仲照东
- 作品数：51 被引量：155H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海外青年学者合作研究基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 强化预处理单倍体造血干细胞移植治疗不同疾病状态高危急性白血病的疗效分析
- 张然夏凌辉王华芳吴秋玲游泳石威仲照东陆铉王雅丹胡豫
- 急性单核细胞白血病M5a和M5b的细胞生物学和临床行为比较分析
- 2005年
- 目的比较急性单核细胞白血病M5a和M5b细胞遗传学和免疫表型差异,并了解其与临床行为之间的相互关系。方法采用骨髓直接法和24h短期培养法制备染色体标本,用G显带技术对58例成人初发急性单核细胞白血病进行核型分析,并用免疫荧光标记法及流式细胞术进行免疫表型检测,同时对其临床资料进行回顾性分析。结果58例患者中正常核型28例,异常核型30例,其中,正常核型在M5b出现率高于M5a(P<0.01),异常核型中11q23异常和+8染色体在M5a中均较M5b常见(P<0.01);CD68和CD11b在M5a的表达高于M5b(P<0.01);不同患者急性单核白血病细胞的免疫表型呈现一定的异质性,但急性单核细胞白血病M5a、M5b两亚型的临床行为未见显著差异。结论M5a和M5b存在各自较独特的细胞生物学特点。
- 刘凌波李蕾肖娟仲照东邹萍
- 关键词：单核细胞细胞遗传学免疫表型
- 抗Fas核酶抑制小鼠T细胞凋亡被引量：2
- 2005年
- 目的 研究抗Fas核酶对小鼠原代T细胞凋亡的抑制作用, 探索增强T细胞抗凋亡能力的新途径。方法设计并合成针对小鼠Fas基因的锤头状核酶, 通过电穿孔转染法将其导入小鼠脾脏T细胞, 通过RT -PCR、Westernblot检测细胞上Fas的表达, 细胞经抗Fas的抗体(JO2 ) 作用后, 通过Caspase -3 活性检测试剂盒测转染前后细胞Caspase 3活性的变化, MTT法测细胞的增殖, Annexin Ⅴ凋亡检测试剂盒测细胞凋亡。结果 ①与对照组、空载体和突变核酶转染组相比, 细胞表面的Fas水平明显降低; ②与抗Fas的抗体孵育后, 与转染空载体和突变核酶的细胞相比, 转染核酶的细胞Caspase- 3活性明显降低; ③经抗Fas抗体处理后, 细胞的增殖活性明显增高; ④与空载体和突变核酶转染组相比, 转染核酶的细胞凋亡率明显降低。结论 小鼠活化T细胞上高表达Fas, 抗Fas核酶能显著降低其Fas水平, 使细胞免于Fas途径的凋亡, 从而增强其抗凋亡能力。
- 张敏陈智超刘仲萍游泳王海燕仲照东邹萍
- 关键词：核酶T淋巴细胞细胞凋亡FAS肿瘤免疫
- 一种重组腺病毒载体产生及操作的新方法被引量：12
- 2003年
- 目的 建立一种快速、高效的产生腺病毒的实验方法。方法 将增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)装在穿梭质粒 ,线性化后与腺病毒骨架载体一起电穿孔转染大肠杆菌 ,使之同源重组 ,产生病毒基因组质粒。后Pac酶切 ,脂质体介导转入 2 93细胞以包装出病毒。扩增后收获病毒 ,氯化铯密度梯度离心纯化 ,空斑试验测滴度。结果 5 2个大肠杆菌克隆 ,其中有 1个发生同源重组 ,产生腺病毒基因组质粒pAdEGFP ,转染 2 93细胞 ,荧光显微镜下产生绿色荧光。病毒纯化后达 10 11pfu/ml。 结论 大肠杆菌内质粒间同源重组的方法可以高效、简便、快捷地产生重组腺病毒载体 。
- 胡中波仲照东张友山彭程卢运萍邹萍
- 关键词：绿色荧光蛋白同源重组腺病毒载体大肠杆菌
- PLK1基因沉默抑制HeLa细胞凋亡被引量：9
- 2006年
- 以高表达Polo样激酶1(Polo-likekinase1,PLK1)的宫颈癌细胞系HeLa细胞为模型,观察针对PLK1基因的短发夹状RNA(shorthairpinRNA,shRNA)对其凋亡和增殖的影响.设计并合成了针对PLK1的shRNA,将其导入构建的携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的RNAi(RNAinterference)表达载体中.通过RT-PCR和Western印迹分别检测HeLa细胞PLK1基因和蛋白水平的表达,以流式细胞仪和PI-Hochest双染法测细胞凋亡,MTT法检测细胞的增殖水平.成功构建了携带EGFP的RNAi表达载体pEGFP-H1.转染shRNA后,HeLa细胞PLK1的表达降低至30%.与对照组和空载体转染组相比,shRNA转染组的HeLa细胞凋亡率明显增加,其增殖活性则明显降低.本课题构建的RNAi表达载体便于观察靶基因的转染情况,且不影响H1启动子的体内转录.PLK1的基因沉默能明显增加HeLa细胞的凋亡,抑制该细胞的增殖,有可能为未来肿瘤的治疗找到新的靶点和有效途径.
- 张敏游泳陈智超肖娟刘芳仲照东田蕾邹萍
- 关键词：POLO样激酶1真核表达载体HELA细胞凋亡
- 归巢受体与恶性淋巴瘤播散的研究进展
- 2003年
- 归巢受体是一类位于淋巴细胞表面的粘附分子,通过与其配体的结合选择性地使淋巴细胞向特定组织部位归巢,不仅在淋巴细胞发育、活化和机体免疫防御反应中发挥重要作用,而且可以促进恶性淋巴瘤细胞的生长,提高肿瘤侵袭能力,广泛参与恶性淋巴瘤的播散过程,并与临床预后相关。
- 仲照东邹萍
- 关键词：归巢受体恶性淋巴瘤肿瘤播散
- 血管内皮细胞的生物学特性被引量：4
- 2010年
- 血管内皮细胞是血液和组织的天然屏障，并可合成、分泌多种血管活性物质，发挥不同的生理作用，如维持血管紧张度和血管结构，抗血栓，调节血管对细胞和蛋白成分的选择性渗透，维护内环境稳定，对氧化应激反应的保护，抑制炎症反应中白细胞的粘附和迁移，以及调节免疫过程。本文就上述领域的研究进展作一综述。
- 胡静仲照东邹萍
- 关键词：内皮细胞炎症免疫系统疾病
- 伊马替尼治疗Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病的临床观察
- 2007年
- 目的:评价酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼治疗Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病的有效性及安全性。方法:90例慢性粒细胞白血病患者,其中慢性期67例,非慢性期23例(加速期14例,急变期9例),每天应用剂量分别为400,600mg。每周复查血常规,每3个月进行骨髓象及细胞遗传学检查,根据血象和骨髓象调整剂量。结果:观察截止时,84例(93.3%)获得血液学完全缓解;68例可评价遗传学效应,35例(51.5%)发生主要遗传学效应(慢性期30例,加速期3例,急变期2例),其中31例(88.6%)为遗传学完全缓解(慢性期27例,加速期2例,急变期2例)。11例(12.2%)患者发生严重白细胞和/或血小板减少,但可通过调整剂量控制。严重非血液学不良反应发生较少。结论:伊马替尼治疗Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病患者疗效较好,可获得较高的完全血液学缓解率和主要细胞遗传学缓解率,起效迅速,且不良反应较少,可耐受或自行消失。
- 黎纬明游泳刘新月仲照东邹萍
- 关键词：伊马替尼白血病粒细胞
- 供者型CIK细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后白血病复发被引量：1
- 2013年
- 目的采用受者体内供者型或供者来源的细胞因子诱导杀伤细胞（CIK细胞）过继性免疫治疗异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后白血病复发的效果。方法回顾性分析2例allo—HSCT后白血病复发患者输注供者型CIK细胞成功开展过继性免疫治疗的临床资料。例1在移植后986d出现白血病复发，经化疗取得短暂部分缓解，采集受者外周血完全供者型单个核细胞扩增CIK细胞，先后给予受者5个周期的CIK细胞治疗。例2在亲缘allo—HSCT后158d出现白血病复发，采集亲缘供者外周血单个核细胞扩增CIK细胞，于移植后204d和294d给予2个周期的CIK细胞输注治疗。结果例1经化疗降低白血病细胞负荷后，经过1个周期的CIK细胞输注治疗，获得完全缓解，之后再次给予4个周期CIK细胞治疗，随访7个月取得持续完全缓解。例2复发后停用免疫抑制剂，并行化疗及输注供者干细胞采集物，于移植后187d出现急性移植物抗宿主病及髓外浸润情况，移植后204d输注1个周期的CIK细胞后，症状明显减轻。移植后294d给予第2个周期的CIK细胞治疗，骨痛缓解，现骨髓细胞学持续完全缓解，髓外病灶消失。结论受者体内供者型或供者来源的CIK细胞可用于allo-HSCT后白血病复发的治疗，效果良好，耐受性好。
- 李青吴耀辉仲照东游泳邹萍
- 关键词：白血病复发供者CIK细胞
- 三氧化二砷抑制cdc2基因表达诱导K562白血病细胞G_2/M周期停滞被引量：2
- 2007年
- 目的检测三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导慢性髓系白血病急变细胞K562周期停滞中细胞周期相关调节基因的转录、蛋白表达及其磷酸化改变,以期阐明As2O3诱导其周期停滞的分子生物学机制,为克服K562细胞的As2O3抵抗性提供实验基础。方法体外培养K562细胞,采用PI染色、流式细胞仪检测As2O3作用后细胞周期分布的改变;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞周期相关调节基因mRNA表达变化;Westernblot检测相关蛋白及磷酸化改变。结果As2O3作用K562细胞24h后,G2/M期细胞比例明显增加,浓度为0、2、5、10μmol/L时G2/M期细胞比例分别为(22.6±3.4)%、(27.2±2.3)%、(43.8±4.5)%、(36.7±4.1)%;K562细胞在As2O3处理前有Sur-vivin、cdc2、chk1基因表达,As2O3处理后Survivin、chk1的表达无明显变化,但cdc2表达呈浓度依赖性下调;As2O3作用前可见Survivin、cdc2、cdc2-p、chk1等4种蛋白的表达,作用24h后,Survivin的表达条带增强,cdc2蛋白表达水平呈浓度依赖性下调,cdc2-p水平在2～5μmol/L时无明显变化,在10μmol/L时受抑明显,chk1蛋白表达水平在As2O3作用前后无明显改变。结论As2O3显著诱导K562白血病细胞G2/M周期停滞,其机制与抑制cdc2转录水平,下调活性化cdc2蛋白表达有关。不能有效抑制抗凋亡蛋白Survivin的表达可能是K562白血病细胞对As2O3诱导凋亡抵抗的一个重要机制。
- 陈智超李秋柏吕建邵菁游泳仲照东黎纬明邹萍
- 关键词：三氧化二砷K562细胞SURVIVIN
