何承伟
- 作品数：46 被引量：207H指数：9
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- 半边旗抗肿瘤有效成分6F对HL-60细胞的DNA、RNA及蛋白质生物合成的抑制作用被引量：6
- 2002年
- 目的 :从 DNA、RNA及蛋白质生物合成的角度探讨半边旗有效成分 6F抗肿瘤的作用机理。方法 :用台盼蓝拒染法测定细胞成活率 ;[3H] - Td R,[3H] - UTP和 [3H] - Leu参入法分别测定细胞 DNA、RNA及蛋白质生物合成的水平。结果 :6F对 HL - 60细胞生长有强烈的抑制作用 ,且具明显的时间和剂量效应关系。 6F明显抑制 HL- 60细胞 DNA、RNA及蛋白质生物合成 ,呈剂量依赖关系。 6 F对蛋白质合成的抑制作用最强。结论 :6F对 HL- 60细胞生长有强烈的抑制作用 ,抑制细胞 DNA、RNA,特别是蛋白质的生物合成是 6F抗肿瘤作用的可能机制之一。
- 何承伟梁念慈莫丽儿李金华张晓
- 关键词：抗肿瘤有效成分DNARNA生物合成
- 反义核酸技术研究进展
- 反义核酸是根据抗碱基配对原理能与DNA或RNA互补结合并封闭其表达的一段核酸分子,本文就反义核酸五大技术领域,即反义DNA,反义RNA,核酶,反基因及肽核酸作了简单概述.
- 何承伟梁念慈
- 关键词：反义核酸核酶肽核酸
- 文献传递
- IL-13基因+2044G/A多态性与哮喘、血浆细胞因子水平间关系被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨血浆 Ig E、白细胞介素 13基因 (IL - 13)水平在哮喘以及 IL - 13基因及 2 0 4 4位点具有相同基因型的个体二者的相关性。方法 用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性 (PCR/ RFIP)方法检测哮喘对照组 +2 0 4 4位点多态性 ,用酶联免疫吸附法 (EL ISA)测定血浆 Ig E、IL - 13水平。结果 IL - 13基因 +2 0 4 4位点存在三种基因型。在哮喘和对照组 ,同一位点具有相同基因型的个体 ,其细胞因子水平存在显著性差异 ,(P<0 .0 1) ,在哮喘或对照组 ,具有相同基因型的个体 ,其 Ig E及 IL - 13水平存在显著性正相关 (r=0 .5 2～ 0 .6 7,P<0 .0 1～ 0 .0 5 )。结论 Ig E、IL - 13是影响哮喘发病的重要细胞因子 。
- 刘军麟吴斌陈华军何承伟刘志辉谢佳星
- 关键词：白细胞介素13IGE多态哮喘
- 一种质粒介导的RNAi系统的建立
- 2004年
- 目的 构建mU6启动子驱动的，在真核细胞内表达短发夹状RNA(short hairpin RNA，shRNA)的质粒载体；以绿色荧光蛋白(green fluorescence protein，GFP)为靶点观察该载体介导的RNAi效应。方法 从已知质粒中获取mU6启动子，经亚克隆后替换pcDNA3质粒中的CMV启动子，构建成pmU6质粒；设计并构建能表达针对GFP的shRNA的重组质粒，与表达GFP的质粒共转染细胞，用流式细胞仪检测GFP的表达水平。结果 表达shRNA的pmU6质粒载体转染细胞后抑制了细胞中GFP的表达，针对GFP基因不同位点的shRNA的RNAi效应差异很大。结论 pmU6质粒载体能介导RNAi效应，该载体可作为RNAi用于基因功能和基因治疗研究的有用工具。
- 何承伟刘芳张月飞剧克元
- 关键词：质粒载体质粒介导共转染流式细胞仪检测靶点GFP
- 鼠白细胞介素2受体α和β链反义RNA抑制Con A刺激的脾细胞生长增殖的研究
- 已知移植排斥反应和移植物抗宿主病,某些肿瘤,自身免疫性疾病及某些感染性疾病等,与IL-2R的表达异常密切相关。这就为防治这些疾病提供了新靶点。本研究试图用反义RNA封闭IL-2R,以探讨反义RNA用于治疗IL-2R表达异...
- 何承伟梁念慈朱振宇马涧泉
- 文献传递
- 大蒜素与转基因肿瘤疫苗的协同抗癌作用研究被引量：1
- 2005年
- 目的:评估大蒜素与B7·1转基因肿瘤疫苗对膀胱癌的协同抗癌效果。方法:脂质体法转染鼠膀胱肿瘤(MBT-2)细胞。流式细胞术测B7·1基因的转染效果。相差显微镜观察大蒜素对肿瘤细胞的细胞毒作用。动物实验检测联合治疗的抗癌效果。组织切片检测肿瘤组织中免疫反应的发生。LDH释放法测治疗后淋巴细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性。结果:约40%的转染细胞表面能表达B7·1分子。大蒜素对膀胱肿瘤细胞有直接的细胞毒作用。当B7·1转基因肿瘤疫苗与大蒜素联合应用时,具有最大的抗肿瘤效果。结论:大蒜素与转基因肿瘤疫苗具有良好的协同抗肿瘤作用。
- 王坚何承伟何惠娟董忠林立国柳建军
- 关键词：大蒜素肿瘤疫苗膀胱肿瘤
- 体外导入IL-2R反义RNA表达质粒对小鼠脾细胞活化增殖的影响
- 2002年
- 目的 观察导入白细胞介素 2受体 (IL 2R)反义RNA真核表达质粒对体外培养的小鼠脾细胞活化增殖的影响及其机制的探讨。方法 用粘附辅助脂质体法把IL 2R反义RNA真核表达质粒转染脾细胞 ,用丝裂原刺激脾细胞活化增殖 ,MTT法检测细胞生长情况。狭线杂交法检测IL 2RmRNA的表达水平 ,流式细胞仪检测IL 2R的蛋白表达水平。结果 转染各重组质粒后 ,脾细胞的生长增殖受到明显抑制 ,且 pcAnti mIL 2Rαβ与 pciAnti mIL 2Rαβ组抑制率较 pcAnti mIL 2Rα及pcAnti mIL 2Rβ组的大 ,pcAnti mIL 2Rα组抑制率较pcAnti mIL 2Rβ的大。转染各重组质粒对NIH3T3细胞生长增殖无影响。转染各重组质粒后IL 2RmRNA及蛋白表达水平明显降低。结论 IL 2R反义RNA能有效抑制体外培养的小鼠脾细胞的生长 ,IL 2Rαβ融合基因反义RNA较α、β单基因反义RNA的抑制率高 ,IL 2Rα反义RNA较 β反义RNA抑制率高。初步推断 ,IL 2R反义RNA抑制细胞生长的作用是特异的 ,只针对功能性表达IL 2R的细胞。反义RNA封闭IL
- 何承伟梁念慈朱振宇何晓顺黄洁夫马涧泉
- 关键词：白细胞介素2反义脾细胞增殖
- 基因治疗中的腺相关病毒载体被引量：7
- 2005年
- 腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是基因治疗中最有希望的载体之一,它具有非致病性,对宿主免疫原性弱及广泛的细胞和组织亲嗜性等优点。本文综述了AAV在基因治疗中的最新研究进展,着重探讨了修饰AAV以改变它的亲嗜性及使用不同的启动子来进一步促进AAV在基因治疗中的应用。
- 谢辉郭黠梁念慈何承伟
- 关键词：腺相关病毒基因治疗
- 半边旗抗肿瘤有效成分对HL-60细胞DNA拓扑异构酶活性及其细胞周期的影响(英文)被引量：13
- 1999年
- 研究半边旗（Ｐｔｅｒｉｓ ｓｅｍｉｐｉｎｎａｔａ Ｌ， ＰｓＬ）有效成分５Ｆ，６Ｆ，Ａ对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ拓扑异构酶活性和细胞周期的影响．方法：应用ｐＢＲ３２２质粒ＤＮＡ作为底物测定酶的活性；细胞周期用流式细胞仪测定；应用噻唑蓝（ＭＩＴ）法测定药物对细胞生长的抑制率．结果：５Ｆ，６Ｆ，Ａ均能够抑制ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅰ，Ⅱ的活性，化合物６Ｆ作用细胞２４ ｈ后，可升高 Ｓ期和 Ｇ２／Ｍ期细胞，同时降低Ｇ０／Ｇ１期细胞，低浓度６Ｆ（５７．８和 １１５．６ｎｍｏｌ·Ｌ－１）与金雀异黄素（Ｇｅｎ）合用可增强它对ＨＬ－６０细胞的杀伤作用， ｑ＞１．１５．结论： ５Ｆ， ６Ｆ和 Ａ明显抑制ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ拓扑异构酶的活性；６Ｆ阻断细胞于 Ｇ２／Ｍ期，增强Ｇｅｎ对 ＨＬ－６０细胞的杀伤作用。
- 李金华何承伟梁念慈莫丽儿张晓
- 关键词：二萜DNA拓扑异构酶细胞周期抗肿瘤药
- 硫氧还蛋白融合表达系统表达的小鼠内皮抑素之纯化和生物学活性鉴定
- 2006年
- 目的:将硫氧还蛋白融合表达系统表达的小鼠内皮抑素(endostatin)进行纯化并对其生物学活性进行测定.方法:将含有pThioHis-endo重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达重组融合蛋白,SDS-PAGE分析表达产物为包涵体,将包涵体纯化后通过镍柱亲和层析得到纯化的、可溶性的小鼠内皮抑素,经SDS-PAGE分析鉴定.将纯化的蛋白质通过鸡胚尿囊膜血管生成抑制实验和内皮细胞抑制实验对纯化的蛋白质进行生物学活性测定.结果:经SDS-PAGE电泳分析获得了高纯度的小鼠内皮抑素重组融合蛋白,纯度可达95%,得率为0.27g/L.纯化的重组蛋白在体外能抑制鸡胚囊膜血管生成及具有抑制血管内皮细胞增殖的活性,加入重组蛋白内皮抑素5μg组与10μg组血管生成抑制率分别为(22.3±2.0)%和(47.1±4.0)%,P<0.05,和对照组经过方差分析,差异都有显著性意义;内皮细胞抑制实验可见不同剂量重组蛋白内皮抑素对内皮细胞的生长具有抑制作用[抑制率分别为(49.6±4.1)%,(53.2±2.3)%,(55.0±3.6)%,(67.1±5.7)%],经过方差分析和相关性分析,具有剂量依赖效应(r=0.984,P<0.05).结论:用硫氧还蛋白融合表达系统在大肠杆菌中表达的小鼠内皮抑素重组融合蛋白易纯化并具有高活性.
- 马卫列刘芳何承伟何振辉
- 关键词：内皮抑素融合蛋白
