袁芳
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- BCSC-1基因异位表达对人小细胞肺癌细胞增殖的抑制效应被引量：3
- 2012年
- 背景与目的:人乳腺癌候选抑制蛋白1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因已被证实是一种新型抑癌基因,在多种肿瘤细胞均存在表达缺失的现象。该研究通过将BCSC-1基因转染至人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,探讨BCSC-1基因异位表达对NCI-H446细胞增殖的抑制效应。方法:用PCR扩增BCSC-1 cDNA,构建真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1。通过脂质体把pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1和空质粒pcDNA3.1/v5-HisB转染入野生型NCI-H446细胞。以转染空质粒pcDNA3.1/v5-HisB的NCI-H446细胞为对照组,野生型NCI-H446细胞为空白对照组。采用流式细胞仪检测细胞周期;MTT法检测细胞增殖;免疫组化确认BCSC-1基因和CD44分子在NCI-H446细胞中的表达。结果:成功构建了真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1,制备了BCSC-1基因异位高表达的NCI-H446稳定细胞株。细胞周期分析显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞大部分阻滞在G0/G1期,明显高于对照组和空白组(P<0.01)。MTT法检测显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞与对照组、空白组相比,生长速度明显减慢(P<0.05)。免疫组化显示异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞CD44表达增高。结论:BCSC-1基因的异位表达对NCI-H446细胞的恶性增殖行为有明显的抑制作用,这种抑制作用可能与细胞周期阻滞和黏附分子CD44表达增高有关。
- 袁芳鞠吉雨唐媛媛邸大琳王丽娜孙萍
- 关键词：NCIH446细胞细胞周期CD44
- 抑癌基因BCSC-1原核表达载体的构建及诱导表达
- 2010年
- 目的 构建BCSC-1基因原核表达载体并进行诱导表达、纯化.方法 PCR方法从腺病毒穿梭载体pDC316-BCSC-1扩增BCSC-1基因,构建原核表达载体ET30a-BCSC-1,转化感受态E.coli BL21（DE3）,并用IPTG进行诱导表达.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测目的 蛋白的表达,并用超声洗涤方法进行目的 蛋白洗涤纯化.结果 成功构建原核表达载体pET30a-BCSC-1;在IPTG诱导下在E.coli BL21（DE3）中高效表达相对分子质量（Mr）为86 000的重组BCSC-1蛋白,目的 蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中,经超声洗涤纯化后,重组蛋白纯度可达85%以上.结论 利用构建的原核表达载体成功表达出BCSC-1蛋白,为进一步制备抗BCSC-1的单克隆抗体及在临床中的应用打下良好基础.
- 袁芳鞠吉雨王丽娜邸大琳刘艳菲冯永堂
- 关键词：原核表达
- 新型抑制性细胞因子IL-35研究进展被引量：5
- 2009年
- IL-35是一种新发现的抑制性细胞因子,是EB病毒诱导基因3(EBI3)产物和IL-12的p35亚基形成的异二聚体。IL-35可由CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)特异性产生,是Treg发挥抑制作用所必需的细胞因子。在体外,IL-35既可以扩增Treg的数量,又可以抑制CD4^+CD25-效应性T细胞的增殖和Th17细胞的分化。在体内,IL-35能有效减轻胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的症状。因此,深入研究IL-35的生物学功能和作用机制对寻找自身免疫性疾病和肿瘤新的治疗手段具有重要价值。
- 袁芳杜小萍(综述)鞠吉雨
- 关键词：CD4+TH17细胞
