胡姝颖
- 作品数：14 被引量：30H指数：3
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金江苏省博士后科研资助计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 联合应用纳米金和磷酸钙骨水泥支架促进牙髓干细胞的增殖和成骨分化被引量：4
- 2018年
- 目的:磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)支架以其良好的生物相容性和骨引导活性而广泛应用于组织工程骨缺损的修复中,但是其骨引导活性有限。因此考虑联合应用纳米金(gold nanoparticles,Au NPs)以促进牙髓干细胞的增殖和成骨分化。方法:以CPC支架作为基底接种牙髓干细胞,在培养基中添加5μg/m L Au NPs进行干细胞培养,以常规培养基组为对照。用透射电镜检测Au NPs的形貌。以荧光显微镜检测细胞接种4 h后的黏附状态,以CCK-8检测细胞增殖情况,检测细胞碱性磷酸酶的活性,并进行茜素红染色以说明矿化物形成情况。结果:Au NPs为均匀的球形,直径20 nm左右。细胞接种后4 h,实验组和对照组的细胞黏附状态没有显著差异。CPC上Au NPs培养基中的细胞14 d时数量多于对照组(P<0.05);且Au NPs培养基中细胞的碱性磷酸酶活性显著增高(P<0.05),矿化物的形成也显著增多(P<0.05)。结论:CPC支架联合Au NPs可显著促进牙髓干细胞的增殖和成骨分化。
- 夏阳陈慧敏胡姝颖孙剑飞郭宇马珊珊
- 关键词：纳米金磷酸钙骨水泥牙髓干细胞增殖成骨分化
- UV致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6小鼠免疫保护作用的研究被引量：12
- 2006年
- 目的研究紫外线(UV)致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6小鼠的免疫保护作用。方法分别观察不同UV强度(300、400和500μW/cm2照射的日本血吸虫尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫剂量(8、24和300条UV致弱尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫位点(300条UV致弱尾蚴经腹部和耳廓皮肤免疫)和不同免疫次数(100条UV致弱尾蚴经腹部皮肤免疫3次)诱导C57BL/6小鼠抗血吸虫攻击感染(40条正常尾蚴经腹部皮肤感染)的保护力。同时观察免疫后小鼠的体液免疫应答变化。结果300、400和500μW/cm2UV照射的日本血吸虫尾蚴免疫C57BL/6小鼠诱导产生的减虫率分别为2.72%、11.37%和10.38%;8、24和300条致弱尾蚴免疫小鼠诱导产生的减虫率分别为38.67%、7.54%和16.36%;300条致弱尾蚴经腹部和耳廓皮肤免疫诱导小鼠产生的减虫率分别为16.36%和16.14%;100条致弱尾蚴免疫3次,诱导小鼠产生减虫率为4.88%。对300条UV照射尾蚴免疫后小鼠的体液免疫应答动态观察显示,与感染对照组相比,免疫组血清中可溶性成虫抗原(SWA)和可溶性虫卵抗原(SEA)特异的IgG于免疫后2周开始升高,正常尾蚴抗原(SCA)特异的IgG于免疫1周后开始升高,SWA和SCA特异的IgG随免疫次数的增加而升高。结论UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫C57BL/6小鼠能诱导其产生高水平的体液免疫应答,但保护力水平较低,提示C57BL/6小鼠为对UV致弱日本血吸虫尾蚴的低应答品系。
- 胡姝颖张美娟郭彩琴单昊张素华张媛媛侯敏季旻珺吴海玮吴观陵
- 关键词：血吸虫C57BL/6小鼠保护力体液免疫
- “壳-芯”结构电纺纤维膜对MC3T3-E1细胞体外早期成骨分化的影响被引量：1
- 2018年
- 目的研究载有骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-coglycolic acid),PLGA)、聚己内酯(polycaprolactone,PCL)"壳芯结构"静电纺丝纤维膜(PP-B)对MC3T3-E1细胞体外早期成骨分化的影响。方法通过同轴静电纺丝的方法制备PLGA/PCL-BMP-2纤维膜(PP-B),以不含BMP-2的PLGA/PCL电纺纤维膜(PP)为对照组。通过透射电子显微镜观察PP-B膜的"壳-芯"结构;用ELISA法检测BMP-2的体外释放行为;收集PP-B膜的浸出液培养细胞,用碱性磷酸酶(ALP)活性检测法检测其释放的BMP-2对MC3T3-E1细胞的影响;将MC3T3-E1细胞接种到纤维膜上,通过CCK-8法检测1 d、3 d、5 d、7 d的增殖情况;以碱性磷酸酶(ALP)活性为早期骨向分化指标,检测其7 d的活性;用实时荧光定量逆转录PCR检测细胞接种7 d时成骨指标Bmp2、Alp、Col1、Msx2、Runx2的表达。结果透射电镜结果表明,同轴静电纺丝法制备的PP-B静电纺丝可形成连续均一的"壳-芯"结构;ELISA结果显示,PP-B膜可以实现BMP-2的持续释放;ALP活性检测结果证实本实验条件下制备的负载BMP-2的同轴静电纺丝支架能保持生长因子的部分活性。CCK-8结果显示PP-B膜和PP膜上的MC3T3-E1细胞在1、3、5、7 d都持续增殖;ALP活性检测及染色结果显示PP-B膜上的MC3T3-E1细胞的ALP活性高于PP膜(P<0.05);实时荧光定量逆转录PCR结果显示接种在PP-B膜上的MC3T3-E1细胞的相关成骨基因Bmp2、Alp、Col1、Msx2、Runx2的表达高于PP膜(P<0.05)。结论本实验制备的PP-B膜能促进MC3T3-E1细胞在体外的早期成骨分化。
- 胡姝颖陈汉帮陈刚周雪锋刘俊章非敏
- 关键词：骨形态发生蛋白-2组织工程支架成骨分化
- 一种间接ELISA检测结果标准化的新方法及其验证被引量：8
- 2005年
- 目的建立并验证一种间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测结果标准化的方法-改良 ODST法(I-ODST)。方法根据ELISA反应原理推导I-ODST法的公式ODST=αA/1-bA,验证时采用血吸虫抗体检测试剂盒,检测样品中特异性抗体的A值,对A值的倒数与相对浓度C的倒数作线性回归分析,并与常用的A-C、A-logC法进行比较。结果 I-ODST法线性检验回归系数的平方值 (R2)均>0．99,假设检验的P值<0．05,A-C、A-logC法大部分的R2<0．99,且I-ODST法的线性拟合趋势最佳。结论建立了一种比常用数据转换方法线性拟合更好的ELISA检测结果标准化的新方法。
- 张媛媛张素华胡姝颖李强季旻珺吴观陵吴海玮罗建平
- 关键词：ELISA数据转换
- 胰岛细胞瘤相关蛋白2胞内区与IgGFc段融合基因疫苗的构建及鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的:构建及鉴定胰岛细胞瘤相关蛋白2胞内区(mIA-2i)和IgGFc嵌合蛋白的真核表达载体pEGFP-N2/mIA-2i-mIgGFc。方法:实验于2004-09/2005-07在南京医科大学病原生物学系完成。①采用反转录-聚合酶链反应方法从ICR小鼠的脑组织和脾脏中分别扩增胰岛细胞瘤相关蛋白2胞内区(mIA-2i)和IgGFc段(mIgGFc),并引入相应的酶切位点(XhoⅠ/BamHⅠ和BamHⅠ/EcoRI)。②分别将扩增后的片段克隆入pUCm-T质粒,通过XhoⅠ/BamHⅠ双酶切和连接后,获得pUCm-T/mIA-2i-mIgGFc重组质粒。③经过XhoⅠ/EcoRI双酶切后,将融合基因mIA-2i-mIgGFc克隆入真核表达载体pEGFP-N2。通过酶切、聚合酶链反应及插入片段序列测定对重组质粒pEGFP-N2/mIA-2i-mIgGFc进行鉴定。结果:①从ICR鼠的脑组织和脾脏中反转录-聚合酶链反应获得胰岛细胞瘤相关蛋白2胞内区和IgGFc段。②通过基因工程操作,获得重组克隆质粒pUCm-T/mIA-2i和pUCm-T/mIgGFc,并经酶切鉴定克隆成功。③获得重组克隆质粒pUCm-T/mIA-2i-mIgGFc,经聚合酶链反应和双位点酶切鉴定重组成功。④获得重组质粒pEGFP-N2/mIA-2i-mIgGFc和pEGFP-N2/mIA-2i,经聚合酶链反应、酶切及测序鉴定证实特异性片断插入真核表达载体成功。结论:pEGFP-N2/mIA-2i-mIgGFc真核表达载体的构建,为利用胰岛细胞瘤相关蛋白2基因疫苗预防非肥胖性糖尿病小鼠发生自身免疫性糖尿病的研究奠定了基础。
- 季旻珺刘煜胡姝颖张媛媛朱翔吴海玮
- 关键词：基因反转录聚合酶链反应
- 紫外线辐照致弱日本血吸虫尾蚴诱导C_(57)BL/6小鼠皮肤早期免疫应答动态变化的研究被引量：1
- 2006年
- 目的观察紫外线辐照致弱日本血吸虫尾蚴经耳廓免疫C57BL/6小鼠后,小鼠皮肤组织早期免疫应答的动态变化。方法98只小鼠测定双侧耳廓厚度后,14只作为0d组不感染/免疫,其余平均分为2组。一组经双侧耳廓分别感染正常尾蚴150条/耳,另一组经双侧耳廓分别免疫紫外线辐照致弱尾蚴150条/耳。感染/免疫后第1、2、4、7、14、21天分别剖杀2组小鼠各7只,测定耳廓厚度。取感染处的耳廓组织,左侧进行培养,收集上清检测相应细胞因子。右侧纵切为二,一半进行HE染色观察炎症反应;另一半应用免疫组化技术观察皮肤组织中IL-12和CD11c分子的表达。结果正常尾蚴感染的小鼠皮肤炎症反应在第7天达到高峰后逐渐下降,第21天基本恢复;而辐照尾蚴免疫小鼠耳廓皮肤在第14天炎症反应才达高峰,第21天反应仍然十分强烈。尾蚴穿皮后第4天,组织中有较高水平的CD11c及IL-12分子表达。皮片培养细胞因子定量检测也显示:与Th1细胞应答相关的IL-12、IFN-γ及Th2型因子IL-10早期在正常、辐照尾蚴差异无显著性。结论和正常尾蚴相比,辐照致弱尾蚴诱导的皮肤免疫应答持续时间长、强度高,但两者诱导Th细胞向不同方向极化并不发生于免疫应答启动阶段。
- 郭彩琴张美娟胡姝颖单昊张素华王荣芝倪忠耘季旻珺吴海玮吴观陵
- 关键词：日本血吸虫致弱尾蚴耳廓皮肤免疫应答
- 载BMP-2的同轴电纺支架对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响
- 目的:通过同轴静电纺丝技术制备携载骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)的“壳-芯”结构电纺支架,将支架的骨引导性与生长因子的骨诱导性结合,以期提高支架促进MC3T3-...
- 胡姝颖
- 关键词：组织工程支架骨形态发生蛋白-2成骨分化
- 文献传递
- 静磁场连续曝磁对牙髓干细胞增殖和分化的影响被引量：2
- 2020年
- 目的:研究静磁场连续曝磁对牙髓干细胞增殖和分化的影响。方法:搭建静磁场下细胞培养装置,磁通强度(35±5)mT,以常规培养的细胞为对照组。用扫描电镜检测磁场下与常规培养细胞的形态,以CCK-8检测细胞的增殖情况,同时检测细胞的碱性磷酸酶活性,并进行茜素红染色以说明矿化物形成情况。结果:扫描电镜显示,磁性培养的细胞与常规培养的细胞在形态上没有显著差异;磁场下与常规培养下的细胞增殖情况也没有差异;但是磁场下细胞的碱性磷酸酶活性显著增高(P<0.05),且矿化物的形成也显著增多(P<0.05)。结论:静磁场连续曝磁对牙髓干细胞的形态和增殖没有影响,但促进了其成骨方向的分化。
- 夏阳陈慧敏胡姝颖孙剑飞郭宇贾璐
- 关键词：静磁场牙髓干细胞增殖分化
- 纳米αFe2O3对牙髓干细胞增殖及骨向分化和矿化能力的影响
- 2018年
- 对纳米αFe_2O_3进行二巯基丁二酸表面修饰,采用透射电子显微镜(TEM)观察其形貌,利用振动样品磁强计(VSM)检测其磁学性能.配置含纳米αFe_2O_3浓度为10μg/m L的培养基培养牙髓干细胞,以不添加纳米αFe_2O_3的培养基为对照组.采用荧光显微镜观察纳米αFe_2O_3组与常规培养基组的细胞形态,以CCK-8检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测细胞ALP活性,并进行茜素红染色以检验其矿化能力.结果表明,所用纳米αFe_2O_3为棒状,尺寸约10nm×90 nm,VSM结果显示其没有磁性.纳米αFe_2O_3培养基中牙髓干细胞的形态和增殖情况与常规培养基中情况没有差异,但是碱性磷酸酶活性和矿化能力则显著提高(p<0.05).由此说明,纳米αFe_2O_3对牙髓干细胞的形态和增殖没有影响,但却会促进其向成骨方向分化.
- 夏阳陈慧敏胡姝颖孙剑飞章非敏顾宁
- 关键词：牙髓干细胞增殖骨向分化
- 青蒿琥酯治疗小鼠日本血吸虫病的血清学研究被引量：2
- 2007年
- 目的观察青蒿琥酯对日本血吸虫感染小鼠的治疗作用及血清IgG的动态变化,探讨血清抗体与体外杀童虫效果的相关性。方法用日本血吸虫感染C57/BL6小鼠,在感染后8、15、22和29d分别一次性灌服300mg/kg青蒿琥酯,对照组小鼠灌服1%羧甲基纤维素钠。最后一次给药后7d剖杀小鼠,计算成虫数和虫卵数,以ELISA法检测小鼠血清中日本血吸虫特异性IgG抗体的水平,观察接受青蒿琥酯治疗的小鼠血清与巨噬细胞体外协同杀伤日本血吸虫童虫的效应。结果青蒿琥酯治疗组小鼠未检获成虫和虫卵;血清中日本血吸虫尾蚴抗原特异的IgG抗体水平在感染后21d达高峰,此后下降;成虫抗原特异的IgG抗体水平呈上升态势,二者与对照组比较差异均无显著性;青蒿琥酯治疗小鼠血清中虫卵抗原特异的IgG抗体呈低水平状态,显著低于对照组。青蒿琥酯治疗组小鼠血清和对照组小鼠血清均具有较强的体外杀童虫效果。结论青蒿琥酯对日本血吸虫感染的小鼠具有显著的治疗效果,其血清与巨噬细胞在体外具有协同杀伤童虫的作用。
- 陈雪松李宗吉张美娟季旻珺胡姝颖吴海玮吴观陵
- 关键词：血吸虫青蒿琥酯血清学
