吴勇浒
- 作品数:5 被引量:15H指数:2
- 供职机构:广西医科大学更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学更多>>
- 蓖麻蚕蛹生物反应器生产重组人表皮生长因子的研究被引量:2
- 2013年
- 重组人表皮生长因子(rhEGF)已经广泛应用于医疗和化妆品。以杆状病毒AnpeNPV为基因表达载体,昆虫为生物反应器而建立的蛋白表达系统已获得成功。本文以人表皮生长因子(hEGF)基因替代柞蚕AnpeNPV中的核多角体基因而获得的AnpehEGF病毒为载体、蓖麻蚕蛹为生物反应器表达的rhEGF蛋白质,采用PCR、West-ern blot和ELISA等实验方法对其进行检测,硫酸铵沉淀和Ni-NTA Agrose亲和层析法对其进行分离纯化。实验结果显示,无论是在基因或是蛋白水平上都可检测到rhEGF的表达。AnpehEGF感染蚕蛹后第6d开始检测到rhEGF的表达量快速上升,第12d达到高峰,第3、6、9、12d的表达量分别为19.77、24.90、618.59、1 952.46ng/g,而到了病毒感染后期(第15d)出现了蛋白降解现象。表达的rhEGF通过分离纯化获得了较纯的产品。结果表明蓖麻蚕蛹作为生物反应器生产外源蛋白rhEGF是可行的,说明利用AnpeNPV和蓖麻蚕蛹可开发更加低成本而又高效的rhEGF生产新途径。
- 伍玉婷黄元姣雷丹青吴勇浒李牡艳小林淳王先裕
- 关键词:生物反应器重组人表皮生长因子
- 细胞实验检测蓖麻蚕蛹生物反应器表达的重组人表皮生长因子的生物学活性被引量:2
- 2012年
- 目的探讨蓖麻蚕蛹生物反应器中分离纯化获得的重组人表皮生长因子(rhEGF)蛋白质的生物学活性。方法采用Tricine-SDS-PAGE和免疫印迹法(Western blot)鉴定rhEGF,通过MTT和台盼蓝法检测rhEGF的细胞活性。结果 Tricine-SDS-PAGE、Western blot结果显示,蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF具有正确的分子量和免疫原性;MTT法显示,纯化的rhEGF具有酶促活性,且酶促活性优于rhEGF标准蛋白(P<0.05),其最高活性浓度为1.0μg/L,在0.0625~1.0μg/L浓度范围内具有剂量依赖性;rhEGF能够促进Balb/c3T3细胞的分裂增殖,效果优于rhEGF标准蛋白(P<0.05)。结论 AnpehEGF感染的蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF,具有类似天然hEGF的生物学活性,且效果优于rhEGF标准蛋白;rhEGF的细胞实验为进一步的动物实验提供了基础。
- 伍玉婷黄元姣雷丹青吴勇浒李牡艳
- 关键词:重组人表皮生长因子生物学活性细胞实验
- 鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白浓度测定及临床意义被引量:5
- 2014年
- 目的探讨鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白水平与临床分期及血浆EB病毒VCA-IgA抗体的相关性。方法用ELISA法检测鼻咽癌患者(Ⅱ期36例,Ⅲ期104例,Ⅳ期104例)和104例体检健康者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度和EB病毒VCA-IgA抗体水平,用SPSS 16.0统计软件进行数据分析。结果鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度分别为0.44(0.25,0.78)ng/mL和202.71(185.79,238.54)pg/mL,显著高于体检健康者0.29(0.18,0.44)ng/mL和192.43(170.66,193.42)pg/mL(P均<0.05)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期鼻咽癌患者血浆S100A8、S100A9蛋白浓度均高于体检健康者(P均<0.05),且Ⅱ、Ⅲ期鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度高于Ⅳ期(P<0.05);Ⅲ期S100A9蛋白浓度高于Ⅱ期(P<0.05)。相关分析结果显示,鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度与EB病毒VCA-IgA抗体水平无相关性(r分别为-0.04,-0.07,P均>0.05)。结论鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白水平升高,且与临床分期有关。
- 韩冉冉黄元姣陈铃肖晓兰易翔蔡红武吴勇浒
- 关键词:鼻咽癌
- 鼻咽癌相关血清标志物的筛选与验证
- 鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是源于鼻咽部上皮组织的一种恶性肿瘤,95%以上临床病例属低分化癌和未分化癌,恶性程度高。目前确诊鼻咽癌主要依靠病理诊断,由于鼻咽癌早期不易察觉,大部分病人...
- 吴勇浒
- 关键词:鼻咽癌ITRAQS100A8S100A9血清标志物
- 文献传递
- 从野外昆虫体内分离的5株微孢子虫的生物学特性与分子系统发育研究被引量:6
- 2012年
- 从广西蚕区的野外昆虫菜粉蝶(Pieris rapae)、桑尺蠖(Hemerophila atrilineata)、斜纹夜蛾(Spodoptera litura)的体内收集到5株对家蚕有一定食下感染力的微孢子虫,通过生物学性状、分子系统发育研究,为其分类鉴定提供依据。来自野外昆虫的5株微孢子虫均具有Nosema属的生物学特性:显微镜下观察形状均呈长卵圆形,与家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)有较明显差异;在生活史的各发育阶段均为双核,以二分裂方式增殖,最后形成双核成熟孢子;与Nb抗血清均产生阳性凝聚反应;超微结构观察均具双核,极丝圈数在12~14圈之间,极丝倾斜角与Nb有差异。根据5株野外昆虫微孢子虫与其它昆虫微孢子虫基于SSU rRNA基因序列构建的系统发育树,以及基于SSU rRNA和rRNA ITS基因序列进行的相似性和遗传距离分析,初步认为5株野外昆虫微孢子虫与家蚕微孢子虫同属异种。
- 黄旭华祁广军汤庆坤潘志新朱方容黄元姣林强罗梅兰石美宁吴勇浒黄深惠
- 关键词:野外昆虫微孢子虫生物学特性分子系统发育