游晓慧
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院植物生物技术研究中心更多>>
- 发文基金：上海市科委科技攻关项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 用无选择标记的转基因烟草表达胸腺素α1(Tα1)
- 2010年
- 胸腺素α1(thymosin α1,Tα1)作为免疫调节剂在T细胞成熟、分化和功能发挥方面扮演着重要角色,临床主要被用于免疫缺陷、病毒感染和自身免疫性疾病(HBV、HCV、HIV和癌症等)的治疗。由于组织提取Tα1原料限制、化学合成价格昂贵和传统表达系统(原核或转基因动物)存在安全隐患,使Tα1临床应用受限。用烟草表达Tα1,首先按植物偏爱密码子设计合成tα1基因(124bp)并重组串联成4×tα1,构建植物双元表达载体p35s∷4×tα1(含twinT-DNAs),用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草。PCR和Southern blot结果证实获得了14转基因烟草,并发现靶基因4×tα1与筛选基因nptII在转基因烟草T0代基因组中发生了分别整合。对177株T1代转基因烟草检测,获得了2株仅整合4×tα1而无筛选标记nptII的植株。ELISA结果显示,4×Tα1在转基因烟草叶片中的表达量介于180.46(81#)～756.87ng/g.fw(86#),Western blot证实植物源4×Tα1具有免疫活性。MTT实验结果显示,植物源的4×Tα1蛋白具有促进BALB/c鼠脾淋巴细胞增殖的功能,为用安全植物表达系统生产包括Tα1在内的药用蛋白提供重要参考。
- 芦丽亚宋维游晓慧江婷赵凌侠
- 关键词：胸腺素Α1转基因烟草生物活性无选择标记
