司晓辉
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 供职机构：西南民族大学更多>>
- 发文基金：四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 牦牛乳酸脱氢酶A的分离纯化、酶学性质及其基因的克隆被引量：5
- 2008年
- 【目的】分离纯化牦牛骨骼肌中的乳酸脱氢酶-A(LDH-A),并克隆其cDNA。通过比较牦牛与普通牛的LDH-A的酶学性质和cDNA序列,为研究牦牛适应高海拔、低氧环境,在分子水平上找到一些线索。【方法】采用染料亲和层析和DEAE-Sephadex离子交换层析等方法,分别从牦牛和普通牛骨骼肌中纯化LDH-A,并对其酶学性质进行比较;通过RT-PCR方法克隆牦牛LDH-A的cDNA序列,并与GenBank登录的普通牛LDH-A的cDNA序列进行比对。【结果】纯化的牦牛LDH-A比活力为103.9U·mg-1蛋白,纯化倍数为18.2。SDS-PAGE和PAGE分析均显示一条带。酶动力学参数测定显示,牦牛LDH-A的KmNADH为0.097,Km丙酮酸钠为1.897,均不同程度高于普通牛,其中对丙酮酸钠的Km大约是普通牛的2倍。根据牦牛LDH-A的cDNA序列预测的氨基酸序列与普通牛LDH-A的氨基酸序列比较,只有2个氨基酸残基的改变(257Val-Ala和315Tyr-Cys)。【结论】牦牛LDH-A对丙酮酸的高Km可避免骨骼肌中产生过多的乳酸,是适应进化的结果;这种升高可能与其氨基酸序列变化导致的空间结构微小改变有关。
- 郑玉才司晓辉贺庆华金素钰洪键
- 关键词：牦牛乳酸脱氢酶纯化动力学性质基因克隆
- 牛初乳免疫球蛋白体外胰蛋白酶消化研究被引量：6
- 2005年
- 采用硫酸铵盐析、DEAE离子交换层析纯化牛初乳免疫球蛋白IgG,并对其进行胰蛋白酶体外消化研究.结果表明:牛IgG比牛血清白蛋白(BSA)抗胰蛋白酶水解.IgG经低温巴氏灭菌处理后,其被胰蛋白酶消化的能力变化不大;经90℃高温3min处理后,被胰蛋白酶水解率大幅度提高,提示IgG的立体结构在保护其完整性方面有重要作用;另外,藏绵羊小肠液对IgG的降解率高于胰蛋白酶.
- 何梅龄郑玉才金素钰吕程司晓辉
- 关键词：免疫球蛋白胰蛋白酶体外消化
- 高原家畜低氧适应的分子机制及其应用研究
- 郑玉才文勇立王永金素钰李玉萍司晓辉朴影周静洪键
- 1、任务来源： 四川省青年科技基金课题：“牦牛乳酸脱氢酶-B遗传变异体的分离纯化及其基因的克隆”，No.05ZQ026-024；国家民委课题：“牦牛乳酸脱氢酶-B遗传变异体的纯化及其性质研究”，2004年度；西南民族大...
- 关键词：
- 关键词：低氧适应分子机制牦牛乳酸脱氢酶
