林志妙
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：厦门大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：厦门市科技计划项目福建省科技重点项目福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- NSE基因的克隆,表达纯化及多克隆抗体的制备
- 神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase)是糖酵解途径中一种重要的生物酶，其特异性存在于神经元、神经内分泌细胞中。血清NSE水平的变化作为敏感的病理学标志蛋白以及中枢神经系统损伤时的定量指标正...
- 林志妙
- 关键词：神经元特异性烯醇化酶多克隆抗体肿瘤标志物特异性抗体
- 文献传递
- Smurf2单克隆抗体的制备与鉴定
- 2012年
- Smad泛素调节因子家族的两个E3泛素连接酶成员Smurf1和Smurf2(Smad ubiquitin regulatory factor 1and 2)具有至少80%的同源性.为了更好地研究它们的功能,需要获得一个能区分Smurf1和Smurf2的单克隆抗体.选取Smurf2与Smurf1蛋白序列中仅有的非同源区域序列作为抗原免疫Bal b/C小鼠,成功制备若干株能稳定分泌抗Smurf2抗体的杂交瘤细胞株.对所获得的单克隆抗体的效价和特异性等进行一系列检测,结果表明该抗体能特异性地识别过表达及细胞内源Smurf2蛋白.此外该抗体能被应用于Western blot和免疫荧光实验,从而为深入研究Smurf2的细胞生物学功能提供了良好的实验基础.
- 丁宇婷林志妙李振李晓彤
- 关键词：SMURF2杂交瘤单克隆抗体
- 自制NSE单抗的鉴定及其双抗夹心ELISA方法的建立
- 2012年
- 目的:制备并鉴定NSE(Neuron-specific enolase)单克隆抗体,建立可检测NSE蛋白的双抗夹心ELISA方法。方法:用本实验室已表达纯化的NSE融合蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。采用WB、IP、IF、IHC等方法对获得的NSE单抗进行鉴定及亚型检测。利用辣根过氧化物酶标记纯化后的NSE单抗,建立一个可检测NSE蛋白的双抗夹心ELISA法。结果:通过分析和鉴定,选定2株可稳定分泌抗NSE抗体的杂交瘤细胞株,效价达4.2×107～6.5×107,亚型为IgG2b。免疫印迹结果显示,该抗体不仅能识别细胞内源NSE蛋白,还能识别分泌到细胞培养上清液中的NSE蛋白,此外还可用于免疫荧光及免疫组化检测。文中所建立的双抗夹心ELISA法,最低检测极限为8.85 ng/ml。结论:成功获得了效价高、灵敏度好及特异性强的NSE单抗,建立了一个双抗体夹心ELISA检测系统,具有良好的临床应用前景。
- 丁焕弟林志妙杨赟于占娇龚慧婷李晓彤
- 关键词：单克隆抗体双抗体夹心ELISA
