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肉毒梭菌培养液澄清过滤工艺的优化被引量：1: 2013年; 目的优化肉毒梭菌培养液的澄清过滤工艺,并对过滤效果进行验证。方法选择不同型号的过滤器组合对A型肉毒梭菌培养液进行一级、二级澄清过滤,筛选最佳过滤器组合;用最佳过滤器组合对扩大培养批量的A、B、E、F型肉毒梭菌培养液进行澄清过滤。结果 P700K+50P过滤器组合对A型肉毒梭菌培养液进行一级、二级澄清过滤的效果最佳;用该过滤器组合对扩大培养批量的A、B、E、F型肉毒梭菌培养液进行澄清过滤,各型均可达到预期的试验目标。结论筛选出P700K+50P为A、B、E、F型肉毒梭菌培养液澄清过滤的最佳过滤器组合,为肉毒梭菌培养液澄清过滤工艺的进一步优化提供了实验依据。; 高建军李育合孟祥玉曹馨匀武毅刘伟涛谢小荣窦强; 关键词：肉毒梭菌培养液

马免疫血浆的稳定性研究: 2014年; 目的了解不同温度条件对马免疫血浆外观和效价的稳定性影响,为马免疫血浆的采集、分离、贮存、运输及抗毒素生产提供数据支持。方法将破伤风类毒素及肉毒A、B、E、F型类毒素制备的马免疫血浆,分别放置于2～8℃、20℃、37℃3种温度下,并分别于0、1、3、6、12个月取样,依据《中国药典》三部（2010版）的检测方法和标准,对样品进行外观检查及效价检测。结果破伤风及肉毒A、B、E、F型马免疫血浆在2～8℃条件下,放置12个月稳定性良好,外观及效价均符合《中国药典》三部（2010版）规定要求。20℃与37℃下放置的马免疫血浆随着时间的延长,外观会发生不同程度的浑浊,效价也均有不同程度的降低,低效价组比中、高效价组的效价下降明显,且温度越高效价降低幅度越大。结论马免疫血浆在2～8℃条件下质量稳定。; 段丽娟李育合谢小荣柳州孟祥玉金学敏杨俊杰高建军; 关键词：破伤风类毒素效价稳定性

辛酸沉淀结合阴离子交换层析纯化马IgG的研究被引量：3: 2015年; 目的以辛酸沉淀结合离子交换层析纯化破伤风抗毒素马免疫血浆,获得高质量的马IgG,为抗毒素F(ab')2的制备奠定基础。方法通过对辛酸沉淀马血浆过程中的pH、辛酸浓度以及血浆稀释倍数的实验设计(DoE),研究不同条件对IgG纯度、效价、比活性、浊度以及过滤速度的影响,确定各工艺参数的可操作区间,并结合Capto DEAE阴离子交换层析以流穿模式进一步纯化IgG。结果马血浆经一步辛酸沉淀获得的IgG纯度(SDSPAGE)大于92%、分子排阻色谱(SEC)纯度大于95%,比活性较血浆提高2.14±0.29倍;辛酸沉淀后的IgG样品经阴离子交换层析,可有效去除聚合体以及小分子杂质,将纯度提高至95%(SDS-PAGE)和98%(SEC)。结论马血浆经辛酸沉淀和阴离子交换层析可获得高纯度、高比活的IgG。; 杨俊杰段丽娟金学敏孙烈英任正祥孟祥玉张金高建军; 关键词：破伤风抗毒素辛酸离子交换层析

不同工艺制备的E型肉毒毒素及其类毒素的免疫原性分析: 2014年; 目的用不同工艺制备E型肉毒毒素,脱毒制备类毒素,并分析其免疫原性。方法分别用菌体内提取法和酸沉淀法制备E型肉毒毒素,进行毒素型特异性检定及毒力测定后,脱毒制备类毒素,参考《中国药典》三部(2010版)进行结合价、蛋白氮(PN)含量、总氮(TN)含量、p H测定及脱毒检查和毒性逆转试验。选择结合价较高的2批类毒素配制3组抗原,经家兔皮下进行基础免疫(共2针)和3程超免疫(2针/程),每针间隔14 d,每程免疫间隔30 d,均于第2针免疫后第20天,经耳缘静脉采血,分离血清,参考《中国药典》三部(2010版)附录ⅪH肉毒抗毒素效价检测法,检测抗体效价。结果 55、120 h菌体内提取毒素(201112001和201112003批)及55、120 h酸沉淀提取毒素(201112002和201112004批)均为E型肉毒毒素,毒力分别为6.2×103、5.0×102、4.5×102、6.5×103 LD50/ml;各组类毒素脱毒检查和毒性逆转试验结果均符合《中国药典》三部(2010版)规定,55 h酸沉淀提取毒素其类毒素TN、PN含量最高,120 h菌体内提取毒素最低。制备的3组抗原(201112001-1、201112004-1及201112004-2批)抗原结合价分别为900、2 100和900 BU/ml;两种方法制备的类毒素按最高结合价配制抗原,免疫后的血清效价差异无统计学意义(P>0.05),两种方法制备的类毒素按相同结合价配制抗原及同批类毒素配制的不同结合价抗原,免疫后的血清效价差异均有统计学意义(P<0.05)。结论用酸沉淀法从120 h培养液中提取毒素可获得与55 h菌体内提取毒素相同免疫原性的类毒素。酸沉淀法操作简便,更适宜马匹免疫用E型肉毒抗原的规模化生产。; 高建军李育合孟祥玉武毅谢小荣金学敏杨俊杰段丽娟; 关键词：类毒素免疫原性

新佐剂——Montanide ISA 50V2在马免疫中的应用研究被引量：3: 2013年; 目的研究新佐剂-Montanide ISA 50V2在马免疫中的应用,制定合理的免疫程序,提高马免疫血清效价。方法用Montanide ISA 50V2乳化A型和F型肉毒类毒素制备成油乳抗原,免疫家兔和马,并与福氏不完全佐剂进行对比。结果在马免疫程序中,Montanide ISA 50V2与福氏不完全佐剂交替使用效果更好,免疫效价较高。结论在进一步试验确证后,将Montanide ISA 50V2作为佐剂应用于马免疫中,以获得更高的免疫血清的效价。; 刘卫涛柳洲李育合谢小荣孟祥玉张廷芬高建军; 关键词：ISA 免疫程序

A型肉毒神经毒素纯化及其免疫原性研究被引量：1: 2012年; 采用阴离子交换柱层析法和凝胶过滤柱层析法纯化A型肉毒神经毒素复合物,通过SDS-PAGE法分析不同纯化条件下目标物的纯度和完整性,并以纯化物免疫BALB/c小鼠研究其免疫原性.结果显示,离子交换柱层析法纯化效果优于凝胶过滤柱层析法.; 曹馨匀刘卫涛张廷芬孟祥玉; 关键词：A型肉毒毒素纯化类毒素免疫原性

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孟祥玉

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