周海卫
- 作品数：52 被引量：133H指数：7
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项北京市朝阳区艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病综合防治更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学化学工程机械工程更多>>
- 新型冠状病毒抗原检测试剂盒质量评价要求
- 本文件给出了新型冠状病毒抗原检测试剂盒的质量评价要求、试验方法、标签和说明书、包装、运输和贮存。本文件适用于以咽拭子、鼻拭子、唾液等上呼吸道样本，血清、血浆及全血等血液样本，以及痰液、呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺泡灌洗...
- 周海卫 刘东来 麻婷婷 许庭莹 许四宏 杨振 解怡 孙莉 鲁学文 袁静
- 肠道病毒71型核酸检测试剂国家参考品的建立
- 2020年
- 目的建立肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)核酸检测试剂国家参考品,用于该类试剂的质量评价。方法收集培养多株EV株,包括不同亚型的EV71及不同型别的柯萨奇病毒(Coxsackievirus)株。经测序分析确证,再经商业化核酸检测试剂筛选验证后,分装、冻干组成国家参考品盘。利用数字PCR法(droplet digital PCR,ddPCR)对EV71代表性病毒株C4亚型进行核酸定量,作为最低检测限参考品。采用不同企业的试剂对参考品进行协作标定,分析标定后结果,最终确定参考品的质量标准,并考察其稳定性。结果EV71核酸检测试剂国家参考品由6支阳性参考品、8支阴性参考品、1份精密度参考品和1支检测限参考品组成。其质量标准为:阳性参考品符合率应为6/6;阴性参考品符合率应为8/8;检测限应不高于3.6×10^3 copies/mL;重复检测精密度参考品10次,要求10次结果均为阳性,且对于荧光PCR法,要求其Ct值的CV<5.0%。阳性参考品各样品在室温放置1 d和反复冻融3次条件下相对比较稳定。结论成功建立了评价EV71核酸检测试剂质量的国家参考品。
- 田亚宾周海卫刘东来沈舒许四宏张春涛
- 关键词：肠道病毒71型国家参考品
- 梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品的研制被引量：1
- 2019年
- 目的建立梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品。方法通过对84份血浆的复核、确证,组建梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品,并将3份效价检测用参考品溯源至国际标准品,经5家实验室的协助标定,确定参考品的质量标准,并对参考品进行均匀性及稳定性评估。结果梅毒非特异性抗体检测试剂国家参考品由25份阴性及25份阳性样品组成,3份效价检测用参考品的效价定值分别为12、10和5 IU/mL。协助标定确证25份阴性参考品均为阴性,25份阳性参考品均为阳性,效价参考品的效价检测值均≤0.625 IU/mL。参考品的均匀性及稳定性均符合要求。结论研制的参考品可作为梅毒非特异性抗体检测试剂的质量控制和评价使用。
- 夏德菊王薇许四宏周海卫张春涛
- 关键词：梅毒国家参考品
- 水痘带状疱疹病毒IgG抗体检测试剂国家参考品的研制
- 田亚宾周海卫刘东来刘艳沈舒石大伟张春涛
- AIDS患者高效一线抗逆转录病毒治疗失败后HIV耐药基因型分析被引量：14
- 2013年
- 目的研究一线高效抗逆转录病毒治疗(HAART)失败的艾滋病患者HIV基因型耐药突变情况。方法采集就诊于首都医科大学附属北京地坛医院接受一线HAART治疗失败的共30例艾滋病患者的外周血,分离血浆后,应用巢式PCR方法扩增HIV蛋白酶1～99个氨基酸和逆转录酶前300个氨基酸序列基因,PCR产物经纯化后测序,将获得的序列与美国斯坦福大学耐药数据库比对,得出患者对药物的耐药性解释。结果 30例患者血浆中,扩增成功并得到测序结果28例,扩增成功率为93%(28/30)。其中,27例患者存在耐药突变。在逆转录酶(RT)区检测到48种耐药突变,其中M184V、D67G、K70R、K70K/R、A62V、K219E、K65R、V75I、T215F、D67N是核苷类逆转录酶区发生率>10%的突变,Y181C、G190A、K103N、V179D是非核苷类逆转录酶(NRT)区发生率>10%的突变;在蛋白酶(PR)区检测到A71T、Q58E、A71V、N83D/N4种次要突变。在核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)中,89%的患者出现了对拉米夫定(3TC)和恩曲他滨(FTC)的高、中度耐药,对齐多夫定(AZT)、司他夫定(D4T)、替诺福韦酯(TDF)等也出现不同比例的高、中度耐药;其中TDF和AZT的高、中度耐药率分别是14%和29%。在非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)中,50%以上的患者出现对依非韦伦(EFV)、奈韦拉平(NVP)等的高中度耐药;蛋白酶区的次要突变引起了蛋白酶抑制剂(PI)类药物的潜在次要突变,而未出现高、中度耐药。结论患者抗病毒治疗失败主要是发生了对NRTI和NNRTI的耐药,更换二线治疗方案时,TDF可能比AZT更适于和PI联合进行抗病毒治疗。
- 李彦媚赵红心周海卫肖江肖江张雯黄英秀
- 关键词：高效抗逆转录病毒治疗耐药
- 人细小病毒B19核酸检测试剂国家参考品的建立被引量：2
- 2020年
- 目的建立人细小病毒B19核酸检测试剂国家参考品并制定质量标准。方法收集并筛选人细小病毒核酸阳性和阴性血浆样本,建立人细小病毒B19核酸检测试剂国家参考品,溯源至世界卫生组织第三代人细小病毒B19核酸国际标准品,并对参考品稳定性和均匀性进行考核。结果建立的国家参考品包括阳性参考品8份、阴性参考品10份、精密度参考品2份和最低检出限参考品2份。经溯源标定,最低检出限参考品L1与L2的浓度分别为2.4×10^3IU/mL与2.4×10^2IU/mL;参考品均匀性符合要求,室温(25℃)放置24 h、反复冻融3次均未影响参考品的稳定性。国家参考品的质量标准为阳性符合率8/8,阴性符合率10/10,精密度要求两个浓度水平的Ct值或定量值变异系数均不高于5.0%,最低检出限要求浓度为2.4×10^3IU/mL的L1应为人细小病毒B19核酸阳性,浓度为2.4×10^2IU/mL的L2可为阳性或阴性。结论建立了人细小病毒B19核酸检测试剂国家参考品,可用于企业试剂研发的质量控制及评价。
- 麻婷婷许四宏周海卫
- 关键词：人细小病毒B19核酸检测参考品
- EB病毒衣壳抗原IgA抗体检测试剂参考品的建立被引量：2
- 2015年
- 目的建立EB病毒衣壳抗原IgA抗体检测试剂国家参考品,为相关试剂盒的质量控制和评价提供依据。方法通过收集鼻咽癌患者及正常人血浆,对其进行酶联免疫法抗体筛查,膜条法和免疫荧光法抗体确证,获得VCA-IgA抗体阳性样本;使用市场常用的7种EB病毒衣壳抗原IgA抗体检测试剂盒对候选样本进行协作标定,确定EB病毒衣壳抗原IgA抗体检测试剂参考品的组成及质量标准;并对其进行稳定性考核。结果协作标定结果为阴性参考品符合率9/10~10/10,阳性参考品符合率7/10~10/10,精密性1.0%~10.7%,最低检出限最低为1∶4,最高为1∶16;4℃放置1周及2周、室温(25℃)放置3d及反复冻融5次均不影响参考品的稳定性。结论成功建立了EB病毒衣壳抗原IgA抗体检测试剂参考品,可用于该类试剂的质量控制。
- 周海卫石大伟沈舒曹丽梅张春涛
- 关键词：EB病毒参考品
- 人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂国家参考品的建立及应用被引量：3
- 2018年
- 目的建立人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂国家参考品并对试剂质量进行评价。方法收集并筛选B19 IgG抗体阳性和阴性样本,建立人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂国家参考品,包括:阳性参考品10份、阴性参考品10份、重复性参考品1份和最低检测限参考品5份,以WHO第二代B19抗体(IgG)参考品进行溯源和标定,并进行稳定性考察。使用建立的参考品对人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂盒进行质量评价。结果重复性参考品的标定结果为16 IU/m L,最低检测限参考品(S1~S4)的标定结果分别为29、14、7、4 IU/m L,S5为阴性基质血浆;室温(25℃)放置3d、4℃放置5d及反复冻融5次均不影响参考品的稳定性;试剂质量评价结果显示,阴性符合率1家为9/10,其余均为10/10,阳性符合率均为10/10,重复性均符合要求,最低检测限结果 1家为14 IU/m L、2家为7 IU/m L、3家为4 IU/m L。结论建立的参考品能够用于人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂盒的质量控制。
- 周海卫田亚宾郭世富黄颖张春涛
- 关键词：人细小病毒B19IGG抗体参考品
- 高效抗逆转录病毒治疗病毒学抑制对HIV-1嗜性转换的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨高效抗逆转录病毒治疗(HAART)病毒学抑制后HIV-1嗜性的转换。方法提取治疗前和治疗48周患者的外周血单个核细胞中基因组DNA,对HIV-1 env基因的C2-V5区进行(nested-PCR)扩增和测序。基于V3区碱基序列,通过Geno2pheno软件预测HIV-1的嗜性。结果经HAART 48周后,其中11例患者病毒得到完全抑制,血浆病毒载量低于检测下限(20拷贝/ml),CD4+T淋巴细胞计数显著增加(均值自208 cells/ml上升至48周的418 cells/ml,Z=-2.934,P=0.001)。其中1例患者出现病毒嗜性由CCR5向CXCR4的转换,另外10例患者保持CCR5嗜性,V3环所带正电荷(Z=-1.000,P=0.317)和净电荷(Z=-1.000,P=0.317)均未发生显著性改变。结论 HAART后病毒获得抑制,可能延缓CXCR4嗜性病毒株的出现,这些患者可考虑使用CCR5拮抗剂作为优化方案的选择。
- 黄英秀周海卫李彦媚张雯苏文晶田云飞宋川郜桂菊韩宁杨涤肖江曾辉赵红心
- 关键词：高效抗逆转录病毒治疗病毒抑制HIGHLYANTIRETROVIRAL
- 肺炎衣原体IgG抗体检测试剂用国家参考品的制备和标定
- 2019年
- 目的:制备肺炎衣原体(Chlamydia pneumonia,CP)IgG抗体检测试剂的国家参考品。方法:利用国内外9个厂家ELISA试剂和免疫印迹法试剂对候选血浆样本进行筛选和确认,确定肺炎衣原体检测试剂国家参考盘。通过5家试剂生产厂家的协作标定最终确定国家参考品的质量标准,用一种试剂盒对确定的参考品盘的均匀性和稳定性进行全面考察。结果:参考品由10份支阴性参考品、10份阳性参考品、5份最低检测限参考品和1份重复性参考品组成。质量标准为:阴性参考品符合率至少为9/10;阳性参考品符合率至少为9/10;检出下限样本稀释度不低于1∶4;连续检测重复性参考品10次,其A值的RSD不高于10. 0%。该参考盘均匀性较好,-20℃长期保存稳定性较好,37℃保存影响其稳定性。结论:建立一套适用于ELISA方法的肺炎衣原体IgG抗体检测试剂用国家参考品,可用于该类试剂盒的质量评价。
- 刘艳周海卫沈舒田亚宾白东亭王玉梅张春涛
- 关键词：肺炎衣原体IGG抗体诊断试剂国家参考品酶联免疫分析法
