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中国近交系版纳微型猪α1，3-半乳糖基转移酶基因的克隆及其真核表达载体的构建被引量：3: 2009年; 克隆中国近交系版纳微型猪(Banna minipig inbred-line,BMI)α1,3-半乳糖基转移酶基因(α1,3-galacto-syltransferaseα1,3-GT)并构建其真核表达载体。从版纳微型猪肝脏中提取总RNA,RT-PCR扩增出α1,3-GT cD-NA全长序列,克隆到pMD18-T载体,测序后再克隆到质粒pEGFP-N1中,构建α1,3-GT真核表达载体pEGFP-N1-GT。用脂质体法瞬时转染人肺腺癌细胞A549,RT-PCR检测转染细胞中α1,3-GT mRNA的表达;利用荧光素标记的植物凝集素(FITC-BS-IB4lectin),直接免疫荧光法检测转染细胞中α1,3-GT合成α-Gal表位的能力。结果显示版纳微型猪α1,3-GTcDNA全长1116bp,其序列与GenBank中小鼠和牛α1,3-GTcDNA具有高度同源性,与猪α1,3-GTcDNA全长序列完全一致。酶切和PCR证实重组真核表达载体pEGFP-N1-GT构建成功。转染pEG-FP-N1-GT的A549细胞有α1,3-GTmRNA表达,在其细胞膜检测到α-Gal表位的表达。中国近交系版纳微型猪α1,3-GTcDNA的克隆及其真核表达载体的构建为该基因在异种器官移植和肿瘤免疫治疗中的进一步研究和应用奠定了基础。; 朱圣明王艳萍郑鸿程惊秋陆燕蓉曾养志王宇王竹; 关键词：Α1,3-半乳糖基转移酶异种移植

复发转移性三阴乳腺癌患者进展后生存特征分析被引量：6: 2016年; 目的分析复发转移性三阴乳腺癌（metastatic recurrent triple-negative breast cancer,mrTNBC）的生存特征并寻找独立影响患者生存的预后因素。方法收集四川大学华西医院收治、经病理组织学证实、在治疗过程中或治疗完成后发生首次复发转移的三阴乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）患者的临床病理资料。进展后生存情况采用Kaplan-Meier方法进行分析,单因素预后分析采用log-rank检验,多因素预后分析采用Cox比例风险模型。结果本研究共纳入142例患者,中位随访时间41.9月（5.1~189.5月）,进展后中位生存时间22.0月。单因素分析结果显示：肿瘤直径大小、淋巴结状态、肿瘤TNM分期、无疾病间隔期（disease-free interval,DFI）、复发转移部位的个数、是否脑转移、是否肝转移和进展后治疗模式是进展后生存时间的影响因素。多因素分析结果提示,发生多部位进展（P=0.004）、DFI≤12月（P=0.010）、发生脑转移（P=0.037）和单模式治疗（single-modal therapy,SMT,P〈0.001）是影响mrTNBC患者预后的独立危险因素。在局部复发的患者中,多模式治疗（multi-modal therapy,MMT）比SMT预后更好（进展后3年生存率,53.0%vs.11.4%,P=0.024）,远处转移的患者也有相同的趋势（进展后3年生存率,58.1%vs.29.3%,P=0.003）。结论发生多部位进展、DFI短、发生脑转移均为影响mrTNBC患者生存的危险因素,MMT为其保护因素。; 彭祖祥钟晓蓉王竹王宇王艳萍郑鸿敬静; 关键词：三阴乳腺癌脑转移多模式治疗

成都市某医院乳腺癌患者住院费用影响因素分析被引量：13: 2016年; 目的:分析乳腺癌患者住院费用的主要影响因素,为降低住院费用提供依据。方法:选取成都市某医院2011年1月-2013年12月乳腺癌住院患者的住院情况和费用信息,采用单因素方差分析和多重逐步回归分析对住院费用的影响因素进行研究。结果:患者平均住院费用为32803.37元,其中,药费为28711.61元,占平均总费用的87.53%,是乳腺癌患者住院治疗的最大费用构成;住院次数和天数对住院费用的影响具有统计学意义(均P<0.05);在不同支付方式中,省医保患者住院费用最高,城乡居民保险患者住院费用最低;不同临床分期患者的住院费用也存在较大差异,Ⅳ期患者费用为0-Ⅰ期患者费用的2.48倍。结论:有效降低乳腺癌患者的药费是控制日益增长的乳腺癌住院费用的关键。通过加强医院管理,从降低住院天数、规范合理用药和改变支付方式等方面入手,可最终降低乳腺癌住院费用,减轻患者和社会的经济负担。; 王婷婷郑鸿; 关键词：住院费用乳腺癌

曲妥珠单抗联合新辅助化疗对HER-2阳性乳腺癌患者近远期疗效的影响被引量：18: 2016年; 目的探讨曲妥珠单抗联合新辅助化疗对表皮生长因子受体-2(HER-2)阳性乳腺癌患者的疗效。方法选取HER-2阳性乳腺癌患者58例,随机分为观察组和对照组,各29例。对照组给予表柔比星联合多西他赛的方案进行新辅助化疗,观察组在对照组的基础上给予曲妥珠单抗治疗。比较两组患者的近期、远期疗效。结果观察组有效率(RR)及病理完全缓解(p CR)率明显优于对照组,5年总生存率(OS)及5年无病生存率(DFS)明显高于对照组。结论曲妥珠单抗联合新辅助化疗治疗HER-2阳性乳腺癌近期疗效显著,并可有效改善患者预后,值得临床推广应用。; 孙愚李帅罗婷郑鸿鄢希; 关键词：曲妥珠单抗新辅助化疗 HER-2 乳腺癌

荧光原位杂交技术检测乳腺癌Her-2/neu扩增被引量：5: 2010年; 目的:探讨荧光原位杂交技术(FISH)检测乳腺癌Her-2/neu的扩增情况,比较FISH法与免疫组织化学(I HC)法检测结果的一致性。方法:收集乳腺癌患者手术切除的肿瘤标本50例。经石蜡包埋,组织切片后,应用FISH法检测Her-2/neu扩增情况,I HC法检测Her-2/neu蛋白表达情况,并对两种检测方法的结果进行统计学分析。结果:50例标本中FISH阳性17例,FISH阴性33例,FISH阳性率34%(17/50)。50例标本中I HC(～)14例,I HC(0～+)36例,I HC蛋白表达率28%(14/50)。FISH法与I HC法检测结果的总符合率为82%(41/50)(K=0.581)。结论:FISH法具有较高的稳定性与可靠性,临床开展FISH法检测Her-2/neu基因扩增情况作为I HC法的补充,可以更加准确和客观地对乳腺癌患者的治疗和预后进行评价。; 王竹吕青王宇陈卉娇陈洁王艳萍郑鸿; 关键词：乳腺癌 HER-2/NEU 荧光原位杂交免疫组织化学

新型冠状病毒肺炎疫情下“乳腺癌信息管理系统”的随访管理新模式探索被引量：2: 2020年; 新型冠状病毒肺炎疫情期间,四川大学华西医院为保证乳腺癌患者的及时诊疗与定期规范随访,在前期网络化"乳腺癌信息管理系统"基础上,有机整合患者管理微信群,搭建了线上线下互联管理平台,以电话随访为主、微信管理群为辅,排查新型冠状病毒感染,完成常规的乳腺癌复查与随访任务,并筛选需要处理病情等必要患者进入门诊随访。该管理新模式在降低医患双方新型冠状病毒传播风险的前提下,提高了疾病随访管理效率。; 钟晓蓉贺萍田廷伦鄢希郑鸿罗婷; 关键词：随访管理

纺锤体检测点蛋白BUB1B在三阴型乳腺癌中的表达及意义被引量：1: 2021年; 目的高通量筛选三阴型乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)预后相关的重要分子标志物,探讨纺锤体检测点蛋白BUB1B表达与TNBC临床病理特征及预后相关性。方法收集2009—2017年四川大学华西医院诊断TNBC的临床病理资料和预后信息。选取符合纳入标准的新鲜样本47例,肿瘤原发灶石蜡样本139例。对新鲜肿瘤样本进行转录组测序(RNA-seq)与基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)数据集GSE38959和GSE65194差异分析并取交集,进行富集分析和蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析。利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析目的基因的表达水平与TNBC预后的关系。采用免疫组织化学染色验证其在TNBC中的表达情况及与临床病理特征和预后的相关性。结果利用edgeR对47例TNBC肿瘤组织与其中12例正常组织进行差异分析得到1559个上调基因和1376个下调基因,与GEO2R对GSE38959和GSE65194差异分析后的差异基因取交集后得到131个基因。富集分析主要富集在细胞周期、JAK-STAT信号通路、p53信号通路。利用Cytoscape分析得到Degree最高的10个基因:TOP2A、BUB1B、MKI67、PLK1、RRM2、PCNA、KPNA2、SMC4、PBK、IGF1。Kaplan-Meier Plotter数据库中分析发现BUB1B表达与TNBC预后显著相关[总生存期,HR=0.52,95%CI(0.35~0.77),P=0.001;无远处转移生存期,HR=0.72,95%CI(0.52~0.98),P=0.038]。139例肿瘤原发灶石蜡样本免疫组织化学的结果显示BUB1B低表达与TNBC预后不良具有显著相关性[HR=0.41,95%CI(0.18~0.95),P=0.024]。结论BUB1B蛋白低表达与TNBC预后不良相关,其预后相关分子机制和潜在治疗靶点有待进一步研究。; 张培川钟晓蓉郑鸿李丽陈菲申梦佳李怡洁陈红曹师瑜步宏叶丰; 关键词：乳腺肿瘤生物学标记预后

丹参酮ⅡA对人ER阴性乳腺癌细胞的生长抑制和多耐药逆转作用被引量：34: 2007年; 目的研究丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA)对雌激素受体(ER)阴性人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的生长抑制和多耐药逆转作用,并探讨其作用机制。方法用细胞增殖试验(MTT法)、克隆形成试验检测丹参酮ⅡA对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用;Brdu掺入试验、流式细胞术检测丹参酮ⅡA对MDA-MB-231细胞DNA合成、凋亡和细胞周期的影响;RT-PCR检测丹参酮ⅡA作用后腺苷二磷酸核糖聚合酶1(ADPRTL1)、细胞色素P450家族(CYP1A1)及乳腺癌耐药蛋白(BCRP/ABCG2)基因的表达水平,研究丹参酮ⅡA抑制MDA-MB-231细胞生长的作用机制及多耐药逆转作用。结果丹参酮ⅡA处理后,肿瘤细胞增殖活性降低(P<0.05),半效抑制浓度(IC50)为80ng/mL,且呈时间-剂量-效应关系;克隆形成下降(P<0.05),亦呈时间-剂量-效应关系;Brdu标记指数降低(P<0.05);细胞周期分布改变,凋亡指数升高(P<0.01),G0/G1期细胞数增加(P<0.01),S期和G2/M期细胞数减少(P<0.01);RT-PCR检测ADPRTL1、CYP1A1 mRNA表达上调(P<0.05),分别为对照组(未用丹参酮ⅡA处理)的2.44倍和1.58倍,BCRP/ABCG2 mRNA表达下调(P<0.05),仅为对照组的0.44倍。结论丹参酮ⅡA对人ER阴性乳腺癌细胞具有生长抑制、凋亡诱导和多耐药逆转作用,其作用机理可能与抑制DNA合成、细胞周期阻滞、上调凋亡相关基因ADPRTL1、CYP1A1及下调多耐药相关基因BCRP/ABCG2表达有关。; 敬静郑鸿王静林苹张洁熊竹娟吴亚英任婧婧杨洪亮王修杰; 关键词：乳腺癌雌激素受体乳腺癌耐药蛋白

异种移植抗原α-gal介导人血清杀伤A549细胞的实验研究: 2012年; 背景与目的人体α-1,3半乳糖基转移酶(α-1,3Galactosy ltransferase,α-1,3GT)基因功能失活而不表达α-半乳糖基(α-galactosyl,α-gal)表位,但天然存在着大量抗α-gal抗体,异种器官移植研究结果提示,在人肿瘤细胞上重新表达异种移植抗原α-gal,可能诱发类似于宿主抗移植物超急性排斥反应的抗肿瘤效应。本研究通过基因导入手段,建立稳定表达异种移植抗原α-gal的转基因人肺癌细胞系,探讨α-gal介导的人血清抗肿瘤的可能性及其机制。方法将前期成功构建的α-1,3GT基因真核表达质粒pEGFP-N1-GT瞬时转染人肺腺癌细胞A549,筛选并建立稳定的转基因细胞系A549-GT。MTT增殖实验和显微镜观察转基因细胞生物学特性变化;RT-PCR检测A549-GT中α-1,3GT基因mRNA表达;荧光素标记的凝集素(FITC-BS-IB4lectin)染色检测α-1,3GT在肿瘤细胞表面合成α-gal的能力;A549-GT细胞及其培养基分别与正常人细胞共培养,检验α-1,3GT基因的稳定性和酶活性的稳定性;人血清结合实验检测A549-GT与IgM和补体C3结合情况。结果RT-PCR检测到转基因细胞系A549-GT中有α-1,3GTmRNA表达。荧光显微镜和流式细胞术检测结果显示:A549-GT能够长期稳定表达异种移植抗原α-gal表位;A549-GT与其亲本细胞在生长形态及增殖速度上无明显差异;A549-GT细胞及其培养基分别与正常人胚肺成纤维细胞MRC-5共培养均不能使MRC-5获得α-gal合成能力;经人血清处理后,荧光免疫实验观察到转基因细胞系A549-GT能与血清抗体IgM结合并诱导补体C3结合。结论异种移植抗原α-gal在肿瘤细胞上的重新表达,可能通过补体依赖的细胞毒机制,介导类似于异种器官移植排斥反应的抗肿瘤效应。; 朱圣明谢玲郑鸿秦凤刘美骆志国王艳萍; 关键词：异种抗原 A549细胞

乳腺癌HER2检测的必要性被引量：9: 2011年; 乳腺癌是一种具有生物学异质性的肿瘤,它包含不同的分子亚型,表现为不同的疾病自然史,具有不同的临床结局.这些与大多源于分子水平的异质性不同.一些有临床意义的分子标志物可为乳腺癌患者提供预后信息,有助于制定个体化治疗方案.人表皮生长因子受体2（HER2）就是这样一个有意义的分子标志物.; 倪韵碧杨雯娟步宏郑鸿; 关键词：人表皮生长因子受体个体化治疗方案分子标志物疾病自然史分子亚型

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郑鸿

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