江婷
- 作品数:2 被引量:5H指数:1
- 供职机构:上海交通大学农业与生物学院植物生物技术研究中心更多>>
- 发文基金:四川省应用基础研究计划项目上海市科委科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 用无选择标记的转基因烟草表达胸腺素α1(Tα1)
- 2010年
- 胸腺素α1(thymosin α1,Tα1)作为免疫调节剂在T细胞成熟、分化和功能发挥方面扮演着重要角色,临床主要被用于免疫缺陷、病毒感染和自身免疫性疾病(HBV、HCV、HIV和癌症等)的治疗。由于组织提取Tα1原料限制、化学合成价格昂贵和传统表达系统(原核或转基因动物)存在安全隐患,使Tα1临床应用受限。用烟草表达Tα1,首先按植物偏爱密码子设计合成tα1基因(124bp)并重组串联成4×tα1,构建植物双元表达载体p35s∷4×tα1(含twinT-DNAs),用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草。PCR和Southern blot结果证实获得了14转基因烟草,并发现靶基因4×tα1与筛选基因nptII在转基因烟草T0代基因组中发生了分别整合。对177株T1代转基因烟草检测,获得了2株仅整合4×tα1而无筛选标记nptII的植株。ELISA结果显示,4×Tα1在转基因烟草叶片中的表达量介于180.46(81#)~756.87ng/g.fw(86#),Western blot证实植物源4×Tα1具有免疫活性。MTT实验结果显示,植物源的4×Tα1蛋白具有促进BALB/c鼠脾淋巴细胞增殖的功能,为用安全植物表达系统生产包括Tα1在内的药用蛋白提供重要参考。
- 芦丽亚宋维游晓慧江婷赵凌侠
- 关键词:胸腺素Α1转基因烟草生物活性无选择标记
- 利用植物生物反应器表达胸腺素α1的研究被引量:5
- 2009年
- 胸腺素α1是胸腺肽中活性最高的组分,可以提高人体免疫力,通过组织提取或人工合成存在安全隐患和价格昂贵等问题.拟用植物生物反应器,转基因模式植物烟草表达胸腺素α1.通过已构建的植物双元载体p35S-2300-twin T-DNAs::Ta4::noster用农杆菌介导法转化烟草,在卡那霉素筛选压为50 mg/L时获得抗性烟草165株,经PCR和Southern blot分析证实,获得了17株独立转基因苗,阳性率10.30%,外源基因拷贝数为1-7个.还对利用含"twin T-DNA"植物双元表达载体转化烟草T0代的Tα4和nptII分别整合现象以及植物生物反应器生产胸腺素的前景进行了讨论.
- 赵建聪江婷李维
- 关键词:胸腺素Α1植物生物反应器转基因烟草