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中药重楼皂苷的分离、结构鉴定及生物转化的研究: 本论文研究了新月弯孢霉(Curvularia lunata 3.4381)生物转化重楼甾体皂苷单体PI的生物反应,得到的新化合物以达到减毒作用。考察了重楼皂苷提取分离纯化的最佳工艺以及重楼皂苷的体外药理活性,并讨论了重楼...; 刘翊; 关键词：新月弯孢霉细胞毒活性构效关系; 文献传递

滇重楼活性物质的分离鉴定与体外药理作用的研究被引量：15: 2008年; 研究滇重楼中甾体皂苷类化合物的体外抗肿瘤作用。采用硅胶柱层析、凝胶色谱、制备高效液相色谱(P-HPLC)及高效液相色谱(HPLC)等分离手段,对滇重楼各溶剂萃取部分进行了分离纯化,得到了7个甾体化合物。本实验在前期实验证明滇重楼乙酸乙酯和正丁醇提取物具有一定的抗肿瘤作用的基础上,以LA795小鼠肺腺癌细胞为研究对象,进一步考察了分离鉴定的单体化合物的抗肿瘤作用。结果表明,单体化合物1～7均表现出对LA795细胞生长的抑制作用;化合物1、2对LA795细胞具有明确的抑制作用,化合物3～7对LA795细胞具有较强的细胞毒活性。讨论了细胞毒活性与化合物结构之间的构效关系,即皂苷元C-3位连接糖链时,糖的数目及种类、连接方式及组成类型对其生物活性都起着至关重要的作用。; 刘翊杜连祥高文远王旭高伟樊欣迎; 关键词：滇重楼甾体皂苷细胞毒活性

表皮生长因子受体干扰序列与白细胞介素24融合蛋白的原核表达被引量：1: 2009年; 目的:在大肠杆菌中表达表皮生长因子受体干扰序列(EGFRi)与白细胞介素24(IL-24)的融合蛋白。方法:人工合成肿瘤细胞表面受体特异性结合位点EGFRi核苷酸序列,应用重叠延伸PCR技术将其与IL-24基因连接,其间引入一段柔软短肽编码基因;将融合基因克隆入pET-22b原核表达载体,IPTG诱导融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达条件进行优化;用His.Bind纯化试剂盒对表达产物进行纯化,SDS-PAGE进行鉴定。结果:酶切和测序结果证实EGFRi-IL-24融合基因的原核表达载体构建正确;在IPTG浓度为0.8mol/L、28℃诱导10h的条件下,可溶性融合蛋白表达量最高;表达产物的相对分子质量与预期值一致,为22000;经纯化得到了均一的融合蛋白。结论:获得大肠杆菌表达的融合蛋白EGFRi-IL-2,可用于活性分析。; 樊欣迎包乐媛朱婧刘翊杜连祥; 关键词：白细胞介素24 融合蛋白原核表达

响应面法优化赖氨酸脱羧酶产酶培养基被引量：2: 2009年; 目的:对蜂房哈夫尼菌产L-赖氨酸脱羧酶培养基进行优化。方法:采用响应面优化的方法。首先单因素实验得到最适培养基成分为:葡萄糖2%,酵母膏2%,MgSO40.03%,KH2PO40.01%,NaCl 0.3%,L-赖氨酸0.5%,维生素B60.1%,玉米浆4%,酶活达到180.85U/mL。在此基础上,用PB试验筛选出对酶活影响显著的3个因素(葡萄糖、酵母膏、玉米浆),再通过Box-behnken实验对这三个因素进行优化。结果:得到产酶最佳培养基为葡萄糖1.84%,酵母膏2.20%,玉米浆3.66%,MgSO40.03%,K2HPO40.01%,NaCl 0.3%,L-赖氨酸0.5%,维生素B60.1%。结论:响应面优化的方法使酶活达到203.14U/mL,比优化前的比酶活(7.03U/mL)提高28.9倍,在单因素的基础上提高了11.3%。; 王建玲张建昌朱婧樊欣迎刘翊杜连祥

一种降糖复方中药提取液中总多糖含量的测定被引量：5: 2009年; 目的建立分光光度法测定降糖复方中药提取液中总多糖的含量。方法紫外分光光度法，苯酚-硫酸法。结果该方法的线性范围为5～40μg／ml，r=0．9993，平均回收率为99．36％，RSD=3．15％。结论该方法简便易行，重现性良好。; 高伟王晓娟刘翊杜连祥; 关键词：总多糖紫外分光光度法

不同取代度山药醋酸淀粉的合成及表征被引量：5: 2008年; 以山药淀粉为原料,浓硫酸作催化剂,冰醋酸和醋酸酐为改性剂,合成了不同取代度的山药醋酸淀粉.用傅立叶红外(FTIR)、扫描电子显微镜(SEM)、差示扫描量热(DSC)、热重法(TG)和X射线衍射(XRD)测试对山药醋酸淀粉的结构、形貌、热性质和结晶性进行表征.结果表明随着山药醋酸淀粉取代度的提高,其结晶度从36.10%降到10.96%,分解温度从325℃提高到372℃,熔融温度从273℃降至226℃.; 王旭高文远张黎明肖培根李克峰刘翊; 关键词：山药形貌热性质

新月弯孢霉对重楼皂苷发酵条件的优化被引量：1: 2010年; 目的:利用新月弯孢霉对重楼皂苷的转化条件进行优化。方法:采用新月弯孢霉(Curvularia lunata)ATCC3.4381,利用单因素实验对其发酵条件进行优化。采用Plackett-Burman(P-B)方法筛选出对转化率有重要影响的4个因素(蔗糖、酵母膏、(NH4)2SO4和玉米浆的添加量),并采用响应面试验设计(RSM)对重要因素进行优化。结果:最适的培养基条件为:即蔗糖浓度为7.847g/L;酵母膏的浓度为1.969g/L;硫酸铵的浓度为4.824g/L;玉米浆的浓度为11.81g/L。结论:优化后其转化能力得到了明显的提高,转化率为76.80%,并且与拟合值77.18%接近。; 王建玲刘翊邹菁樊欣迎朱婧杜连祥; 关键词：响应面法新月弯孢霉

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刘翊