夏华强
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅医学院生殖与干细胞工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PDX-1表达质粒的构建及表达
- 2009年
- 目的:为进一步研究PDX-1基因的功能打下基础。方法:从人的胰腺cDNA中PCR扩增PDX-1基因的阅读框架,构建质粒pAAV-PDX-1。用pAAV-PDX-1转染293T细胞48小时后,用RT-PCR和Western Blot方法检测293T细胞中mRNA和蛋白水平PDX-1的表达。结果:转染了pAAV-PDX-1的293T细胞中有PDX-1的表达,而在转染质粒pAAV-MCS和未转染的293T细胞中均没有检测到PDX-1的表达。结论:构建的pAAV-PDX-1质粒在mRNA和蛋白水平都能表达PDX-1。
- 夏华强刘律君徐小明卢光琇
- 关键词：质粒构建293T细胞
- PDX-1基因对人胚肾细胞胰岛发育相关基因表达的影响
- 2010年
- 【目的】研究人PDX-1基因对胰岛发育相关基因和胰岛素基因(Insulin,INS)表达的影响,探讨PDX-1基因诱导非β细胞为胰岛素分泌细胞的可能性。【方法】采用PCR扩增技术,从人的胰腺cDNA中扩增PDX-1基因和INS基因的阅读框架,分别构建了质粒pAAV-PDX-1和pAAV-INS;将pAAV-PDX-1转染人胚肾细胞(293T)48 h后,RT-PCR检测293T细胞中胰岛发育相关基因的表达;再将pAAV-PDX-1和pAAV-INS共转染293T细胞48 h后,RT-PCR检测293T细胞中INS的表达。【结果】转染pAAV-PDX-1的293T细胞中,检测到胰岛发育相关基因PDX-1、Ngn3、PC2、BETA2的表达;PDX-1没有直接增强INS基因表达的作用。【结论】在293T细胞中,PDX-1基因对胰岛发育相关基因的表达有重要影响,PDX-1在诱导非β细胞为胰岛素分泌细胞的过程中可能有着重要的作用。
- 夏华强徐小明刘律君卢光琇
- 关键词：293T细胞
- miR375表达质粒构建及表达研究被引量：1
- 2010年
- 目的寻找一种高效、简便的构建表达miRNA质粒的方法。方法该研究用PCR方法直接从小鼠gDNA扩增了包含miRNA375(miR375)前体序列在内的一个126bp片段以构建质粒pAAV-miR375。该研究用pAAV-miR375转染Hela细胞48h后,用定量RT-PCR方法和Northernblot检测Hela细胞中miR375的表达。结果转染了pAAV-miR375的Hela细胞中有miR375的表达,而在转染了空质粒pAAV-MCS和未转染的Hela细胞中没有检测到miR375的表达。结论该研究所构建的pAAV-miR375质粒能够表达miR-NA375。作者介绍的这一种构建表达miRNA质粒的方法比以往的方法更快速、高效、简便和保证序列的正确性。
- 夏华强潘艺徐小明刘律君彭炬卢光琇
- 关键词：质粒构建HELA细胞
- miR-375过表达引起胰腺损伤的初步研究
- microRNA /(miRNA,即微小RNA/),是体内22nt的一类非编码的RNA,由miRNA的前体经Dicer酶的作用加工而来。在细胞的生长、增殖、代谢、调亡等方面都有着重要的作用。它可以通过与特定mRNA结合,...
- 夏华强
- 关键词：胰腺发育PDX-1
- 文献传递
