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檀家俊: 作品数：14 被引量：21H指数：4; 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学化学工程更多>>

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急性肝损伤肝脏炎症环境对骨髓间充质干细胞移植疗效的影响被引量：4: 2012年; 目的:探讨猪急性肝损伤肝脏内不同程度炎症反应对移植骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)存活率和疗效的影响.8):对照组和移植组.每组均按照低浓度D氨基半乳糖胺(D-gal,0.25 g/kg)、高浓度D氨基半乳糖胺(D-gal,0.35 g/kg)给药,分别建立2种急性肝损伤模型,诱导24 h后,对照组动物门静脉注射生理盐水40 mL,移植组动物门静脉移植40 mL PBS(约8×107同种异体GFP-MSCs).2 wk内观察猪肝功能变化、病理变化、血清炎症指标和移植MSCs定植存活情况.结果:低浓度D-gal组血清IL-1、TNF-α水平明显低于高浓度D-gal组,差异有显著性.低浓度D-gal移植组与低浓度D-gal对照组比较,ALT、TB和NH3在早期有显著差异(D2:232.6±57.6 vs 334.4±42.3,12.2±3.3 vs 16.0±1.2,79.7±9.3 vs 127.8±28.2,P<0.05);高浓度D-gal移植组与高浓度D-gal对照组比较,肝功能指标有改善,但无显著意义.低浓度D-gal移植组MSCs定植存活率和肝细胞增殖率显著高于高浓度D-gal移植组.结论:骨髓间充质干细胞移植治疗肝损伤的疗效在很大程度上取决于肝脏炎症反应的程度,炎症反应越严重,移植细胞越不易存活;相反,较低的体内炎症环境有益于MSCs定植、存活和肝细胞再生.; 檀家俊施晓雷肖江强丁义涛; 关键词：急性肝损伤炎症反应骨髓间充质干细胞细胞移植

壳聚糖支架上猪肝细胞的内源性逆转录病毒分泌被引量：2: 2011年; 由于肝移植受供体短缺的限制，基于功能肝细胞的生物人工肝（BAL）有望成为等待肝移植患者的过渡性治疗手段，但已有的BAL临床试验结果并不理想。如何通过合适的支架材料提高肝细胞体外功能一直是该领域的研究热点[1]。在此方面，我们研发的壳聚糖支架在体外研究中显示了良好的细胞附着性和生物兼容性，能有效提高肝细胞功能[2]。; 肖江强施晓雷韩冰褚薛慧顾劲扬张悦檀家俊顾忠泽丁义涛; 关键词：逆转录病毒内源性肝细胞壳聚糖支架

肝病细胞疗法的研究进展: 2012年; 肝病的细胞疗法主要用于急、慢性肝功能衰竭和终末期肝病。自上世纪80年代以来，肝移植成为治疗肝功能衰竭和终末期肝病的金标准，但供肝匮乏、费用高以及术后并发症等严重制约肝移植的深入发展。在此形势下，以细胞移植和生物人工肝（bioartificial liver system，BAL）为代表的细胞疗法为治疗肝脏疾病开辟了一条新途径。; 檀家俊丁义涛; 关键词：肝细胞干细胞细胞移植细胞疗法

白介素1受体拮抗剂纳米缓释颗粒联合骨髓间充质干细胞移植治疗猪急性肝衰竭的实验研究: 自体骨髓间充质干细胞是一种来源广泛,取材简单、免疫原性低,具有多向分化潜能的成体干细胞。治疗急性肝衰竭具有极大的应用前景。在发现肝衰竭炎症内环境严重影响移植细胞活性及功能的基础上,选用临床广泛应用的乳糖酰基壳聚糖作为载体...; 檀家俊; 关键词：白介素1受体拮抗剂间充质干细胞细胞移植; 文献传递

新型多层平板型生物人工肝治疗急性肝功能衰竭犬的疗效被引量：2: 2011年; 目的评价新型多层平板型生物人工肝治疗急性肝功能衰竭动物的疗效.方法以新鲜猪肝细胞及猪骨髓基质干细胞为细胞来源,共培养于新型多层平板型生物反应器内,从而构建一种新型的生物人工肝.采用D-氨基半乳糖给药方式构建犬急性肝功能衰竭模型,实验组（n=8）给予生物人工肝治疗;对照组（n=8）仅给予一般监护.观察和检测所有动物一般情况、生化指标及生存率.结果实验组动物经生物人工肝治疗后,肝性脑病及一般精神状况均得到较明显改善,丙氨酸氨基转移酶从（ 1512±183） U/L降至（86±25） U/L;天冬氨酸氨基转移酶从（1472±365） U/L降至（46±1l）U/L;乳酸脱氢酶从（463±76） U/L降至（312±84）U/L;总胆红素从（28.8±6.2） μmol/L降至（12.5±3.6） μmol/L;血氨从（56±15）μmol/L降至（34±10） μmol/L,同时凝血功能及白蛋白水平亦得到改善.8条犬中,5条存活、3条死亡,治疗过程中未出现严重并发症.对照组动物一般情况未见明显改善,各项化验指标呈逐渐加重趋势,最终8条犬中5条死亡,3条存活.但两组生存率的差异无统计学意义（P=0.294）.结论新型多层平板型生物人工肝对急性肝功能衰竭动物具有显著疗效,是治疗急性肝功能衰竭的一种有效支持手段.; 施晓雷褚薛慧张悦韩冰顾劲扬肖江强檀家俊丁义涛; 关键词：肝功能衰竭急性共培养

膜截流分子量在新型生物人工肝免疫安全性中的作用研究: 2012年; 目的探讨膜截流分子量对新型生物人工肝（bioartificialliver，BAL）支持系统免疫安全性的影响。方法应用D氨基半乳糖静脉滴注比格犬建立肝功能衰竭模型。急性肝功能衰竭犬根据BAL隔离膜截流分子量的大小分为两组：A组：200kD组；B组：1200kD组。两组均接受新型2次BAL治疗，每次6h。观察各组体内IgG、IgM、50％补体溶血单位（CH50）变化及反应器内抗体漏过情况。结果在第一次BAL治疗后两组的IgG和IgM水平均没有发生明显的变化。在第2次治疗后第7天，1200kD组的IgG和IgM水平明显升高，200kD组IgG和IgM水平仍未出现明显上升或下降。在第一次BAL治疗后，两组CH50都出现暂时性的下降，在治疗后1h达到最低值，而后缓步上升，在7d后恢复至治疗前水平。反应器内培养液中IgG、IgM及CH50检测结果显示，1200kD组在治疗结束后IgG、IgM及CH50含量显著高于200kD组。结论膜截流分子量可能是影响BAL异种免疫排斥的重要因素之一。; 张悦施晓雷韩冰顾劲扬褚薛慧肖江强任昊桢檀家俊丁义涛; 关键词：生物人工肝猪肝细胞

新型生物人工肝系统安全性的实验研究被引量：4: 2012年; 目的对本研究所构建新型生物人工肝体外支持系统（BAL）应用中，猪内源性逆转录病毒（PERV）的安全性进行验证。方法正常比格犬接受新型BAL治疗6h，定时收集BAL系统中的血浆及比格犬的全血。提取外周血单核细胞（PBMCs）和血浆中的DNA和RNA进行PCR和RT-PCR检测PERV和猪细胞色素B序列。检测血浆中的逆转录酶（RT）活性以及血浆的体外感染能力。结果比格犬治疗期间均体征平稳并生存至治疗后6个月。仅在BAL内含反应器的循环3中查出PERVRNA和RT活性阳性，包括PBMCs和其他血浆在内的其余样本均未见PERVRNA，PERVDNA和RT活性。在体外感染实验中并无HEK293细胞感染病毒。结论新型BAL并不会导致PERV传播。; 施晓雷韩冰张悦顾劲扬褚薛慧肖江强檀家俊丁义涛; 关键词：内源性逆转录病毒肝细胞骨髓祖代细胞

猪内源性逆转录病毒透过生物人工肝的影响因素被引量：3: 2012年; 目的病毒安全性是猪源性生物人工肝（BAL）不可忽略的安全问题。本研究旨在探讨影响BAL中猪内源性逆转录病毒（PERV）透过的因素。方法构建双循环的新型猪源性BAL。两循环间采用膜孔径为10nm、20nm、30nm和35nm的血浆成分分离柱以及500nm膜孔径的血浆过滤柱分隔两循环。反应器内填充共培养的猪肝细胞-骨髓间充质肝细胞或原代猪肝细胞并连续循环72h。每12h抽取内、外循环内培养液检测PERVRNA、逆转录酶（RT）活性以及其体外感染性。结果血浆过滤柱组中，内外循环内PERV检测结果完全相同，提示500nm血浆滤过柱对PERV并无阻隔作用。在血浆成分交换柱各组中，各时间点内循环中均能检出RNA和RT活性，但是外循环中并未检出RT活性，而且随着膜孔径减小，RNA的检出时间逐渐延迟，且内循环RNA水平逐渐增加。各培养液均未发现能够体外感染HEK293细胞。结论膜孔径、循环时间以及内循环病毒浓度是影响BAL中PERV透过的主要原因。; 韩冰施晓雷袁献温肖江强张悦檀家俊顾忠泽丁义涛; 关键词：猪内源性逆转录病毒生物人工肝膜孔径

慢病毒介导的Tet调控HGF稳定表达的人类骨髓间充质干细胞株的建立及自身诱导向肝细胞定向分化能力的鉴定: 【目的】构建Tet调控HGF稳定表达的人类骨髓间充质干细胞株,鉴定其在自身表达分泌的HGF诱导下向肝细胞定向分化的能力。【方法】通过单链oligo合成得到HGF基因,将其克隆到pCDNA3.1(+)载体中构建高表达载体质...; 肖江强施晓雷韩冰任昊桢张悦马虎臣檀家俊丁义涛

采用纳米支架材料的新型多层平板型生物人工肝的免疫安全性研究被引量：2: 2012年; 目的:探讨新型生物人工肝(BAL)系统的免疫安全性。方法:采用自制纳米支架材料的新型多层平板型生物反应器与猪肝细胞-骨髓间充质干细胞共培养体系构建新型的BAL系统。正常比格犬接受新型BAL体外循环灌注6 h,期间定时收集BAL系统中的血液及培养液。ELISA法检测培养液及术前、术中、术后血浆中IgG,IgM及CH50(C3)水平;检测外循环前后的血常规情况;免疫荧光法检测术后反应器内细胞材料表面以及犬心、肝、脾、肺、肾等器官免疫蛋白的沉积情况。结果:经过6 h的体外循环灌注,犬体内IgG,IgM免疫抗体水平术中、术后均未出现明显的升高或下降,而术中补体CH50水平出现一过性下降,但很快恢复至正常水平,且并未发生严重的过敏反应及排斥反应,反应器内培养液中检出极少量的IgG和CH50;血常规检测显示,术后白细胞、血小板及淋巴细胞未出现明显的升高或降低;术后反应器内细胞材料表面仅有微量的IgG与C3沉积,各重要脏器均未检测到IgG,IgM及补体C3的沉积。结论:新型BAL系统具有良好的免疫安全性。; 张悦施晓雷韩冰顾劲扬褚薛慧肖江强任昊桢檀家俊丁义涛; 关键词：共同培养技术免疫肝细胞

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