得IL-2抗原蛋白,相对分子质量(Mr)为34000;免疫家兔得到特异性的抗IL-2抗体,该抗体能够检测细胞内源性IL-2蛋白的表达;融合蛋白具有促进淋巴细胞转化增殖的生物学活性,并且它的这种作用可被本研究制备的多抗所抑制。结论:成功克隆了秦岭大熊猫IL-2基因,与四川大熊猫核苷酸同源性为99.4%表达了具有生物活性的融合蛋白。; 乔琦马清义朱辉陈德坤; 关键词：秦岭大熊猫 IL-2 克隆多克隆抗体生物活性

猪瘟流行毒株E2基因主要抗原区的原核高效表达被引量：1: 2008年; 【目的】构建猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)E2基因主要抗原区原核表达质粒载体,高效表达E2蛋白,为进一步研究E2亚单位疫苗提供物质基础。【方法】用RT-nested PCR技术扩增CSFV流行毒株SX-YL株E2基因主要抗原区,克隆于表达载体pET32a中,成功构建表达质粒pET32a-E2,将pET32a-E2转入BL21(DE3)受体菌并用IPTG诱导表达E2蛋白,对E2蛋白进行SDS-PAGE电泳、Western-blot分析和可溶性鉴定。【结果】CSFVE2基因得到了高效表达,表达蛋白量占菌体蛋白量的33.2%,表达蛋白E2主要以包涵体形式存在;免疫印迹分析结果表明,表达蛋白E2能识别天然猪瘟多克隆抗体。【结论】E2蛋白表达量高并具有生物学活性。; 朱小甫董志强朱辉张文丽乔琦吴旭锦陈德坤; 关键词：猪瘟 E2基因原核表达

不同年龄犬红细胞培养上清对淋巴细胞增殖的作用被引量：3: 2008年; 【目的】测定不同年龄犬红细胞刺激淋巴细胞增殖的能力，探索红细胞的免疫功能及其实现方式。【方法】无菌采取1～3月龄幼犬及18～20月龄成年犬的犬肝素抗凝血，分离红细胞，制备5．0×10^7mL。红细胞悬液，接种在24孔细胞培养板中培养56h后，收集红细胞上清；采用淋巴细胞转化增殖试验，分析了红细胞培养上清液单独及协同刀豆蛋白A（ConA）对淋巴细胞转化增殖的影响。【结果】无论自体或是异体，幼犬的红细胞培养上清对淋巴细胞的刺激效果均明显优于成年犬（P〈0．05）；无论幼犬还是成年犬的红细胞培养上清，其自体刺激淋巴细胞增殖的效果均明显优于异体（P〈0．05）。【结论】幼体红细胞参与T细胞免疫调控的作用强于成年个体，这对于幼体免疫系统的快速发育成熟非常有益。; 张文丽乔琦朱辉陈德坤; 关键词：红细胞培养上清淋巴细胞

犬红细胞培养上清液对淋巴细胞增殖转化的影响被引量：3: 2007年; 无菌采取犬血、肝素抗凝、分离出红细胞,制备不同浓度的红细胞悬液,接种24孔板中进行培养,在培养不同时间分别收集红细胞培养上清液,采用淋巴细胞增殖转化试验,检测其单独及协同不同丝裂原(PHA-P、ConA和LPS)对犬淋巴细胞增殖转化的影响,淋转结果用MTT法测定。结果显示,无论单独或是协同不同丝裂原(PHA- P、ConA和LPS),红细胞培养上清液对淋巴细胞均有明显的促增殖转化作用(P<0．05);单独及协同丝裂原PHA-P、ConA和LPS刺激淋巴细胞时,红细胞浓度分别为1×108,1×109,5．0×107和1×108mL1,培养时间分别为56,72, 56和72 h的红细胞培养上清效果最佳。表明,犬红细胞培养上清液对犬淋巴细胞的增殖转化有明显的促进作用。; 张佩君白丽丽乔琦陈德坤; 关键词：MTT法

全选清除导出

共1页<1>

乔琦