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乙型脑炎病毒及疫苗研究进展被引量：3: 2006年; 乙型脑炎病毒是黄病毒科中致病性最强的病毒之一,目前对该病毒的分子生物学研究进展较快。现阶段国内外主要使用三种类型疫苗,即鼠脑纯化灭活疫苗、原代地鼠肾细胞灭活疫苗和原代地鼠肾细胞减毒活疫苗。灭活疫苗和减毒活疫苗各有利弊。基因工程疫苗(包括载体重组活疫苗、嵌合减毒活疫苗、病毒样颗粒、亚单位疫苗及DNA疫苗)成为乙型脑炎疫苗发展的方向。; 许乐燕徐闻青; 关键词：脑炎病毒疫苗灭活减毒基因工程疫苗

乙型脑炎病毒SA_(14)-14-2减毒疫苗株的生物学和基因稳定性被引量：11: 2008年; 目的研究乙型脑炎病毒(JEV)SA14-14-2减毒疫苗株传代过程中的生物学和基因稳定性,为疫苗的安全性和免疫原性提供依据。方法将JEVSA14-14-2减毒疫苗株PHKC7代病毒在原代地鼠肾细胞(PHKC)上连续传代,检测各代次病毒的培养特性以及第8、12、17和22代病毒的安全性及免疫原性;对起止代次病毒(PHKC8和22代)进行全基因组序列测定,对中间代次病毒(PHKC12和17代)的结构蛋白基因进行测序,并与基因库乙脑病毒SA14-14-2株(D90195)比较。结果各代次病毒产生的细胞病变基本一致,病毒滴度在17代前较稳定;在BHK21细胞上形成的蚀斑形态一致;小鼠脑内的致病力未发生变化,乳鼠传代返祖试验高代次病毒毒力有升高趋势。8、12、17和22代病毒免疫小鼠后,对P3强毒攻击均具有保护作用。E蛋白核苷酸和氨基酸序列,PHKC8代与D90195完全一致;而PHKC12、17和22代出现单个碱基(第2142或2143位)突变,导致E389氨基酸改变(D→N或D→A),但并非回复突变。4个代次病毒的PrM-C区结构蛋白基因均未发生变化。PHKC8、22代病毒的其他核苷酸突变发生在基因组非结构蛋白区和3′端非编码区;全序列PHKC8和22代与D90195比较,发现7～8个核苷酸不同,导致3～4个氨基酸的差异,核苷酸和氨基酸的同源性分别大于99.93%和99.88%,且以上突变不存在于明确的相关减毒位点上。结论JEVSA14-14-2减毒疫苗株在PHKC上连续传15代,仍保持高度的生物学和基因稳定性,疫苗生产用病毒控制在10代以内较为安全。; 许乐燕徐闻青徐帆洪王兵张秀娟; 关键词：乙型脑炎减毒活疫苗 SA14-14-2株

乙脑病毒SA14-14-2减毒疫苗株的生物学和基因稳定性研究: 目的：研究乙脑病毒SA14-14-2减毒疫苗株在实验室传代过程中的生物学和基因稳定性，为疫苗的安全性和免疫效果以及疫苗生产控制病毒的有效代次提供科学依据。方法：将SA14-14-2减毒株在原代地鼠肾细胞(PH...; 许乐燕徐闻青徐帆洪王兵张秀娟; 关键词：乙型脑炎病毒减毒活疫苗 SA14-14-2株生物学; 文献传递

沪191麻疹病毒疫苗株连续传代的基因稳定性被引量：1: 2014年; 目的研究沪191麻疹病毒疫苗株(S191)在原代鸡胚成纤维细胞中连续传代的基因稳定性,为评估和控制麻疹疫苗的免疫原性及安全性提供依据。方法取S191的22代冻干主种子批在SPF原代鸡胚成纤维细胞上连续传代获得的23、26(用于生产的疫苗代次)、29、31和33代病毒液,提取病毒RNA,RT-PCR扩增后,进行全序列测定,并对病毒关键的保护性抗原进行核苷酸和氨基酸序列分析。结果与22代全基因比较,核苷酸序列同源性:26代为99.96%,33代为99.92%;氨基酸序列同源性:26代为99.98%,33代为99.89%。26代疫苗病毒仅M蛋白第123位氨基酸由苏氨酸→赖氨酸,33代病毒有5个氨基酸差异。结论 26代S191麻疹疫苗疫苗病毒的基因结构高度稳定,疫苗可保持主种子病毒的免疫原性和安全性。; 徐闻青许乐燕杨文震王兵赵玉麟; 关键词：麻疹减毒活疫苗

麻腮风水痘联合减毒活疫苗中水痘病毒滴定方法的比较被引量：1: 2016年; 目的探讨麻腮风水痘联合减毒活疫苗（measles,mumps,rubella and varicella combined vaccine,live,MMRV）中水痘病毒在人二倍体细胞（MRC-5和2BS）上蚀斑的形成情况,建立不中和法检测MMRV中水痘病毒滴度,并进行验证。方法观察麻疹、腮腺炎和风疹病毒在人二倍体细胞上形成的细胞病变形态,以及风疹病毒对水痘病毒蚀斑形成的影响;通过完全中和、部分中和以及未中和等方法,检测MMRV中水痘病毒的滴度,最终建立不中和法检测水痘病毒滴度,并对方法进行重复性和准确性验证。结果风疹病毒不高于4.0 lg CCID50/孔时,水痘病毒在MRC-5或2BS细胞中产生的蚀斑形态发生微小改变,但蚀斑数量与完全中和风疹病毒后差异无统计学意义（P〉0.5）。采用完全中和、部分中和以及未中和等方法检测MMRV中水痘病毒的滴度差异无统计学意义（P〉0.5）,且不中和法检测水痘疫苗病毒滴度的重复性（RSD为2.3%）和准确性（回收率为97.8%-100%）均较好。结论在人二倍体细胞（2BS或MRC-5）上,不使用抗血清中和直接进行四联疫苗中水痘病毒的滴度检测完全可行,可替代MMRV中经典的使用抗体中和的病毒滴定方法。; 陈震杨文震邱平许乐燕石玮陈哲文程鹏飞袁力勇徐闻青; 关键词：二倍体细胞水痘病毒蚀斑法

乙脑病毒SA14-14-2减毒疫苗株的生物学和基因稳定性研究: 目的：研究乙脑病毒SA<,14>-14-2减毒疫苗株在实验室传代过程中的生物学和基因稳定性,为疫苗的安全性和免疫效果以及疫苗生产控制病毒的有效代次提供科学依据。方法：将SA<,14>-2减毒株在原代地鼠肾细胞(PHKC)...; 许乐燕徐闻青徐帆洪王兵张秀娟; 关键词：乙型脑炎病毒减毒活疫苗生物学; 文献传递

BRD-Ⅱ风疹病毒疫苗株的连续传代及其基因稳定性: 2015年; 目的观察上海生物制品研究所有限责任公司BRD-Ⅱ风疹病毒株(S-BRD-Ⅱ株)在MRC-5细胞中连续传代的基因稳定性,并比较该毒株与其他上市风疹毒株E1基因的差异。方法将S-BRD-Ⅱ株病毒在MRC-5细胞中连续传10代,检测每代病毒的培养特性和E1基因序列,第28、29、33和38代病毒的ORF序列及第28、38代病毒的5′-和3′-末端序列,同时测定B-BRD-Ⅱ株(北京天坛)及进口疫苗风疹病毒株(RA 27/3)E1基因,并对各基因的核苷酸及其相应的氨基酸序列进行分析。结果 S-BRD-Ⅱ株病毒在MRC-5细胞上连续传10代,其培养特性、细胞病变(CPE)程度及病毒滴度基本稳定,S-BRD-Ⅱ株病毒E1基因未发生变异,与Gen Bank中登录的BRD-Ⅱ株比较,有一个特异性的沉默突变,与RA 27/3疫苗株病毒比较,有122个核苷酸位点及其相应6个氨基酸发生突变。第28、29、33、38代S-BRD-Ⅱ株病毒的ORFⅠ和ORFⅡ基因区域与Gen Bank登录的BRD-Ⅱ株病毒比较,有5个位点发生变异,且P150非结构蛋白编码区域基因出现大片缺失。第28和38代S-BRD-Ⅱ株病毒的5′-末端与Gen Bank中登录的BRD-Ⅱ株序列的5′-末端一致,而3′-末端有一个氨基酸发生突变。结论 BRD-Ⅱ风疹病毒疫苗株在MRC-5细胞中具有良好的传代稳定性,所有上市风疹病毒株的E1基因氨基酸序列差异不大。; 许乐燕杨文震毛树宝徐闻青; 关键词：核苷酸序列

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许乐燕

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