严伟
- 作品数：23 被引量：11H指数：2
- 供职机构：东南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信理学电气工程更多>>
- 慢病毒导入的CDC25B2 siRNA对胰腺癌细胞CFPAC-1生物学行为的影响
- 2008年
- 目的利用已构建成功的、在人胰腺癌细胞株CFPAC-1中稳定抑制细胞分裂周期25同源体B（CDC2582）的重组慢病毒，建立CDC2582表达降低的细胞株，以研究该基因的作用。方法将产生CDC2582小干扰RNA（siRNA）分子的、携带绿色荧光蛋白的重组慢病毒感染CFPAC-1细胞后，用流式细胞仪筛选稳定表达的细胞株。应用RT—PCR和Westernblot分别对细胞中CDC2582的mRNA和蛋白表达水平进行分析。应用MTT法、流式细胞仪、平板克隆形成和Transwell小室法分别检测其对细胞增殖、周期、细胞克隆形成能力和迁移侵袭能力的影响。结果CDC2582 siRNA显著下调CFPAC-1细胞中CDC2582的表达，所构建的重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率，CFPAC-1细胞的增殖能力、克隆形成能力以及迁移侵袭能力显著增强，细胞周期无明显改变。结论CDC2582基因可显著影响胰腺癌CFPAC-1细胞的增殖、克隆形成和迁移能力，为利用CDC2582所介导的信号通路进行肿瘤基因治疗提供了实验依据。
- 杨正平石欣肖志张齐孔波严伟葛梓
- 关键词：慢病毒属
- 单片频率合成器WM145146的研制
- 严伟
- 对培美曲塞耐药胰腺癌Patu8988细胞株克隆、侵袭能力及相关耐药基因的研究
- 2010年
- 目的:探讨对培美曲塞耐药的胰腺癌Patu8988细胞株相对于亲本株在细胞克隆、侵袭能力及多药耐药相关蛋白1(MDR1)、ABC多药转运蛋白G家族成员2(ABCG2)、ABC多药转运蛋白C家族成员3(ABCC3)耐药基因的变化。方法:采用双层软琼脂克隆实验分别在无药及加入500μmol.L-1培美曲塞的环境下测定胰腺癌Patu8988耐药株及亲本株克隆生成能力的改变;采用Transwell侵袭小室检测两种条件下胰腺癌Patu8988侵袭能力的差异;采用RT-PCR法检测胰腺癌Patu8988细胞MDR1、ABCG2、ABCC3的mRNA表达水平,Wersten blot检测ABCG2和ABCC3的蛋白表达水平,免疫荧光及激光共聚焦检测ABCG2的表达及分布。结果:在无药及加入500μmol.L-1培美曲塞的环境下,对培美曲塞耐药胰腺癌Patu8988细胞株的增殖克隆能力均与其亲本株有差异(P<0.05),而两种培养条件下胰腺癌Patu8988细胞株的侵袭能力变化差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR检测显示,在耐药株中ABCG2、ABCC3 mRNA表达分别是其亲本株的2.5倍和1.6倍左右,而MDR1 mRNA表达仅提高到1.2倍;Werstenblot结果显示蛋白表达为其亲本株的2.4倍和1.5倍。免疫荧光检测结果显示,耐药株中ABCG2的荧光强度较强,而其亲本株细胞较弱。激光共聚焦显示,耐药株中ABCG2表达主要分布于细胞膜,细胞质内也有少量分布。结论:相对于亲本株,对培美曲塞耐药的胰腺癌Patu8988细胞株克隆能力加强,而侵袭能力无明显改变。多药耐药基因表达均有不同程度的提高,以ABCG2基因表达提高尤为明显,而且其在耐药株中主要分布在细胞膜,细胞质内也有分布。
- 杨军石欣严伟林士波顾海涛钱程佳
- 关键词：获得性耐药培美曲塞
- 连环蛋白p120在胰腺癌细胞株中的表达及其意义被引量：1
- 2009年
- 目的:了解连环蛋白p120(p120ctn)及VEGF在胰腺癌细胞株中的表达情况,探讨p120ctn对胰腺癌细胞生物学行为的影响。方法:采用RT-PCR、Western blotting方法检测5株胰腺癌细胞及胰腺星状细胞中p120ctn及VEGF的表达情况;选取表达差异明显的panc-1及Patu8988细胞株,利用细胞侵袭迁移试验观察其生物学行为。结果:与胰腺星状细胞相比,胰腺癌细胞株中p120ctn的表达均上调,但在不同胰腺癌细胞株中表达存在差异;在同一细胞株中,p120ctn与VEGF的表达量呈正相关;高表达p120ctn的胰腺癌细胞,其侵袭迁移能力要明显低于低表达的细胞。结论:胰腺癌细胞株中p120ctn的表达明显上调,并与VEGF的表达存在相关性,胰腺癌细胞p120ctn高表达其侵袭转移能力可能下降。
- 葛梓程张军石欣费阳严伟倪健琦
- 关键词：连环蛋白P120血管内皮生长因子胰腺癌细胞株
- 培美曲塞在胰腺癌化疗中的应用进展被引量：1
- 2009年
- 培美曲塞是一种作用于叶酸代谢过程中多个靶点的抗肿瘤新药,主要抑制胸甘酸合酶、二氢叶酸还原酶和甘氨酰胺核苷酸转甲酰酶。基础及临床研究证实该药对包括胰腺癌在内的多种实体肿瘤有明确的抗瘤活性。该药在胰腺癌的化疗中也起到一定作用,尤其是在吉西他滨化疗失败的患者,可以作为胰腺癌的二线化疗药物。该药的不良反应主要包括骨髓抑制和皮疹等,在补充叶酸和维生素B12的情况下,不良反应明显减轻。本文就近年来该药在胰腺癌化疗中的应用进展作一简要的介绍。
- 严伟石欣
- 关键词：胰腺肿瘤培美曲塞
- 胰星状细胞对胰腺癌细胞株Patu8988侵袭和转移的影响
- 2010年
- 目的:探讨永生化人胰星状细胞(IPSC)对胰腺癌细胞株Patu8988侵袭和转移的影响.方法:制备IPSC上清,用IPSC上清和Patu8988共培养,以单独培养的Patu8988为对照,比较实验组与对照组细胞的增殖、黏附能力,侵袭、迁移能力,克隆形成以及抵抗H2O2诱导的Patu8988凋亡能力.结果:与单独培养的胰腺癌细胞株Patu8988相比,IPSC上清对胰腺癌细胞株Patu8988细胞的增殖、黏附、迁移、侵袭能力及克隆形成能力有促进作用(均P<0.05),并能抑制H2O2诱导的Patu8988的凋亡(P<0.05).结论:胰星状细胞可能通过增强胰腺癌细胞株Patu8988的增殖、黏附、迁移、侵袭能力及克隆形成能力,并抑制其的凋亡,在胰腺癌的发展和转移中起重要作用.
- 倪建琦蒋小华严伟葛梓汤文浩
- 关键词：胰腺癌胰星状细胞
- 过渡金属修饰有机半导体(C3N4)材料的设计及光催化载流子分离效率研究
- 随着社会的不断发展,能源和环境问题亟待改善。在众多的研究中,光催化技术是一种在能源和环境领域中有着重要应用前景的技术。光催化分解水制氢为缓解21世纪能源和环境问题提供了切实可行的新方案。氮化碳(CN)作为一种传统的有机半...
- 严伟
- 关键词：光催化C3N4单原子
- 尼卡地平对胰腺癌Patu8988株培美曲塞耐药的逆转作用被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨ABCG2拮抗剂-尼卡地平在体外安全剂量下能否逆转耐药,为临床应用提供实验基础.方法:采用噻唑蓝法(MTT)测定尼卡地平对Patu8988亲本和耐药细胞的安全使用浓度,测定单用培美曲塞和联合安全剂量的尼卡地平分别对两株细胞的IC50变化;分别采用DAPI核染色和细胞流式分析在耐药细胞中单用培美曲塞组和联合尼卡地平组凋亡差异.结果:MTT结果显示尼卡地平在浓度<4.85μmol/L(2.5mg/L)时对细胞基本无不良反应.单用培美曲塞和联合安全剂量的尼卡地平对Patu8988亲本株细胞IC50无明显差异,而对耐药株细胞IC50有差异(P<0.05).流式细胞分析在耐药细胞中联合尼卡地平组凋亡比例高于单用培美曲塞组(32.27%±2.8%vs50.5%±4.2%,P<0.05).结论:安全剂量下尼卡地平能提高胰腺癌Patu8988耐药细胞株对培美曲塞的敏感性,而对其亲本株无作用.
- 杨军石欣严伟林士波顾海涛钱程佳
- 关键词：胰腺癌培美曲塞耐药尼卡地平
- 胰腺癌细胞株Puta8988对培美曲塞产生获得性耐药的分子生物学机制初步研究被引量：5
- 2009年
- 目的探索胰腺癌细胞株Puta8988对培美曲塞（pemetrexed，Alimate）产生获得性耐药的机制，分析这种耐药与培美曲塞调控通路上相关基因的关系。方法对胰腺癌细胞株Puta8988进行耐药诱导，使其对培美曲塞产生获得性耐药。然后检测正常Puta8988细胞和耐药Puta8988细胞中胸苷酸合酶（thymidylate synthase，TS），叶酰聚谷氨酸合酶（folylpolyglutamate synthetase，VPGS），还原型叶酸盐载体（reduced folate carrier，RFC）的mRNA表达水平变化。结果胰腺癌细胞株Pum8988对培美曲塞产生了耐药作用，培美曲塞长期作用后，Puta8988的50％抑制浓度（IC50）上升2．2倍（P〈0．05）。mRNA分析结果提示耐药细胞株偈的mRNA表达上调，FPGS变化不明显，RFC表达下调。结论化疗药物长期作用后，TS、FPGS、RFC的基因表达失衡，胰腺癌细胞产生了获得性耐药。对这些基因进行干预有可能提高胰腺癌细胞对培美曲塞的敏感性，从而提高疗效。
- 严伟石欣葛梓肖志杨正平杨军
- 关键词：胰腺癌培美曲塞获得性耐药
- CDC25B1对人胰腺癌细胞株Patu8988的生物学行为的影响
- 2008年
- 目的探讨CDC25B1基因在人胰腺癌细胞株Patu8988中的表达情况,并将真核表达重组载体pcDNA-CDC25B1转染至细胞中,观察CDC25B1基因对细胞生物学行为的影响,以了解它在细胞周期及胰腺肿瘤细胞恶性转化方面的作用,为研究胰腺癌的发病机制与治疗提供理论依据。方法利用Lipofectamine2000将CDC25B1转染至人胰腺癌细胞株Patu8988中,通过RT-PCR和Westernblot在mRNA和蛋白水平验证质粒转染成功,通过MTT实验、侵袭实验和细胞周期检测,观察CDC25B1对细胞生物学行为的影响。结果RT-PCR发现在胰腺癌细胞株Patu8988和转染空质粒的细胞株中,CDC25B1在mRNA水平表达很弱;转染pcDNA-CDC25B1组中CDC25B1高表达。Westernblot发现在胰腺癌细胞株Patu8988中,CDC25B蛋白有少量表达;转染pcDNA-CDC25B1组CDC25B蛋白高表达。MTT实验显示,转染pcDNA-CDC25B1组的细胞生长在72h受到明显抑制(P(0.05)。侵袭实验显示,转染pcDNA-CDC25B1的细胞其穿透Matrigel胶的能力明显增强(P(0.05)。流式细胞计量术显示,转染了pcDNA-CDC25B1组中,G1期的细胞明显增多(P(0.05);同时转染了pcDNA-CDC25B1组中,G2期的细胞明显减少,与未处理组比较有统计学意义(P(0.05)。结论在胰腺癌细胞株Patu8988中的CDC25B1转录水平很弱,存在少量CDC25B蛋白表达。转染的CDC25B1基因提高CDC25B1蛋白的表达,使细胞停滞在G1期,对细胞的生长有抑制作用,但能够增强细胞的侵袭能力;CDC25B1可能不是通过单一的调控细胞周期而实现其对细胞的影响,还存在其它多种途径。
- 肖志石欣杨正平张齐孔波严伟葛梓
- 关键词：基因转染
