李丙军 作品数:23 被引量:65 H指数:5 供职机构: 南京军区疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省科技支撑计划项目 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 理学 生物学 更多>>
用于以RT-LAMP法检测H7N9禽流感病毒的引物、试剂盒、检测方法 本发明涉及一种用于以RT-LAMP法检测H7N9禽流感病毒的引物、试剂盒、检测方法。该引物包括H7引物组和N9引物组,可有效检测H7N9禽流感病毒。该试剂盒包括前述引物,可用于检测H7N9禽流感病毒。该检测方法采用前述试... 王长军 张锦海 李丙军 胡丹 吕恒文献传递 我国恙虫病宿主动物的研究概况 被引量:11 2013年 我国恙虫病按季节分布可分为两型:夏季型:流行于南方(浙江、福建、广东、广西、云南等省区);主要宿主动物为啮齿目的黄毛鼠、黄胸鼠、褐家鼠、北社鼠、黑线姬鼠,食虫目的臭鼩鼱;主要媒介为地里纤恙螨;流行于5-10月。秋冬型:流行于江苏、山东等省;主要宿主动物为啮齿目的黑线姬鼠、褐家鼠、大仓鼠,食虫目的大麝鼩;主要媒介为小盾纤恙螨;流行于10-12月。 吴光华 王长军 李丙军 姜志宽 丁凌云 王莉关键词:恙虫病 宿主动物 啮齿目 食虫目 HLA-DPA1/B1基因多态性与丙型肝炎病毒易感性和感染转归的关联研究 被引量:5 2016年 目的探讨江苏地区有偿献血高危人群白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-DP A1/B1基因多态性与丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染转归的关联性。方法采用病例-对照(慢性丙型肝炎患者258人,自限清除者170人,健康对照者320人)研究,通过聚合酶链反应序列为基础的基因分型(polymerase chain reaction-sequence based genotyping,PCR-SBT)技术对3组人群HLA-DPA1/B1等位基因进行分析,并比较各等位基因频率。结果 HCV感染组的HLA-DPA1*0103与HLA-DPB1*0201等位基因频率高于健康对照组(40.7%vs32.2%,P=0.003)(22.0%vs 12.5%,P<0.001)。HCV持续感染组的HLA-DPA1*0201与HLA-DPB1*1401等位基因频率低于自限清除组(7.9%vs 13.8%,P=0.018)(0.0%vs 2.1%,P=0.015)。HLA-DPA1/B1单倍型分析发现,HCV感染组的DPB1*0501-DPA1*0103和DPB1*0201-DPA1*0103单倍型频率高于健康对照组(P<0.001)。而HCV感染组单倍型DPB1*0202-DPA1*0202的频率低于健康对照组(P<0.001)。HCV持续感染组的单倍型DPB1*0202-DPA1*0202的基因频率高于HCV自限清除组(P=0.004)。HCV持续感染组DPB1*0402-DPA1*0103单倍型频率又低于HCV自限清除组(P=0.008)。结论在江苏地区有偿献血高危人群中,HCV感染转归与HLA-DPA1/B1基因多态性之间存在一定关联性。 裴家平 季晓伟 蒋龙凤 邓小昭 徐孝东 肖雯 丁伟良 张锦海 王长军 朱丹燕 李丙军关键词:肝炎病毒属 HLA抗原 基因频率 上海世博会防化医学应急救援保障的经验与思考 被引量:2 2013年 2010年,第41届世博会在上海举办,根据上级有关世博安保工作的部署和要求,由我部牵头组建“三防”医学救援队执行安保任务。我们遵照上级的命令和指示,与各有关单位密切协同,借鉴既往大型活动的安保经验[1-2],扎实做好“三防”医学应急救援保障工作,圆满完成了世博安保“三防”医学救援备勤任务。化学事件是世博会安全面临的现实威胁之一,本文就世博会防化医学应急救援的主要经验总结如下。 毛应华 杨龙 李丙军 陈乐如 谭维国 荣曙 曹勇平关键词:防化医学 应急救援 上海世博会 一种太阳能捕蚊装置的研制及效果观察 目的:研制一种太阳能捕蚊装置并观察捕蚊效果.方法:利用12V太阳能板及蓄电池收集太阳能,利用定时器控制捕蚊灯启动时间,利用醋酸和碳酸钠反应获得CO2.结果:太阳能捕蚊灯夏季太阳直射1d,可供两个捕蚊灯(6V)同时工作6~... 谭伟龙 李丙军 王长军 姜志宽 郑剑 贾德胜 韩招久关键词:功能分析 文献传递 恙虫病东方体合肥分离株截短56kDa蛋白抗原表达及活性分析 2014年 本文获得恙虫病东方体合肥分离株截短56kDa外膜蛋白基因工程纯化抗原,并鉴定其免疫学活性,为进一步研制广谱诊断试剂、疫苗以及分析其在东方体致病的分子机制奠定基础。我们通过DNA Star和Mega等软件对含有440个氨基酸的合肥株56kDa蛋白序列进行抗原性分析;将合肥株56kDa截短蛋白基因克隆至原核表达载体pET28a获重组质粒,转入大肠杆菌E.coli BL21感受态中,经IPTG诱导,SDS—PAGE电泳分析检测蛋白表达;采用亲和层析法纯化目的蛋白,Western-blot及ELISA法鉴定其免疫学活性。序列分析发现合肥分离株56kDa蛋白可分为4个保守区和3个可变区,抗原性分析结果显示,其保守区的亲水性和抗原性均有很高峰值。SDS—PAGE电泳显示约56kDa的目的重组蛋白表达条带,Western—blot分析显示该重组蛋白可与恙虫病病人血清反应,阴性血清则未出现相应印迹,ELISA分析结果显示该蛋白最低浓度为80ng/μL时仍可检出阳性血清;5μg/mL蛋白可检测阳性血清滴度高达1:12800,证实其具有较强反应原性。本实验获得恙虫病东方体合肥株56kDa截短外膜蛋白基因工程抗原具有良好的抗原活性,有望进一步应用于恙虫病的诊断、疫苗研制及致病机制分析。 耿美玲 郑峰 吕恒 朱进 胡丹 郝丽娜 张凤玉 龚秀芳 李丙军 李先富 潘秀珍 王长军 操敏关键词:恙虫病东方体 抗原性 基因表达 建立染料法荧光定量PCR检测恙虫病东方体 被引量:2 2014年 目的建立染料法荧光定量PCR检测恙虫病东方体。方法根据恙虫病东方体56kD外膜蛋白基因序列设计特异性引物,建立染料法(SYBRgreenI)实时荧光定量PCR,评估其灵敏性及特异性;并对恙虫病东方体鸡胚培养物、东方体感染小白鼠脏器标本以及恙虫病病人血样等多种样本进行检测。结果建立的荧光定量PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r2=0.99),灵敏性评估显示20¨l体系单PCR反应管靶基因大于28个拷贝即可被有效检测,最低检出浓度为2拷贝/¨l,比普通PCR检测方法提高1~2个数量级,并且具有较好的重复性;建立的SYBRI染料法具有良好的特异性,与立氏立克次体R株等其他5种立克次体,以及被检测的其他几种病原菌DNA模板均不发生特异性扩增;用建立的染料法对东方体鸡胚培养物、东方体感染动物脏器,以及采集的现场恙虫病病人血样共59份标本进行检测,其中57份检出阳性。用该定量PCR检测恙虫病东方体实验感染小鼠的血、脾脏、肾脏、肝脏标本,结果脾脏中东方体检出量最多,肝脏和肾脏次之,血中的恙虫病东方体量较低。结论本研究建立荧光定量PCR方法均具有很高的特异性和敏感性,适合各种样本中东方体的快速检测,可用于实验室的快速诊断。 耿美玲 操敏 张锦海 胡丹 郝丽娜 张凤玉 龚秀芳 李丙军 潘秀珍 王长军关键词:恙虫病 荧光定量PCR法 松节油基萜类化合物对德国小蠊驱避活性及定量构效关系研究 2013年 本研究测试了26个松节油基萜类化合物对德国小蠊的驱避活性,并分析了定量构效关系。20个化合物表现出不同程度的正向驱避活性,其中薄荷醇的驱避活性最高,驱避率为69.8%。利用Gaussian软件构建和优化26个化合物结构,再利用AMPAC和CODESSA软件计算化合物的结构描述符;启发式方法对描述符进行筛选及驱避化合物结构描述符与驱避率之间的定量构效关系模型的建立,获得R2为0.7923的最优模型,即驱避率(%)Y=269.13+15.36X1-77.16X2+0.83X,+1.38X4+0.83X5+2.58X6。该模型显示,影响萜类德国小蠊驱避活性的最主要的6个描述符X1、X2、X3、X4、X5、X6分别为氢原子最大原子态能、原子表面带正电部分区域相对于总带电区域的比例分数、分子总偶极的杂化成分、碳原子最大原子态能、原子表面带负电部分区域相对于总带电区域的比例分数、Onsager—Kirkwood溶解能的图像。 韩招久 李丙军 姜志宽 廖圣良 王宗德 谭伟龙 陆年宏 郑卫青 郑剑 贾德胜关键词:德国小蠊 萜类化合物 定量构效关系 汉坦病毒S基因的克隆及体外转录 被引量:2 2014年 目的:通过基因克隆和体外转录,获得汉坦病毒汉滩型76118株及汉城型R22株S基因的RNA全长cRNA,为汉坦病毒病原学检测提供阳性定量标准品。方法:设计汉滩型76118株和汉城型R22株S基因克隆引物,PCR获得相应片段,分别克隆至含双启动子的PCRⅡ载体中,测序鉴定无误后,重组质粒分别经内切酶SpeⅠ、SacⅠ线性化,用T7 RNA聚合酶进行体外转录,产物经DNase处理、纯化后测定浓度,经RT-PCR验证。结果:获得汉滩型76118株及汉城型R22株S基因的cRNA片段,并可准确定量其拷贝数,76118株和R22株的质量浓度分别为80、17.58 ng/μL。结论:获得的cRNA样品可作为汉坦病毒核酸快速检测方法的阳性定量标准品。 郝丽娜 胡丹 吕恒 张锦海 张凤玉 龚秀芳 李丙军 朱进 潘秀珍 姚苹苹 张云 王长军 陈建华关键词:汉坦病毒 克隆 体外转录 2型猪链球菌89K毒力岛Ⅳ型分泌系统LAMP检测方法的建立 被引量:11 2014年 目的建立针对高致病性2型猪链球菌(Streptococcus suis 2,SS2)89K毒力岛Ⅳ型分泌系统的环介导等温扩增(100p-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。方法根据国内流行株特有89K毒力岛编码的Ⅳ型分泌系统(T4SS-89K)的virB4-89K基因保守区域设计并合成LAMP引物,通过优化反应体系和扩增条件建立T4SS-89K快速检测方法,对方法的特异性、敏感性进行评估。结果优化的LAMP反应体系具有良好的扩增效率,检测灵敏度为1.53×10^-1拷贝/反应,全部扩增检测可在60rain内完成;建立的LAMP法具有良好的特异性,与不含T4SS-89K的猪链球菌(包括1/2型、1型、3-33型),以及其他常见9种对照菌均不发生特异性扩增,而与1998和2005年疫情现场分离的高致病性SS2均可发生特异性扩增。结论建立的LAMP方法具有特异、灵敏,设备要求简单等特点,可用于高致病性SS2快速检测。 张凤玉 胡丹 吕恒 张锦海 郝丽娜 龚秀芳 操敏 郑峰 耿美玲 朱进 李丙军 潘秀珍 王长军