刘玉奇
- 作品数:5 被引量:13H指数:3
- 供职机构:复旦大学化学系生化与分子生物学实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学理学更多>>
- 一个新锌指蛋白的表达和纯化——ZNF191蛋白及其锌指区ZNF191(243-368)被引量:3
- 1999年
- 通过PCR方法 ,将ZNF1 91基因的cDNA的第一开链阅读框 (ORF)及其锌指区ZNF1 91 ( 2 43 36 8)装入PTSA 1 8表达载体 ,以E .coliBL2 1 (DE3)为宿主菌 ,成功地表达了目标蛋白 ,并通过DEAE5 2 ,CM2 3,Heparin Sephrose 4B等层析柱对目标蛋白进行了纯化 .ZNF1 91锌指蛋白及其锌指区ZNF1 91 ( 2 43 36 8)蛋白经考马斯亮蓝染色的聚丙烯酰胺凝胶电泳检查 ,纯度达单一带水平 .其中对ZNF1 91蛋白经N端氨基酸微序列分析证明为目的蛋白 .
- 刘玉奇余龙余文浩施少林孙炳耘吴国俊黄仲贤
- 关键词:锌指蛋白纯化DNA
- 锌指蛋白ZNF191(243-368)G321A;N324L;G321A/N324L突变体的制备和表征被引量:3
- 2003年
- 通过分子生物学的蛋白质工程方法对锌指蛋白ZNF191(243 368)的第三锌指区Gly321和Asn324进行了定点突变,在大肠杆菌BL21中表达,通过DEAE52,CM23,肝素柱CL 6B纯化,最终获得了ZNF191(243 368)G321A;N324L;G321A/N324L等3个突变体蛋白.运用凝胶电泳、UV光谱、EDTA滴定、金属离子(Co2+,Ni2+)取代等方法对突变体蛋白进行了初步表征.这为今后进一步研究该蛋白的结构和功能提供了必要的物质基础.
- 黄仲贤汤李民刘玉奇谢毅余龙
- 关键词:锌指蛋白突变体分子生物学
- 锌指蛋白ZNF191(243-368)的拉曼光谱
- 2003年
- 采用拉曼光谱技术研究了锌指蛋白ZNF191锌指区蛋白ZNF191(243-368)在野生型状态及热变性、EDTA变性条件下的结构及其变化. 结果表明, ZNF191(243-368)中Zn2+ 离子与His/Cys的配位是维持锌指结构的重要因素, 它对于维持锌指结构单元中的疏水核及二级结构均起到重要作用. 拉曼光谱是考察ZNF191(243-368) 结构的一种有力手段.
- 黄仲贤张海亮姚文华刘玉奇周晶汤李民
- 关键词:锌指蛋白ZNF191拉曼光谱热变性结合蛋白
- 锌指类蛋白研究的新进展被引量:8
- 1998年
- 综述了锌指蛋白的最新研究状况。
- 黄仲贤刘玉奇
- 锌指蛋白ZNF191(243~368)突变体I323W和R327W与寡聚核苷酸作用的荧光光谱
- 2002年
- 利用PCR方法对锌指蛋白ZNF191(243-368)的Ⅱ323和Arg327进行定点突变,成功地获得了突变体蛋白ZNF191(243~368)1323W和R327W;并利用荧光光谱研究了锌指蛋白和它的突变体蛋白ZNF191(243-368)1323W和ZNF191(243-368)R327W与寡聚核苷酸的相互作用.以溴化乙锭(EB)为荧光探针,考察了1323W和R327W的突变对锌指蛋白ZNF191(243~368)结合寡聚核苷酸的影响.并计算了锌指蛋白突变体1323W和R327W与DNA的结合常数Kz.讨论了可能的结合模式.
- 周晶刘玉奇汤李明滕昕辰黄仲贤唐宁
- 关键词:突变体寡聚核苷酸锌指蛋白定点突变荧光光谱