张春涛
- 作品数:106 被引量:271H指数:9
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技重大专项卫生部艾滋病防治应用性研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学经济管理更多>>
- 对ELISPOT室间质控及其检测样品要求的初步探讨被引量:1
- 2007年
- 目前检测细胞免疫最常用的方法是ELISPOT方法,ELISPOT方法结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术,能够在特异性细胞免疫应答过程中检测产生细胞因子的细胞数目,在单细胞水平分析细胞因子的分泌情况,具有灵敏度高、操作简便以及可检测活细胞功能等优点。然而该方法检测的对象是细胞,因此,细胞的分离、保存、复苏、培养、运输以及检测环境和具体的操作等多个环节都可能会影响实验结果。同一实验室不同操作者以及不同实验室之间的检测结果都可能会存在差异,而且同一实验室或同一操作者使用不同的试剂检测同一样品所得到的结果也可能不同。因此,为减少各环节对检测结果的影响,提高ELISPOT检测的准确性和精确性,使在各种环境条件下检测的结果具有可比性,建立统一的质量评价体系是很有必要的。本研究对用于质量控制细胞的保存时间以及数目等对检测的影响进行了初步探索,并分发到不同的实验室进行检测,比较其差异。现将结果报道如下。
- 张春涛朱义鑫刘春雨于运威吴庆军王佑春
- 关键词:ELISPOT特异性细胞免疫应答室间质控细胞培养技术细胞因子
- 胰岛素定量标记免疫分析试剂盒行业标准的建立和验证
- 2012年
- 目的:建立胰岛素定量标记免疫分析试剂盒的行业标准,并进行试验验证。方法:选择不同方法的8种胰岛素定量标记免疫分析试剂盒,按照拟定行业标准规定,对外观、线性、最低检出限、准确性、精密度和稳定性等项目进行验证。结果:除某些试剂盒的个别指标不能满足要求外,大部分试剂盒均能满足拟定行标中的所有要求。结论:胰岛素定量标记免疫分析试剂盒行业标准制定合理、可操作性强。该标准的制定有助于统一胰岛素定量标记免疫分析试剂盒的质量标准,为其生产、检验、流通及临床应用及其他领域的监管提供依据。
- 于婷沈舒张春涛黄颖
- 关键词:胰岛素试剂盒
- 我国不同艾滋病候选疫苗小鼠细胞免疫应答评价
- 2010年
- 目的 比较我国不同艾滋病(AIDS)候选疫苗小鼠细胞免疫应答水平.方法 将我国6种艾滋病候选疫苗按其各自免疫程序,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞,利用酶联免疫斑点法(ELISPOT)与胞内因子染色法(ICS)检测其对HIV特异多肽的细胞免疫应答水平.结果 6种艾滋病候选疫苗利用潜在T细胞表位(PTE)Gag、Env和Pol肽库和ELISPOT法检测IFN-γ的分泌情况,结果各疫苗的小鼠细胞免疫阳转率为70%~100%,各疫苗引起特异细胞免疫应答的反应肽库不同,强度亦不相同.1#和2#疫苗利用ELISPOT检测分泌Th1类细胞因子IFN-γ和IL-2的小鼠脾细胞数量,两疫苗的IFN-γ和IL-2检测结果均呈中度相关性(r1=0.62,P1<0.01;r2=0.79,P2<0.01).ELISPOT和ICS检测1#疫苗免疫后分泌IFN-γ的小鼠脾细胞数,结果两种方法的小鼠阳转率均为66.7%(10/15),ELISPOT阳性细胞数与ICS阳性细胞比例呈中度相关(r=0.55,P<0.05).结论 我国不同AIDS候选疫苗引起的小鼠细胞免疫应答在广度和强度上存在差别.ELISPOT或ICS检测IFN-γ等Th1类细胞因子可作为疫苗诱导小鼠细胞免疫应答的评价指标.
- 黄维金张春涛赵晨燕聂建辉宋爱京鲁凤民王佑春
- 关键词:艾滋病疫苗细胞免疫应答
- 以假病毒为基础的HIV-1中和抗体检测体系的建立以及初步应用被引量:3
- 2008年
- 目的建立以假病毒为基础的HIV-1中和抗体检测方法,并对其进行初步应用。方法从重组质粒中扩增出gp160基因片段,并克隆到pcDNA3.1质粒上,酶切鉴定得到阳性克隆。将阳性克隆分别和pSG3/Xenv质粒共转染获得假病毒。用假病毒分别检测单克隆抗体和HIV-1抗体阳性血清的中和活性。结果成功地获得了4株假病毒CHB01、CHB02、CHBC03和CHAE04。单克隆抗体4E10可以中和4株假病毒;单克隆抗体2F5不能中和CHBC03假病毒株,但可以中和CHB01、CHB02和CHAE04假病毒株;单克隆抗体IgG1b12可以中和CHBC03、CHB01和CHB02假病毒株,则不能中和CHAE04假病毒株。43份HIV-1抗体阳性血清中针对不同假病毒的中和抗体明显不同。结论所获得的假病毒可以用于中和抗体的检测,但不同假病毒株的中和特性不同。
- 种辉辉洪坤学张春涛聂建辉孔维王佑春
- 关键词:HIV-1中和抗体假病毒
- 结核抗体检测试剂国家参考品的建立
- 2023年
- 目的:制备结核抗体检测试剂的国家参考品。方法:利用9家公司的胶体金和酶联免疫法结核抗体检测试剂对参考品原料进行筛选和复核,分装后由9家公司协作标定,最终确定国家参考品的组成和质量标准,同时,对参考品的均匀性和稳定性进行了考察。结果:协作标定样本中预期为阳性的部分,不同试剂间检出的差异较大。根据协作标定结果和适当督促的原则,确定了参考品由10份阴性参考品、10份阳性参考品、5份最低检出限参考品和1份精密度参考品组成。参考品的质量标准确定为:阴性参考品符合率应为10/10;阳性参考品符合率应≥9/10;最低检出限参考品S1~S5中S1和S2应均为阳性,S3~S5可为阳性或阴性;精密度参考品R平行检测10次,结果应均为阳性,且检测结果的变异系数(CV值)应≤15%。本参考品的均匀性为各分装样品间差异不超出30%,且稳定性条件处理组与-20℃对照组无差异。结论:本研究首次建立了一套适用于酶联免疫法和固相蛋白芯片法结核抗体检测试剂的国家参考品,可用于该类试剂的质量评价。
- 石大伟王威杨晓于丽黄嘉维张春涛许四宏
- 流式细胞术产品质量标准的建立及应用
- 2010年
- 流式细胞术(Flow cytometry,FCM)是一种对液流中排成单列的细胞或其他生物微粒逐个进行快速定量分析及分选的技术,为人类疾病的检测提供了快速有效的手段。目前已有很多商品化的FCM试剂盒面世,应用于免疫缺陷症、遗传病、细胞周期分析及肿瘤诊断、分型、愈后监测等领域。本文依据标记免疫类产品常规分析方法及产品说明书提供的评价方法,从FCM试剂的外观、准确性、稀释线性、精密性和染色稳定性等要点出发,对FCM产品质量标准的建立及应用作一综述。
- 李丽莉高尚先张春涛
- 关键词:流式细胞术淋巴细胞亚群
- 我国不同艾滋病候选疫苗小鼠细胞免疫应答评价
- 目的比较我国不同艾滋病(AIDS)候选疫苗小鼠细胞免疫应答水平。方法将我国6种艾滋病候选疫苗按其各自免疫程序,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞,利用酶联免疫斑点法(ELISPOT)与胞内因子染色法(ICS)检测其对HIV...
- 黄维金张春涛赵晨燕聂建辉宋爱京王佑春
- 关键词:艾滋病疫苗细胞免疫应答
- 文献传递
- 五厂家EB病毒抗体检测试剂盒血清学诊断鼻咽癌的比较被引量:4
- 2014年
- 目的通过比较EB病毒抗体检测试剂盒血清学诊断鼻咽癌的准确性和检测结果的一致性,为试剂盒在临床上的使用选择和性能改进提供依据。方法使用五厂家的EB病毒衣壳抗原IgA和IgG抗体检测试剂盒(VCA IgA和VCA IgG试剂盒)、核抗原1 IgA和IgG抗体检测试剂盒(EBNA1 IgA和EBNA1 IgG试剂盒)、早期抗原IgA和IgG抗体检测试剂盒(EA IgA和EA IgG试剂盒)以及Zta IgA抗体检测试剂盒,分别检测33例鼻咽癌患者(NPC)、30例健康体检者(HD)和41例非鼻咽癌的其他肿瘤患者(NNPC)血清或血浆样本。结果 A厂家的VCA IgA试剂盒灵敏度高于其他厂家同品种试剂盒,但对于NNPC特异度最低(36.6%);而D厂家VCA IgA试剂盒的特异度最高(97.6%),且对HD的特异度均大于90%。B和D厂家的EBNA1 IgA试剂盒间阳性、阴性符合率分别为92.1%和100.0%。A和E厂家的EA IgA试剂盒的灵敏度均较低而特异度高,试剂盒间阳性符合率低(39.4%),阴性符合率高(98.6%);而VCA IgG试剂盒的灵敏度高但特异度低。A和C厂家的EBNA1 IgG试剂盒的灵敏度高(100.0%,97.0%)但特异度低(3.3%,13.3%)。C厂家EA IgG试剂盒检测所有样本结果均为阴性。结论五个不同厂家VCA IgA、EA IgA试剂盒诊断鼻咽癌的准确性和检测结果的一致性存在差异,特别是A厂家和其他国内厂家同品种试剂间差异明显,需根据临床目的进行选择。三家国产VCA IgA试剂盒的灵敏度需进一步提高。相反,EBNA IgA试剂盒诊断鼻咽癌的准确性和结果一致性较好。单独使用VCA IgG和EBNA1 IgG试剂盒血清学诊断鼻咽癌的特异度差,其判读界值可能需根据检测目的进行调整。
- 石大伟王盼盼季明芳李玉彬周海卫沈舒张春涛
- 关键词:EB病毒EBNA1EA鼻咽癌
- 第二代甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂参考品的建立被引量:6
- 2016年
- 目的建立第二代甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂参考品并制定其质量标准,为相应试剂的质量控制和评价提供依据。方法收集甲型H1N1流感病毒阳性及阴性菌毒株,对其进行组织细胞半数感染量(TCID50)测定及HA基因测序,经不同甲型H1N1流感病毒核酸诊断试剂筛查检测后,选择合适样本进行冻干组成参考品;使用不同试剂对参考品进行协作标定,并考察其稳定性。结果甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂参考品由17份样本组成,包括阳性参考品5份、阴性参考品10份、精密性参考品1份及最低检出限参考品1份;稳定性考核结果表明25℃放置24h及反复冻融3次均不影响参考品的稳定性。结论建立了第二代甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂参考品并制定了质量标准。
- 周海卫沈舒石大伟刘艳田亚宾张春涛
- 关键词:甲型H1N1流感病毒参考品
- 2009年度甲胎蛋白(AFP)体外诊断试剂抽验质量分析被引量:2
- 2010年
- 目的对14家企业的19批次的甲胎蛋白(AFP)体外诊断试剂进行评价,考察我国该类试剂的质量。方法依据产品注册标准和自拟标准对所有试剂进行检测。结果与结论 18批次试剂符合产品注册标准,自拟标准检测16批次试剂符合关于剂量反应曲线的线性相关系数的要求,16批次试剂符合准确性的要求,15批次试剂检测4份临床质控血结果差别显著(P<0.05)。各企业AFP体外诊断试剂产品注册标准存在差异,直接影响产品质量,建议加强该类标准的制修订工作,对三类体外诊断试剂的注册检验实行统一管理。
- 张春涛黄颖于婷李丽莉孙彬裕沈舒高尚先
- 关键词:甲胎蛋白体外诊断试剂